SSR分子标记分析云南引种油橄榄种质资源遗传多样性

【目的】对云南油橄榄出现不同品种之间的混淆、同种异名及同名异种进行准确鉴定。【方法】利用SSR荧光标记技术对云南永仁及丽江收集的82份油橄榄样品进行遗传多样性和分子鉴定。【结果】所筛选的20对引物共检测出181个等位变异,每对引物检测出3~14个等位变异,平均为9.05个。整个群体的观望杂合度为0.138 1~0.822 6之间,平均为0.489,期望杂合度为0.509 8~0.871 5之间,平均为0.721 6,PIC值在0.8以上的引物位点有3个,分别是DCA09、DCA18和GAPU71B。20个位点的扩增产物片断大约在53~233 bp之间。根据各品种的Nei’s遗传距离,运用UPGMA方法构建了所有品种的聚类图,结果 82份油橄榄参试样本被聚成了9个大组,选育品种与引种品种未被分开,但大多数具有相同品种名称的材料被分在同一大组中。【结论】云南油橄榄选育品种及引种品种均具有高水平遗传多样性。     

灯盏花成分专用型种源评价与鉴定

收集和鉴定了云南省和贵州省共46份灯盏花种质资源,筛选出适合生产不同药品的成分专用型种源,为专用型品种选育提供参考。利用HPLC测定了灯盏花种源10种活性成分含量,相关分析阐明各成分含量间的相关性,聚类分析对种质资源进行分类。结果表明：16份灯盏花种源灯盏乙素（scutellarin, SE）含量在2.5%以上,是培育灯盏花素专用型品种的优良材料,其中4份种源同时含有高含量（>1.0%）的双咖啡酰奎宁酸酯（dicaffeoylquinic acids, diCQAs）,是培育灯盏细辛专用型品种的优良材料;同时,筛选出8份总黄酮（total flavonoids, TFs）含量高于3.5%的种源,适合选育总黄酮专用品种。相关性分析表明,SE含量与diCQAs和TFs含量均显著正相关,是灯盏花品质育种的标志性成分。聚类分析将灯盏花种源分为三大类,除1个种源的SE含量和diCQAs含量接近（第Ⅲ类）外,其他种源SE均占总活性成分的60%以上,其中第Ⅰ类为高TFs型种源,TFs占到总活性成分的80%以上,diCQAs占总成分的15%以下;第Ⅱ类为高diCQAs型种源,diCQAs占总成分的16.9%~28.9%,TFs占到总活性成分的80%以下。该结果表明灯盏花种源活性成分组成存在多种类型,为专用型品种选育提供了可能,灯盏乙素含量可以作为专用型种源筛选的首要指标。     

雪胆多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

[目的]优化雪胆水溶性和水不溶性多糖提取工艺,并分析其抗氧化活性,为雪胆多糖的开发利用提供参考依据.[方法]采用热水浸提法提取雪胆水溶性多糖、碱液浸提法提取雪胆水不溶性多糖,以多糖提取率为考察指标,通过单因素试验和正交试验优化2种雪胆多糖的提取工艺条件,同时测定雪胆多糖清除羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和超氧阴离子(O-2·)的能力及还原能力.[结果]影响热水浸提雪胆水溶性多糖的因素排序为提取温度>料液比>提取时间,最佳提取工艺条件为:料液比1:16、提取温度80℃、提取时间2.0 h,在此条件下,雪胆水溶性多糖提取率为(28.70±0.63)%;影响碱液浸提雪胆水不溶性多糖的因素排序为料液比>提取温度>提取时间,最佳提取条件为:料液比1:18、提取温度70℃、提取时间2.0 h,在此条件下,雪胆水不溶性多糖提取率为(31.43±0.42)%.雪胆水溶性多糖和水不溶性多糖对·OH和DPPH自由基均有较好的清除效果,2种雪胆多糖质量浓度为0.5 mg/mL时,对DPPH自由基的清除率在50.00%以上,质量浓度为0.1 mg/mL时,对·OH的清除率在50.00%以上;此外,2种多糖具有良好的还原能力和清除O-2·能力,均随多糖质量浓度的增加而增强.[结论]采用正交试验优化获得雪胆水溶性多糖热水浸提工艺和雪胆水不溶性多糖碱液浸提工艺,提取操作简便,方法可行,提取的2种多糖均具有较强的抗氧化活性,可作为天然抗氧化资源加以利用.     

雪胆多酚的稳定性及其对α-淀粉酶的抑制作用

采用Folin-Ciocalte法测定雪胆中的多酚含量,研究金属离子和温度对多酚稳定性的影响,并分析多酚对α-淀粉酶活性的抑制作用和抑制类型.结果表明,Mn2+、Fe2+、Fe3+和Cu2+对多酚具有破坏作用,其中Mn2+对多酚的破坏作用最显著;温度过高或者过低不利于多酚的保存,温度在25～45℃多酚保存效果最佳;酶促动力学研究表明,雪胆多酚对α-淀粉酶具有抑制作用,其抑制作用类型为可逆竞争性抑制,表明雪胆具有开发为辅助降糖保健食品或药品的价值.     

云南辣木种植区气候条件适宜性初步评价

对云南省辣木(Moringa oleifera)种植区域的生产状况及适宜性进行了调查和评价。根据气候条件适宜性，综合考虑年平均气温、≥10℃积温、极端最低气温和指示植物等因素，初步把种植区按县划为适宜区、次适宜区及不适宜区。结果表明，云南辣木适栽区域主要分布在金沙江、澜沧江、红河、怒江、依洛瓦底江和南盘江等水系的低热河谷区。这为云南省辣木种植提供了参考依据。     

甘蔗腋芽苗亚无性系种性比较研究

甘蔗生产上一般用梢部做种,繁殖倍数低,繁殖速度较慢.甘蔗腋芽快繁新技术的应用实现了"以芽繁芽"的方式繁殖甘蔗良种.这一方法由于不经过细胞的脱分化过程,以及避免了2,4-D的作用从而减少了由此而引起的种性变异.本试验对甘蔗品种Roc16的腋芽苗二代、三代等亚无性系与种茎苗的种性变异情况作了比较,旨在为甘蔗腋芽快速繁殖种苗技术提供理论依据.     

促进滇重楼皂苷类活性成分积累的内生真菌筛选

【目的】植物内生菌(Endophyte)是近年来深受重视的一种新型的微生物能源,具有固氮、促进植物生长、增强宿主植物抗逆性等作用,目前研究表明:内生菌可增强宿主植物合成活性物质的能力,甚至它们本身也能产生与宿主植物相同或相近的生物活性物质。【方法】以传统药用植物滇重楼(Pairs polyphylla var.yunnanensis)为研究对象,从滇重楼地下块茎中分离得到23株内生菌,对其进行分子鉴定,之后与滇重楼组培苗进行共生培养,一段时间后利用高效液相色谱法检测组培苗的皂苷含量。【结果】最终筛选出2株对滇重楼组培苗皂苷含量有促进作用的菌株。【结论】人参生柱隔孢和木霉菌能促进滇重楼皂苷类活性成分的积累。     

大麦籽粒中4种主要黄酮类化合物的HPLC测定方法研究

为给大麦主要黄酮类化合物含量的快速测定及开发利用提供依据,对利用高效液相色谱技术(HPLC)分离和同时测定大麦中黄酮类化合物儿茶素、杨梅素、槲皮素、山奈酚含量的方法进行了研究.结果表明,采用HPLC同时测定4种大麦黄酮类化合物的优化色谱条件为:YMC-Pack ODS AM-303 (5 μm, 250 mm_4.6 mm i.d.)色谱柱;流动相A-0.1%冰乙酸水溶液,B-乙睛,梯度洗脱;流速0.8 mL/min,进样量10 μL.儿茶素、杨梅素、槲皮素、山奈酚分别在0.063～2.000 μg (R2=0.9999)、0.034～1.100 μg (R2=0.9998)、0.025～0.800 μg (R2=0.9993)、0.018～0.560 μg (R2=0.9995)成良好的线性关系,加样回收率分别为96.88%(RSD=1.30%)、98.30%(RSD=0.57%)、96.29%(RSD=1.20%)、101.59%(RSD=0.73%). 测定方法简便、快捷,结果准确、重复性好,可用于大麦4种主要黄酮类化合物的同时测定.     

基于“3414”的三七氮磷钾施肥量研究

通过研究氮磷钾肥对三七[Panax notoginseng（Burk）F.H.Chen]产量及主要有效成分产量的影响,为三七种植生产推荐合理的施肥量,试验采用"3414"随机区组设计,进行连续2年的田间小区试验,测定三七植株农艺性状、产量、总皂苷产量等指标,通过肥料效应函数方程拟合氮磷钾施肥量。结果表明,施肥不同程度促进了三七株高、茎粗、叶长、叶宽等农艺性状,且以适当施氮和磷的效果为最佳;二年七（二年生三七）对钾的依赖性较氮磷强,而三年七（三年生三七）对氮的依赖性最强;施氮能显著提高三七单位面积总皂苷产量,在低氮水平即可获得最高总皂苷产量,而磷、钾肥对皂苷含量及总皂苷产量的影响不明显;氮磷钾对三七产量的影响有互作效应,低磷、中钾水平利于氮肥肥效发挥,低氮、中钾水平利于磷肥肥效发挥,而低氮、中磷水平利于钾肥肥效发挥。根据三七总皂苷产量的三元二次回归方程,最大化三七总皂苷产量的施肥量：二年七为N 157~164 kg·hm^-2、P₂O₅ 179~187 kg·hm^-2、K₂O 337~356 kg·hm^-2;三年七为N 192~200 kg·hm^-2,P₂O₅ 179~187 kg·hm^-2,K₂O 412~435 kg·hm^-2。因此,分别针对二年七和三年七,适当控制施氮量和施钾量,增加施磷量,将三者进行合理配比,对提高单位面积三七总皂苷产量有重要意义。     

滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)的内生细菌的分离与鉴定

滇重楼(P. polyphylla var. yunnanensis)是中国传统药用植物,多年生草本植物。很多研究已经证明,植物内生菌在植物次生代谢过程中起着十分关键的作用。鉴于此,本研究利用栽培于云南大理的滇重楼为实验材料,对其全株组织(叶,茎,根状茎)内生细菌进行了分离、纯化,并通过测序方法对其种类进行鉴定。结果显示滇重楼叶中内生细菌含有8属11种,茎中含有2属5种,根茎中含有9属11种。滇重楼不同组织中的内生细菌种属分布差异大,叶与根状茎中的内生细菌种类只共有鞘氨醇杆菌属,其余都不共有,而茎与叶、根状茎中的内生细菌都不相同,表明滇重楼内生细菌在不同组织中所体现的多样性及不同内生菌在分布上的差异性。本研究结果为后续滇重楼内生菌的多样性开发利用提供了科学依据,为未来滇重楼内生细菌深度挖掘与利用提供研究基础。