发育过程中雌性鸵鸟脾脏中神经肽Y的分布与表达

[目的]为了研究神经肽(Y neuropeptide Y,NPY)在鸵鸟脾脏发育过程中的变化规律。[方法]通过应用免疫组化SP法检测幼龄期(10～30日龄)、青年期(11～21月龄)和性成熟期(2.5～3岁)3个生长发育阶段鸵鸟脾脏中NPY的表达及其变化。[结果]不同年龄阶段的鸵鸟脾脏内均有不同量的NPY免疫阳性细胞表达,与幼龄期相比,青年期的表达量增多,性成熟期具有显著性意义(P<0.05)。[结论]NPY在鸵鸟性发育过程中具有一定的促进作用。     

蓝舌病病毒VP7基因的原核表达

为获得蓝舌病病毒(BTV)VP7基因的原核表达蛋白,本实验采用RT-PCR方法扩增出了血清1型BTV的VP7基因,并克隆到原核表达载体pMAL-c2X中,构建了重组质粒pMAL-VP7.将重组质粒转化TBl感受态细胞,以0.5 mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白MBP-VP7以可溶形式存在,分子质量约为90 ku.以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测BTV血清抗体的间接ELISA诊断方法,为今后进一步开展BTV诊断研究奠定了基础.     

西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定

为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP).NS1融合蛋白(MBP-NS1),其分子质量约为90 ku,约占可溶性菌体蛋白质量的50%.利用直链淀粉树脂柱对MBP-NS1纯化后的重组蛋白的纯度达到60%,westem blot和间接ELISA检测证明纯化的MBP-NS1具有良好的抗原性和特异性,为进一步开展关于WNV NS1蛋白的研究奠定了基础.