RAMP与REMAP分子标记技术及其应用

引物设计是RAMP和REMAP标记分析的关键，二者都使用锚定的微卫星序列引物。目前已开发出多个RAMP锚定微卫星序列引物，与不同的RAPD引物进行扩增，得到更多的引物组合。REMAP使用反转录转座子的外向LTR引物和锚定微卫星序列引物。而RAMP分析采用不对称PCR循环，在PCR扩增的后15个循环中，退火温度设为2个；REMAP则采用常规PCR循环。扩增产物可在聚丙烯酰胺凝胶、变性聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶上进行电泳分离，检测时可使用同位素、银染或溴化乙锭染色等技术。目前，这两种标记技术已在作物和动物种质资源的遗传多样性分析、遗传连锁图谱构建、转基因植株基因稳定性分析等方面都有成功的应用。     

十字花科蔬菜花粉植株诱导技术研究进展

介绍了十字花科蔬菜花粉植株诱导技术的发展进程 ,影响花粉植株诱导的多种因素以及诱导植株加倍技术和倍性研究 ,并提出了今后的研究方向     

正交设计优化花菜类SRAP分子标记体系的研究

采用正交设计,从Mg^2＋、dNTPs、引物三种因素3个水平对青花菜SRAP反应体系进行优化,确立适合青花菜的SRAP反应体系,并在6个青花菜和花椰菜品种中进行验证。结果表明：20μ/L反应体系中适宜体系的浓度dNTPs为0．2mmol／L、Mg^2＋为1．25mmol／L、上下引物各0．4μmol／L、DNA为20ng、Taq酶1．2U、退火温度为50℃。     

两个萝卜雄性不育材料胞质的细胞学与分子鉴定

本研究以晚抽薹萝卜雄性不育系及其相应保持系为试材,石蜡切片法显微观察小孢子发生的细胞学结果表明:不育系NAURWA01、NAURWA13败育方式相似,在四分体之前的小孢子与保持系没有明显差别;单核小孢子早期绒毡层出现小液泡,逐渐汇集成大液泡,外粉壁变薄,绒毡层径向伸长异常膨大,挤压小孢子,细胞质紧缩,绒毡层延迟解体,不能为核有丝分裂提供能量,致使小孢子败育,最后一同降解.利用2对特异引物扩增Ogura相关基因,在不育系NAURWA01、NAURWA13中扩增出与Ogura相关基因分子量相同的特异条带,而在保持系没有任何条带出现.对特异条带回收克隆测序发现与orf138同源性很高,但是在编码区有3个碱基的差异.推测两个萝卜不育系属于Ogura CMS的变异类型.     

萝卜扩展蛋白基因RsEXPB1克隆与表达特征分析

本文根据GenBank中扩展蛋白序列设计特异引物,从萝卜高代自交系"NAU-LVYH06"中克隆到一个扩展蛋白基因RsEXPB1(GenBank accession No.GQ387363,GQ387364).其编码区基因组序列长度为1 430bp,包括4个外显子和3个内含子;RT-PCR获得长度为898 bp的cDNA,开放读码框(ORF)为29～820 bp,推导编码263个氨基酸,含有1个组氨酸(His-Phe-Asp,HrD)功能域,ORF和推导蛋白序列与拟南芥AtEXPB3(GenBank accession No.NM118965)同源性分别为87%、92%.半定量RT-PCR检测到该基因主要在萝卜生育前期的幼叶、肉质根木质部和韧皮部中表达,且表达丰度可能与该部位细胞生长分裂状态相关,差异较明显.     

萝卜花芽分化的形态学研究

采用解剖技术和石蜡切片对春性萝卜品种JXDY-13的花芽分化进行观察,结果发现花原基形成后,首先分化出4个萼片原基的突起,随后在萼片原基内侧形成6个雄蕊原基,并进一步向内分化形成雌蕊原基,最后在萼片原基和雄蕊原基之间完成舌状的花瓣原基的发育。根据这一特征变化将花芽分化的整个过程分为未分化期、花原基分化期、萼片原基分化期、雄蕊原基分化期、雌蕊原基分化期和花瓣原基分化期等6个时期。在此基础上应用花芽分化指数,通过研究低温诱导时间对花芽分化程度的影响,发现4℃低温诱导13d为该品种萝卜的最佳春化条件。     

番茄SRAP-PCR体系优化与品种分子鉴定

对番茄基因组DNA的SRAP-PCR体系中Mg2+、dNTPs和引物浓度进行了优化,结果表明反应体系中适宜浓度为Mg2+ 1.5～3.0 mmol·L-1,dNTPs 0.05～0.20 mmol·L-1,引物0.25 μmol·L-1;模板DNA为10～20 ng(10 μL反应体系).运用优化的体系,筛选获得3个合作906与其父母本多态性标记引物组合.利用15个引物组合对11个番茄主要品种以及1个近缘野生种进行种质鉴定的SRAP标记分析,10个多态性的引物组合共检测到55个多态性位点,平均每个引物可鉴别3.7个品种,双引物组合me8/em8-1与me6-1/em14-1可以区分所有供试材料.应用NTSYS-pc软件进行聚类分析(UPGMA),园艺性状相似的品种在较近的遗传距离聚类,表明SRAP可有效用于番茄品种资源鉴定与遗传多样性分析.     

新闸红萝卜品种提纯复壮技术

新闸红萝卜是江苏常州市西北郊新闸地区的一个地方特色品种，皮色鲜红光滑，肉质清脆，甘甜爽口，个头匀称，大小适中，素有“小雪萝卜赛雅梨”之称；是著名地方特产常州萝卜干的主要原料。近年来，从生产田间观察统计来看，该品种出现了严重退化，主要表现在肉质根形状不再为卵圆形，     

春秋季萝卜生长中肉质根木质素含量变化研究

对春秋季萝卡生长过程中肉质根的本质素含量变化进行了研究。结果表明,春季木质素含量变化与秋季不同。春季,从破肚期到定桩期木质素含量变化不定,定桩期后木质素显著增加。秋季,从破肚期到定桩期再到露肩期,木质素含量变化不大,露肩期的木质素含量有所下降,采收期以后,木质素含量显著增加。春季萝卡除秋魁青外,其他品种在露肩期前均低于秋季的木质素含量,采收期后,春季萝卡肉质根中的木质素含量高于秋季,这表明,春季萝卡在生长期肉质根的木质化速度要比较季的大。木质素含量变化在红皮萝卡（水萝卜、大红袍）和白皮萝卡（短13、特早30天）之内存在显著差异。     

新闸红萝卜品种提纯复壮技术

新闸红萝卜是江苏常州市西北郊新闸地区的一个地方特色品种,皮色鲜红光滑,肉质清脆,甘甜爽口,个头匀称,大小适中,素有"小雪萝卜赛雅梨"之称;是著名地方特产常州萝卜干的主要原料.