茶树CsSNAT基因的克隆与表达分析

为明确茶树SNAT基因的序列特征和表达特点,在茶树转录组测序的基础上以茶树(Camellia sinensis)品种舒茶早为试验材料,通过SMART^TM RACE技术克隆茶树褪黑素合成途径中关键限速酶5-羟色胺-N-乙酰转移酶CsSNAT基因的cDNA全长序列,并分析其基因结构和表达模式。结果表明,CsSNAT基因序列全长1 014 bp,其中包含742 bp的完整开放阅读框(ORF),编码247个氨基酸,预测等电点7.64,蛋白分子量27.36 kDa。氨基酸序列比对显示,CsSNAT蛋白与其他高等植物的SNAT蛋白具有较高同源性,与葡萄 VvSNAT(CBI31163)同源性最高,为66.19%。诱导蛋白最佳条件为温度28℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.5 mg·L^-1,诱导时间6 h,在上清液中可获得大量分子量为66 kDa的可溶性融合蛋白。实时定量 PCR 分析表明,CsSNAT在褪黑素处理6 h后表达量最高,为对照的3倍;茶尺蠖取食6 h后,CsSNAT表达显著上调。不同激素处理结果显示,CsSNAT受脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)和水杨酸(SA)诱导表达。本研究结果为5-羟色胺-N-乙酰转移酶功能研究奠定了一定的基础。     

茶树离体再生和遗传转化的研究进展

茶树是我国重要的经济作物之一,通过组织培养技术,利用茶树茎段、腋芽、叶、花粉、种子等器官作为外植体建立茶树遗传转化的再生系统,对获得优质茶树种质资源至关重要.目前关于茶树遗传转化方法的研究,主要集中在农杆菌介导法和基因枪法.综述当前茶树遗传转化再生系统的研究进展,并对今后茶树遗传转化提出展望.     

4种蕨类植物耐热性测定

运用电导率法,结合Logistic方程,对东北对开蕨、肾蕨、鸟巢蕨、铁线蕨进行耐热性测定。通过计算其高温半致死温度,比较植物耐热性强弱,为其在南方地区的室外种植及屋顶绿化提供理论依据。结果表明:4种蕨类植物叶片经高温处理后,其处理温度与细胞伤害率之间呈现"S"型曲线,通过显著性检验,符合Logistic方程。根据公式计算得出,高温半致死温度分别为鸟巢蕨54.96℃,东北对开蕨54.33℃,肾蕨65.12℃,铁线蕨57.20℃,4种蕨类植物耐热性的强弱次序:肾蕨铁线蕨鸟巢蕨东北对开蕨。     

紫娟、云抗10号两个茶树品种内生菌多样性研究

以分离培养的方法对同一栽培管理水平下种植的2个茶树品种紫娟和云抗10号内生菌多样性进行了初步分析比较,获得内生细菌24株,分属6个类群,以Herbaspirillum(50%)为绝对优势种群,其次为Staphylococuus(16.7%)、Acinetobacte(r16.7%)、Burkholderia(8.3%)、Geobacillus(4.2%)和Microbacterium(4.2%),其中Acinetobacter为紫娟和云抗10号共有属,Microbacterium和Herbaspirillum为紫娟特有属,Geobacillus、Staphylococuus和Burkholderia为云抗10号特有属;分离得到内生真菌17株,分属7个类群,以Guignardia(35.3%)所占比例最大,其他依次为Alternaria(17.6%)、Colletotrichum(17.6%)、Eutypella(11.8%)、Cladosporium(5.9%)、Diaporthe(5.9%)和Phoma(5.9%),其中Colletotrichum为紫娟和云抗10号共有属,Eutypella、Diaporthe和Phoma为紫娟特有属,Cladosporium、Guignardia和Alternaria为云抗10号特有属;多样性指数分析表明,云抗10号可培养内生菌的多样性、均匀度、优势度和丰富度均高于紫娟。结果表明,紫娟和云抗10号2个茶树品种间可培养内生菌群落组成存在较大差异。