独一味4种药用成分含量的测定

为了建立同时测定独一味中连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草苷和木犀草素4种药用成分含量的高效液相色谱(HPLC)检测方法,采用独一味样品的甲醇提取物,建立了该测定方法,并进行了连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草苷和木犀草素的线性范围和平均加样回收率的分析.结果表明:独一味样品中含连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草苷和木犀草素4种药用成分;精密度,连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草苷和木犀草素的峰面积(RSD)分别为0.65％、0.92％、0.73％和0.77％;稳定性,连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草苷和木犀草素的RSD分别为0.78％、1.15％、1.06％和1.22％;重复性,连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草苷和木犀草素的RSD分别为1.35％、0.76％、1.18％和0.91％;4种药用成分的加样回收率分别为100.66％、99.32％、97.07％和99.65％,RSD分别为2.83％、1.97％、2.01％和1.58％;10批药材中4种药用成分的含量分别为0.430～6.782mg/g、0.661～8.600 mg/g、1.320～6.877 mg/g和0.043～0.154mg/g.该方法准确可靠,重复性好,可用于独一味中连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、木犀草苷和木犀草素含量的同时测定.     

罗汉松内生真菌的抑菌活性研究

为了研究药用植物内生真菌的次生代谢产物是否具有抑菌活性,以96株罗汉松内生真菌为研究材料,将菌丝及其培养液经氯仿-甲醇抽提后,采用杯碟法测定了全部菌株的抑菌活性。罗汉松内生真菌中49%的菌株具有抑菌作用,其中菌株LHS18、LHS42、LHS67、LHS92和LHS93抽提物经100倍稀释后对金黄色葡萄球菌仍有强的抑菌作用,菌株LHS30抽提物的100倍稀释溶液对大肠杆菌的生长有强烈的抑制作用。对抑菌活性较强的6株菌根据其ITS序列相似性进行了分子鉴定。菌株LHS18和LHS42鉴定为烟曲霉（Aspergillus fumigatus）,LHS92为四孢脉孢菌（Neurospora tetrasperma）,LHS30为丝枝霉（Aphanocladium sp.）,LHS67为拟茎点霉（Phomopsis liquidambari）,LHS93未能鉴定出种属。研究结果提示,罗汉松内生真菌中49%菌株具有抑菌活性,其中6株菌对动物和人类的病原菌有强列的抑制作用,是挖掘高效抑菌物质的重要资源。     

月腺大戟内生菌分离纯化及抑菌活性筛选

从月腺大戟的根、茎、叶中分离出内生菌41株,细菌18株、真菌23株。7株供试菌用滤纸片法分别对内生菌发酵液进行了抗菌活性的研究。结果表明：月腺大戟内生菌对7种供试菌有一定的抑菌活性,内生真菌与内生细菌的抑菌活性存在差异,其中YJX1、YJX6和YJZ15对供试菌具有普遍抑菌作用。     

高大毛霉液体深层培养研究

利用豆腐生产工艺中的副产物黄泔水为溶剂,通过单因素实验和正交实验,在28℃、200 r/min摇瓶培养条件下,确定高大毛霉MHC-7最佳培养基为黄豆粉3%、可溶性淀粉0.4%、硫酸镁0.2%、磷酸二氢钾0.2%、蔗糖0.3%和黄泔水。培养基中碳氮比为1.5、最适接种量为6%、最适起始pH值为6.0,通过生物量测定,MHC-7液体培养在36 h达到最大值(1.363 g/100 mL)。     

紫叶稠李叶片中黄酮的提取工艺优化

以经过清洗、烘干、粉碎并且过筛的紫叶稠李叶粉末为原料,利用乙醇提取法,考察了乙醇浓度、提取时间、液料比、温度4个单因素对紫叶稠李叶黄酮提取率的影响,并在单因素试验的基础上进行了响应面试验,研究不同提取条件对紫叶稠李叶中总黄酮含量的影响.结果表明:紫叶稠李叶中黄酮提取的最佳工艺条件:乙醇浓度为70％,提取时间为80 min,液料比为40∶1 mL/g,提取温度为60℃.     

安顺市金刺梨果醋的开发研究

本研究以金刺梨为原料,通过酒精发酵、醋酸发酵过程酿制金刺梨果醋。在醋酸发酵过程中,以初始酒精浓度、发酵温度、醋酸接种量等指标来进行分析,通过正交试验确立金刺梨果醋的最佳生产工艺条件,最佳生产工艺条件为初始酒精浓度为8%,发酵温度为31℃,醋酸接种量为0.1%。     

伞塔菌与鸡枞菌子实体氨基酸测定分析

采用L-8800型氨基酸自动分析仪,色谱条件:标准分析柱4.6mm×60.0mm,反应柱温度:57℃,反应器温度:136℃,分别测定了伞塔菌和鸡枞菌子实体菌柄及菌盖中的氨基酸组成。结果表明:两种菌的菌盖中均含有16种氨基酸,但伞塔菌盖的氨基酸总量(12.04%)仅为鸡枞菌盖(28.1715%)的一半;但两种菌的菌柄中只含有15种氨基酸(缺少甲硫氨酸),伞塔菌柄的氨基酸总量(6.9325%)为鸡枞菌菌盖(20.1479%)的三分之一。并且鸡枞菌盖、菌柄中谷氨酸的含量分别是伞塔菌的2.9倍和4.1倍。因此,鸡枞菌的营养价值更高且味道更鲜美。     

三尖杉内生真菌的遗传多样性研究

本研究以三尖杉的根、茎、叶中分离的91株内生真菌为材料,根据其菌落颜色、质地、生长速率和分生孢子外观等形态学特征,确定了其中74株产孢内生真菌为5个属.采用特异性PCR对91株菌株的ITS片段进行扩增,获得单一的分子长为600bp的条带,以4种限制性内切酶对扩增的ITS片段进行RFLP分析,并对部分ITS碱基序列进行测定,表明三尖杉内生真菌的属和种丰富,其中的优势属为刺盘孢属、曲霉属及小丛壳属,表现为热带真菌类型;小丛壳属是首次从三尖杉科植物中分离.本研究结果提示三尖杉内生真菌有丰富的遗传多样性.     

珙桐产黄酮内生真菌的分离和鉴定

采用珙桐(Davidia involucrata Baill.)组织分离产活性物质的内生真菌,以金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌为测试细菌进行内生真菌代谢物对细菌的抑制实验,用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)分析内生真菌的活性物质成分。结果表明,从珙桐枝、叶中分离到126株内生真菌,其产物对3种细菌的抑菌率分别为65%、71%、25%,其中D37菌株对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强。经HPLC分析证明,菌株D37的次生代谢产物中含有槲皮素、山奈酚2种黄酮类物质,每100 g干菌丝可产黄酮31.9 mg。根据菌株D37的形态学特征,结合核糖体基因居间序列(Internaltranscribed spacer,ITS)的分析结果,确定菌株D37为曲霉属,烟曲霉种(Aspergillus fumigatus)。从珙桐分离的产黄酮内生真菌D37可作为生产黄酮类药物的候选菌株,也为抗生素药物的筛选奠定了基础。