治理中小河流 促进人水和谐——以甘肃省张家川回族自治县为例

张家川回族自治县在中小河流治理工作中,强化措施,狠抓质量,取得了较好的成绩。其工程建设中的一些做法,被甘肃省天水市予以推广,作者对张家川回族自治县中小河流治理工作的现状、做法与经验进行了总结,指出了存在的问题,并对进一步搞好中小河流治理工作提出了自己的见解。     

猪IFN-α基因在干酪乳酸杆菌中的表达及反应活性鉴定

【目的】构建能够稳定表达猪α-干扰素(IFN-α)成熟蛋白的重组干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei CECT5276),为将其作为口服疫苗来提高动物机体免疫力奠定基础。【方法】从质粒pMD18-IFN-α扩增出猪IFN-α成熟蛋白基因,再将其定向克隆到干酪乳酸杆菌整合型表达载体pMJ67的lac启动子下游,得到重组质粒pMJ67-IFN-α,电穿孔转化干酪乳酸杆菌。抽提干酪乳酸杆菌基因组DNA,进行PCR扩增及测序鉴定。采用半定量RTPCR检测猪IFN-αmRNA在干酪乳酸杆菌中的转录水平;采用Western blot对重组干酪乳酸杆菌菌体进行分析,检测其表达产物的活性;用双抗体夹心ELISA法确定最适的乳糖诱导质量浓度。【结果】PCR扩增获得了501bp的IFN-α,成功构建了重组质粒pMJ67-IFN-α,转化干酪乳酸杆菌后获得了重组乳酸杆菌。半定量RT-PCR结果显示,IFN-αmRNA在诱导16h时表达水平最高;Western blot分析表明,构建的重组干酪乳酸杆菌成功表达出了相对分子质量约19ku的重组蛋白,其可与鼠抗猪IFN-α抗体发生特异性反应。ELISA结果表明,当乳糖诱导质量浓度达到8g/L时,猪IFN-α成熟蛋白的表达量达到最大,为1.3μg/L。【结论】将猪IFN-α成熟蛋白基因整合到干酪乳酸杆菌基因组中,构建的重组乳酸杆菌能够稳定表达猪IFN-α成熟蛋白。     

猪圆环病毒2型ORF2基因截断表达及ELISA抗体检测方法的初步建立

为建立以重组PCV2Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建了猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因原核表达质粒pET28a-ORF2。SDS-PAGE显示,在0.1mmol/L IPTG和37℃条件下诱导4h,重组Cap蛋白高效表达。Western blotting证实该蛋白能够被PCV2阳性血清特异性识别。以纯化的蛋白为抗原建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原最适包被质量浓度为2mg/L;血清最佳稀释度为1∶100;酶标二抗最适浓度为1∶2 000,该方法的敏感性为86.96%,特异性为100%。用该方法对河南省152份猪血清样品进行检测,与间接免疫荧光（IFA）的符合率为85.53%（130/152）,与商品化的韩国金诺PCV2ELISA试剂盒的符合率为88.16%（134/152）。本试验成功建立了PCV2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,可用于大规模的血清学检测。     

猪细小病毒河南分离株全基因组克隆及序列分析

[目的]进一步了解河南地区猪细小病毒(PPV)的变异特点.[方法]利用PCR方法,对河南郑州、周口、济源等地采集的疑似PPV感染的病料进行检测.PCR检测为阳性的病料经处理后,同步接种猪睾丸细胞盲传6代,对4株PPV全基因组进行分段克隆及测序,并与GenBank登录的国内外PPV流行株全基因组进行比较.[结果]获得的4株PPV全基因组序列全长均为4679 bp.4个毒株之间的核苷酸同源性介于99.6％ ～99.8％,与其他毒株间核苷酸同源性为98％～100％,遗传进化较为稳定.[结论]为PPV在河南地区分子流行病学调查及遗传变异分析奠定了基础.     

治理中小河流促进人水和谐——以甘肃省张家川回族自治县为例

张家川回族自治县在中小河流治理工作中,强化措施,狠抓质量,取得了较好的成绩.其工程建设中的一些做法,被甘肃省天水市予以推广,作者对张家川回族自治县中小河流治理工作的现状、做法与经验进行了总结,指出了存在的问题,并对进一步搞好中小河流治理工作提出了自己的见解.     

提高带犬民警破案能力八要点

一、提高"三结合"能力学习《犯罪现场勘查学教程》、《足迹学》,力争学懂、学会、学透,活学活用。利用出现场的机会,虚心向痕迹检验技术员学习,提高现场勘查     

如何做好厂长工作的体会

厂长负责制,是国家委托厂长全权指挥企业的生产和经营管理。厂长是企业行政和业务方面的总负责人。厂长是企业的“法人”代表。他对国家负经济责任,行政责任,法律责任;对企业,对职工负责。实行厂长负责以后,厂长(场长)应如     

电工电子实验实践教学模式改革的探索与实践

电工电子实践教学是工科类专业的基础实验实践教学环节,也是教学改革的重要环节和内容,为了进一步完善实践教学体系,培养学生的实践和创新能力,就如何推进实践教学改革,从实验课程体系、教学内容、教学手段、考核方式等方面进行了探讨。     

安徽省春性小麦区试品系主要品质性状分析

为探究安徽省春性小麦品质育种进展，对参加安徽省淮南片2010-2019年春性小麦区试的154个品系（227份）样品进行品质性状分析，并根据不同品质分类标准进行评价。结果表明，供试材料平均容重为788.7±18.4 g·L^-1，硬度指数为57.1±8.8，粗蛋白含量（干基）为13.24%±1.07%，湿面筋含量（14%水分基）为28.2%±3.0%，沉淀值（Zeleny法）为35.2±9.7 mL，吸水率为56.3%±3.8%，稳定时间为4.4±3.1 min，最大拉伸阻力为388±147 EU，能量为81.2±32.5 cm²。品质性状之间存在显著相关性，其中，粗蛋白含量与湿面筋含量、吸水率与硬度指数的相关系数均大于0.8，分别为0.898和0.888。各品质性状年份间表现不同的变化趋势，容重、湿面筋含量、沉淀值、稳定时间、最大拉伸阻力年份间波动明显，但没有明显规律；粗蛋白含量和能量呈缓慢下降趋势；而吸水率和硬度指数则比较稳定。根据国家小麦品种品质分类标准，227份样品中，有3.08%、11.01%和0.88%的样品全部指标分别达到中强筋、中筋和弱筋小麦标准，没有样品达到强筋小麦标准，多数品系品质指标之间存在强、中强、中、弱筋交错不协调现象。通过审定的品种中，仅有1个达到弱筋标准。     

天津市高校图书馆自动化管理系统联合建设

介绍了天津市高校图书馆自动化管理系统（Unicorn）联合建设的现状,并就该系统特点,环境、设备设置,工作内容,所取的效益等进行了概括。