中国伊氏锥虫kDNA小环的克隆及kDNA探针的建立

本研究以质粒ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）为载体，对我国北方和南方疫区伊氏锥虫动基体株的ｋＤＮＡ小环进行了克隆，并以其中之ｐＴＫ０１１－Ｃ＿１为探针对不同地理区的动基体株和无动基体株的不同ＤＮＡ进行杂交，结果表明，我国北、南两大疫区动基体株的ｋＤＮＡ小环大小均约为１ｋｂ，且均属Ａ型，ｐＴＫ０１１·Ｃ＿１只与动基体株的ｋＤＮＡ及ｔＤＮＡ杂交，不与其ｎＤＮＡ杂交，也不与无动基体株的任何ＤＮＡ及黄牛白细胞ＤＮＡ杂交。说明具有特异性，可以用于诊断。ｔＤＮＡ的杂交信号与ｋＤＮＡ相当，诊断中可以代替ｋＮＤＡ作为检测对象。     

实验性佝偻症对鸡血清、肠、肝、肾、骨中碱性磷酸酶活性的影响

用高磷低钙饲料使幼龄来航母鸡产生佝偻症,结果发现佝偻症鸡血清和骨组织碱性磷酸酶(AKP)活性均极其显著地高于正常鸡;肠、肝和肾中AKP活性与正常鸡无显著差异。 鉴定了四种碱性磷酸酶抑制剂,结果表明30mM L一苯丙氨酸对鸡肠AKP活性抑制70％左右,而对肝、肾、骨AKP的抑制作用很小。30mM L一高精氨酸对鸡骨AKP活性抑制81％左右,而对鸡肠AKP基本不抑制。30mM L一高精氨酸对正常鸡血清AKP抑制19％左右,对佝偻症鸡血清AKP则抑制75％左右,对以上结果进行了讨论.     

基因工程菌表达效率对细菌总蛋白和包涵体中目的蛋白含量的影响

测定了猪生长激素基因工程菌不同表达效率时细菌总蛋白的含量以及包涵体中重组猪生长激素占包涵体总蛋白的比值。结果表明:随着表达效率的提高,细菌总蛋白含量缓慢增加,最后稳定在一定水平上;当表达效率增加,包涵体中重组猪生长激素占包涵体中总蛋白的百分数也增加,两者上升趋势基本一致。     

北京黑猪对注射猪生长激素(PST)的效应

已知用生长激素(PST)处理美国的肥育猪可提高饲料报酬、生长速度和胴体的瘦肉率。由于中国猪比美国猪更肥一些,饲料报酬较低和生长较慢,因而设想用生长激素处理中国猪可能更有效。本试验在肥育期28天内用 PST 处理北京黑猪(由中国地方猪,约克夏和巴克夏杂交育成),在每天饲喂4次的个体饲养组(n=12,6头公猪和6头母猪)中,每天注射2毫克和4毫克 PST 的猪,其饲养报酬分别提高22.3%和30.6%(P<0.01),主要是提高了生长速度(分别比对照组快24.4%和30.2%)(P<0.01),而对饲料摄入量没有影响。每天注射 PST 2毫克(28天),群饲猪(6头/圈,4圈/处理组)得到了类似的结果:饲料报酬提高22.7%(P<0.01);生长速度提高25%(P<0.01)。屠宰分析的结果表明,每天注射2和4毫克 PST 的猪,最后肋膘厚率平均降低19.2%(P<0.01)。剥离分析半片胴体的结果表明,PST 处理猪的疫肉总量和瘦肉率分别提高21.4%和13%(P<0.01),而总脂肪量和脂肪率则分别降低16.7%(P<0.05)和22%(P<0.01)。胴体的化学分析获得类似结果。PST 处理猪的背最长肌的 ...     

外源性猪生长激素对猪血液葡萄糖、胰岛素含量的影响

本实验选择体重60kg 左右,出生日期相近的北京黑猪72头(阉公猪和母猪各半)分为四组,Ⅰ组和Ⅱ组饲喂的饲料含蛋白质14%;Ⅲ组和Ⅳ组饲喂的含蛋白质16%。预饲后,Ⅱ组和Ⅳ组每天每只猪注射猪基因工程生长激素1ml(含2mg);Ⅰ组和Ⅲ组每天每只猪注射75mMNaHCO_3液1ml 作对照。注射28天后颈静脉采血除分析血浆非蛋白氮和游离脂肪酸(待发表)外,还用 Follin-Wu 法分析血浆葡萄糖和用放射免疫法测定血浆胰岛素含量     

大肠杆菌内猪生长激素cDNA基因表达产物的免疫电镜观察

本室构建的温度诱导高效表达猪生长激素(pGH)cDNA基因的工程;pPT15/N4830的表达效率为30％左右。相差显微镜下可见表达细菌内有包涵体(inclusion bodies, IBs)存在。高速离心(12000g,10min)pGH主要在沉淀内。由于细菌在某些条件下也能产生其他IB颗料,为了证实我们见到的IBs是由pGH的产生而形成的,以及pGH在大肠杆菌内的分布情况,我们用免疫胶体金技术对诱导后的大肠杆菌进行了观察。所用的一抗为本室制备的兔抗猪生长激素多克隆抗体(滴度为32000),使用时稀释100倍;所用的二抗是10nm金颗料标记的SPA(军事医学科学院陈德惠教授惠赠),使用时稀释20倍。其他操作按常规进行。结果表明:1.大肠杆菌内产生的pGH以IBs的形式存在,IBs的大小不一,平均每个细菌内有3～4个IBs。2.IBs以外没有观察到pGH的存在,这与破细胞离心后上清的免疫印渍(Western blotting)结果相吻合。3.与文献报道的免疫酶标技术相比,用免疫胶体金技术观察的结果更加清晰。方法简便,容易掌握。     

人胰岛素基因杆状病毒表达载体的构建及其在Sf9细胞中的表达

对人胰岛素基因真核表达载体（pCMA／mINS）进行Xho I酶切，回收的含人胰岛素基因组基因的1608bp片段与线性化的杆状病载体pFast Bac I进行连接，获得重组载体pFast/mINS。将该重组载体转化DH10Bac感受态细菌，在体内进行重组，并经2次抗性与蓝白斑筛选，得到杆状病毒重组载体Bacmid/mINS。将该载体转染Sf9细胞，获得了重组杆状病毒，经Tricine-SDS-PAGE和Western-blotting检测，重组杆状病毒在Sf9细胞中的表达产物是胰岛素原，而细胞培养上清中未检测到胰岛素和胰岛素原。     

猪生长激素基因(cDNA)的分子克隆

采用 Watson 方法由猪垂体总 mRNA 反转录合成了总 cDNA,合成产率约为12.6%。将总 cDNA 克隆到质粒 pUC19中后,转化大肠杆菌 JM107得到约2500个重组子克隆。用猪生长激素探针进行菌落原位杂交筛选得到2个阳性克隆。对这两个克隆进行多种酶切分析的结果表明,其中质粒 pWH101插入片段长度为830bp 左右,带有全长猪生长激素基因及部分5′端和3′端非编码区。用 Sanger 法分析了此基因5′端203个 bp 的序列,结果除确证己克隆了猪生长激素基因(cDNA)外,还查明了此基因5′端非编码区46bp 的序列。     

不同饲料量对猪血中葡萄糖、乳酸、FFA含量及尿中排氮量的影响

从1962年到1965年,我们动物生理和生物化学教研组在周大澂同志领导下,进行了不同饲料量和饲水量对猪消化代谢的影响的研究工作。当时参加人员之多、工作量之大是空前的。经过大家努力,积累了不少资料,取得了一些成果。其中有些曾在当时不同的学会上宣读过,并发表了摘要,后因文化大革命中断。今天将仍有一定价值的一些结果陆续发表,一则是供研究这些问题的同志参考,同时也是对已故周大澂同志的纪念。另外,由于此项工作早已停止,这些年间的有关文献就从略了。谨致歉意。作者     

不同摄水量对猪血中葡萄糖、乳酸、FFA含量以及尿中排氮量的影响

长期以来,我国农民即习惯以稀料喂猪,而稀薄的程度彼此也极不相同。为了探索以何种程度的稀料喂猪为好,很有必要研究不同摄水量对猪代谢的影响。水对机体代谢有着极为重要的作用虽然很早已是大家公认的事实,但摄入不同水量对动物的代谢发生何种影响则报导很少。1957年,Elizabeth J.Castle 和 M.E.Castle(1)研究了不同摄水量对食物通过猪消化道速度的影响,但未涉及不同摄水量对猪代谢的影响。我们于1963—1964年间研究