草鱼肠系膜脂肪组织高质量总RNA提取方法的研究

基于传统的酸性酚—异硫氰酸胍—氯仿一步提取法,比较分析多种优化操作步骤,摸索出一种高质量提取体质量为80~150 g草鱼肠系膜脂肪组织总RNA的改良方法。试验结果显示,相较于肝脏、脾脏、肠道等脏器组织,草鱼肠系膜脂肪组织RNA丰度低,且极易在样品前处理阶段出现顽固性降解问题。探索发现,将取样量增至约30 mg,可提升RNA产量以满足常规试验需求。针对降解难题,改良常规的样品前处理技术流程,采用鲜样液氮速冻,冻样直接放入TRIzol试剂中裂解,并即刻进行长时间机械匀浆,时长约3 min等核心操作步骤,可显著降低脂肪组织样品RNA的降解。Agilent生物分析仪检测结果显示,改良方法提取的草鱼肠系膜脂肪组织RNA完整度高,关键RIN值为8.7~9.0。研究推测,长时间机械匀浆所形成的持续剪切冲击力或许有助于TRIzol试剂中的异硫氰酸胍等成分突破油滴阻碍而有效抑制内源性RNA酶。本方法提取的草鱼脂肪组织总RNA质量可满足高通量转录组测序要求。     

驯食配合饲料的大口黑鲈3个选育世代的遗传多样性分析

为了检测驯食配合饲料的大口黑鲈(Micropterus salmoides)3个选育世代群体遗传多样性水平变化,利用微卫星标记技术对驯食配合饲料大口黑鲈选育基础群体(Sp0)和第二、三和四代选育群体(Sp2、Sp3和Sp4)共240尾样品进行检测。结果显示,18个微卫星位点共获得44个等位基因。Sp0、Sp2、Sp3和Sp4的平均观测杂合度(H_o)分别为0.4895、0.4802、0.4579和0.4206,平均期望杂合度(H_e)分别为0.4615、0.4454、0.4621和0.3916,平均多态信息含量(PIC)分别为0.3791、0.3659、0.3764和0.3257。4个群体间的配对比较群体间遗传分化指数(F_(st))值在0.01612～0.16162之间、遗传距离(D_a)在0.0249～0.1434之间。遗传变异来源(AMOVA)分析显示,只有8.38%的变异来自于群体间,其余遗传变异均来自于个体间。研究表明,经连续多代选育之后,易驯食配合饲料的快长大口黑鲈选育群体具有中度遗传多样性,具备选育潜力,可继续进行选育。     

提高母猪产仔率与成活率综合技术要点

在母猪养殖过程中,提高母猪产仔率和成活率是确保母猪养殖产业经济建设工作稳步发展的重要基础.因此在母猪养殖过程中必须从各个环节严格把关,主要包括温度、营养、生长环境等诸多方面.我国近几年在母猪养殖过程中取得丰硕成果,极大的带动了区域经济发展,但是在技术方面依旧存在不足之处.本文通过对提高母猪产仔率和成活率的技术进行分析,促进母猪养殖经济稳步发展.     

香豌豆芽率快速测定方法

<正>以香豌豆LAT1203为例,介绍香豌豆的芽率测试方法。香豌豆种子含水量、成熟度、饱满度、完整度、休眠等生理因素严重影响着种子芽率,通过对香豌豆种皮进行处理,芽率测试可达到87%,有效率提高11%。香豌豆(Lathyrus odoratus),别名花豌豆、腐香豌豆,豆科香豌豆属的一二年生攀缘性草本花卉。花大蝶形,旗瓣,色深艳丽,有紫、红、蓝、粉、白等色,并具斑点、斑纹,具芳香,具有很强的观赏性。根据花期开放     

4个抗性砧木与贝达在戈壁滩滴灌下的栽培表现

通过甘肃嘉峪关戈壁滩紫轩酒业葡萄园栽培的贝达及4个抗性砧木3309C、101-14、5BB、SO4进行田间栽培观察,发现4个抗性砧木只从新梢生长量来看,河岸葡萄与沙地葡萄杂交的后代生长量显著要高于河岸葡萄与冬葡萄的杂交后代,这与田间观察的节间长度3309C>101-14>5BB>SO4是一致的,4个抗性砧木在本地区栽培均表现出一定的抗寒性,新梢的生长量显著不同,由此可见4个抗性砧木及其贝达在抗旱性和耐盐碱方面也有差异。     

戈壁滩酿酒葡萄单壁篱架单蔓倾斜上架修剪技术

国内外栽培实践证明,酿酒葡萄一般生长势较弱,大型平地建园,为便于田间机械化作业,应采用各种篱架栽培[1].嘉峪关紫轩酿酒葡萄种植区在快速建园的基础上,采用快速整形法,留单条,放独蔓,达到一年苗、二年形、三年果的目的. 1 单沟单排单壁篱架架形建置 南北走向,南北行向栽培的葡萄架抗风能力强于东西行向.单壁篱架架面与地面垂直.枝蔓呈扇形,每隔6～8m设一根立柱,柱粗10cm×10cm,埋土深度0.4m.架高2.2m,立柱上每隔40～60 cm拉一道横向钢丝,共穿3道￠8钢丝,最下一道钢丝离地面40 cm.篱架行距3.0m,沟宽1.2m,沟深0.5～0.7 m,株距0.5 m.     

西北干旱地区金银花优质丰产栽培技术

从繁殖方法、田间管理及病虫害防治3个方面阐述了西北干旱地区金银花的优质丰产栽培技术。     

大口黑鲈病毒性溃疡病病原的分离和鉴定

对广东省佛山地区2008年夏季高温时期暴发的大口黑鲈溃疡病的病原进行分离，从患病鱼的病灶肌肉组织中分离到5株嗜水气单胞菌,人工感染健康大口黑鲈，均未出现溃疡暴发病的典型症状病鱼体表大片溃烂，裸露肌肉坏死并有出血，尾鳍、胸鳍和背鳍基部红肿溃烂。制备病灶肌肉组织的除菌过滤液，背部肌肉注射感染健康大口黑鲈，7 d后出现典型的溃疡病症状。取自然发病鱼和人工感染的患病鱼病灶肌肉组织制作超薄切片，经电镜观察，均发现组织中有大量病毒颗粒，病毒粒子有囊膜，呈六角形，为正20面体对称结构，大小约为145.5 nm。根据已知虹彩病毒主要衣壳蛋白（MCP）基因序列设计特异引物，提取人工感染发病鱼病灶肌肉组织的DNA进行PCR扩增，将扩增片段进行序列测定与分析，结果表明该序列与已报道的虹彩病毒MCP基因有着较高同源性（39.5％～100％）。从电镜观察和MCP基因测序分析结果确认该病毒为虹彩病毒科蛙病毒属中的一种病毒，与国外报道的大口黑鲈病毒（LMBV）在分子特性和引起的疾病特征上有一定差异。研究结果表明引起大口黑鲈溃疡性暴发病的病原是虹彩病毒，将该病暂命名为大口黑鲈病毒性溃疡病。     

水稻工厂化育苗新基质筛选试验初报

<正>水稻是凌海市主要粮食作物,历年种植面积在1.33万hm2左右。2007年,凌海市农业中心科技示范场安排了水稻育苗新基质筛选试验,为大面积推广机插秧提供技术保障。