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蓝舌病病毒VP7基因的原核表达
引用本文:宋红梅,杨涛,马健男,王群,张维军,徐青元,杨增岐,吴东来.蓝舌病病毒VP7基因的原核表达[J].中国预防兽医学报,2009,31(12).
作者姓名:宋红梅  杨涛  马健男  王群  张维军  徐青元  杨增岐  吴东来
作者单位:1. 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001
3. 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100
摘    要:为获得蓝舌病病毒(BTV)VP7基因的原核表达蛋白,本实验采用RT-PCR方法扩增出了血清1型BTV的VP7基因,并克隆到原核表达载体pMAL-c2X中,构建了重组质粒pMAL-VP7.将重组质粒转化TBl感受态细胞,以0.5 mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白MBP-VP7以可溶形式存在,分子质量约为90 ku.以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测BTV血清抗体的间接ELISA诊断方法,为今后进一步开展BTV诊断研究奠定了基础.

关 键 词:蓝舌病病毒  VP7基因  原核表达

Prokaryotic expression of Bluetongue virus VP7 gene
SONG Hong-mei,YANG Tao,MA Jian-nan,WANG Qun,ZHANG Wei-jun,XU Qing-yuan,YANG Zeng-qi,WU Dong-lai.Prokaryotic expression of Bluetongue virus VP7 gene[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(12).
Authors:SONG Hong-mei  YANG Tao  MA Jian-nan  WANG Qun  ZHANG Wei-jun  XU Qing-yuan  YANG Zeng-qi  WU Dong-lai
Abstract:In this study, the VP7 gene of serotype 1 bluetongue virus was amplified by RT-PCR and cloned into prokaryotic expression vector pMAL-c2X. The recombinant plasmid was transformed into E. coli TB1 cells and fusion protein (MBP-VP7) produced after induced with 0.5 mmol/L IPTG. The expressed protein was about 90 ku and existed in soluble form. Indirect ELISA was established using purified MBP-VP7 protein as antigen.
Keywords:bluetongue virus  VP7 gene  prokaryotic expression Corresponding author
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