罗非鱼无乳链球菌与嗜水性单胞菌病的防治初探

罗非鱼是华南地区鱼类养殖中数量最多的品种之一,因其抗病力强、生长快、繁殖力强、适应性广、营养价值高、适合内销与外销等优点而受广大养殖户青睐,使我国成为世界最大的罗非鱼生产国,罗非鱼也成为我国对外出口的主要养殖品种.然而近年来由于养殖水体环境恶化、气候变化异常及养殖密度大、饲料品质参差不齐等诸多因素,使其病害发生率明显增加,其中细菌病的爆发是造成罗非鱼经济损失的重要原因之一.自2009年7月,广东、广西、海南等华南地区爆发链球菌病（海豚链球菌、无乳链球菌）以来,近几年一直呈现高发态势;与此同时,嗜水气单胞菌作为主要的病原菌之一,其发病率及耐药性也逐年增加,给广大养殖企业和养殖户造成重大损失,也给罗非鱼产业带来严重危害.     

副猪嗜血杆菌广东分离株外膜蛋白P5基因的克隆及蛋白结构预测

根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从广东省HPS分离株外膜蛋白P5基因中扩增出与预期设计的1116bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,克隆出HPS广东分离株的目的基因,核苷酸长为1116bp,共编码371个氨基酸,与已发表的HPS(SH0165)外膜蛋白基因核苷酸序列同源性100%,氨基酸同源性100%。生物学预测分析结果显示,HPS外膜蛋白是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,其β-转角和无规则卷曲区域可能形成抗原表位;其N端含有1个信号肽,最佳切割位点在21～22个氨基酸;有15个抗原决定簇;无跨膜区;同源建模分析,未见相似三维结构。     

罗非鱼无乳链球菌生物学特性与致病力研究

本试验分离纯化1株致使罗非鱼具有链球菌发病症状的病原菌,药敏试验结果表明,该菌对氯霉素等10种药物敏感。PCR扩增该菌的cfb基因,将扩增片段测序后与GenBank上登录的罗非鱼无乳链球菌的cfb基因序列进行比对。同时对该病原菌的生物学特性进行研究,包括培养时间和pH对该菌生长的影响;培养温度对其致病力的影响;探讨了不同攻毒方式(腹腔、胸腔和背部肌肉注射)与鱼发病快慢的关系;并对不同规格(100和10 g左右)的罗非鱼对该菌的易感性进行分析。试验结果表明,该病原菌为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);该菌的最适培养时间为11.5 h,最适培养pH为7.5;腹腔、胸腔和背部肌肉注射后,其发病时间几乎一致,但胸腔注射的试验鱼死亡速度最慢,背部肌肉注射是较安全可行的攻毒方式;33℃培养的无乳链球菌攻毒的罗非鱼发病最快,死亡最集中;100 g的试验鱼比10 g的试验鱼更易感染。     

常见猪病诊断中口腔液样品采集及注意事项

口腔液取样具有无创、可实现早期诊断和群体诊断等优点,在猪病诊断中发挥的作用越来越大。在临床实践中,对口腔液样品的采集和送检如果没有做好,常常会影响诊断结果。总结口腔液采集过程中的一些影响因素和注意事项,以期为科学合理利用猪口腔液诊断猪只的健康状况提供参考。     

广东某规模化猪场2014—2017年伪狂犬病野毒抗体水平监测结果与分析

2014—2017年4年期间对广东某规模化猪场(存栏基础母猪1 300头)多次采集送检血清样品1 262份,其中PRV gE野毒抗体检测数量为594份,检测结果发现,2014—2017年猪伪狂犬病野毒抗体阳性率分别为6.58%、7.25%、51.26%和68.34%,呈连续上升的趋势,检测结果结合猪场几年来多种疫苗毒株交替免疫的情况下PRV野毒抗体持续上升的情况表明该猪场存在PRV新型毒株的感染或毒株毒力增强的情况,需引起足够的重视。     

以偶联多肽为抗原建立检测O型猪口蹄疫 病毒抗体的ELISA方法

以偶联多肽为抗原建立检测O型猪口蹄疫病毒抗体的ELISA 方法。通过FMDV 多肽序列的筛选、化学 合成及反应原性鉴定,将多肽与非蛋白结构多聚体载体进行偶联。利用偶联多肽作为抗原,通过方阵滴定确定偶联 多肽、血清及HRP 的最佳工作浓度,确定方法的阴阳性临界值,然后进行特异性试验、敏感度测定及临床猪血清样 本的免疫效果评估等。结果表明,偶联多肽具有良好的反应原性,最佳包被浓度为1.0 滋g/mL,血清最佳稀释度为1: 32,HRP 最佳稀释度为1:8 000,方法特异性好,敏感度高,操作方便省时,能够对FMDV 的自然感染进行检测,也可 对FMDV 免疫后的猪血清抗体水平进行评估。     

一株尼罗罗非鱼致病性嗜水气单胞菌的 分离鉴定及药敏试验

从自然感染发病的尼罗罗非鱼肝脏和脑组织中分离出1 株细菌,经革兰氏染色镜检、生化鉴定和PCR 鉴定,确定为嗜水气单胞菌,命名为GD001,进一步采用药敏纸片法测定分离菌株对多种抗生素的敏感性,并用该菌 株接种健康尼罗罗非鱼,鉴定其致病力。结果发现,GD001 菌株对恩诺沙星、头孢噻吩、四环素和克莱霉素等抗生素 敏感,对链霉素轻度敏感,对卡那霉素和青霉素不敏感。从人工感染10 g 左右的健康罗非鱼发现,GD001 菌株具有很 强的致病力,试验鱼在感染后3~4 h内全部死亡,且患病症状与自然发病症状的鱼一致。     

田基黄的药理作用及其作用机理

田基黄,又名地耳草,民间别名有小元宝草、雀舌草、七层塔等,为藤黄科金丝桃属植物地耳草(Hypericum ja-ponicumThunb)的干燥全草.属一年生草本,野生于原野湿地,分布于华东、中南及西南,主产于四川、广东、广西、贵州、湖南、江西、福建等地.味甘、性凉,归肝、胆、大肠经,具有清利温热,散瘀消肿之功效.     

田基黄的药理作用及其作用机理

田基黄,又名地耳草,民间别名有小元宝草、雀舌草、七层塔等,为藤黄科金丝桃属植物地耳草（Hypericum ja-ponicum Thunb）的干燥全草。属一年生草本,野生于原野湿地,分布于华东、中南及西南,主产于四川、广东、广西、贵州、湖南、江西、福建等地。味甘、性凉,归肝、胆、大肠经,具有清利温热,散瘀消肿之功效。现代药理研究表明,田基黄具有抑菌、抗肝损伤、抑制癌细胞、调节免疫功能、抗病毒、抗氧化、止血等多种药理功效。     

利用多肽抗原建立同时检测 CSFV 和PRRSV 抗体的胶体金免疫层析方法

利用合成多肽作为抗原,建立一种同时检测猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的胶体金免疫层析方法。用人工筛选合成的 CSFV 多肽和 PRRSV 多肽葡聚糖偶联物作为包被抗原,以多肽-Biotin-链霉亲和素作为胶体金标记物,羊抗猪 IgG 包被硝酸纤维膜作为质控带,建立了同时检测CSFV 和 PRRSV 抗体的胶体金免疫层析方法（GICA）。结果表明,多肽与葡聚糖和生物素的偶联效率较高,分别为84．65％和91．37％;链霉亲和素与胶体金结合最佳 pH 和最佳标记量分别为8．2μg／mL 和30μg／mL。试纸卡灵敏度试验表明,血清1∶80稀释仍可检出,与 Idexx ELISA 试剂盒检出结果基本一致,特异性良好,不与伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒和细小病毒的阳性血清发生交叉反应。与 Idexx ELISA 试剂盒平行检测结果表明,CSFV 抗体总体符合率为86．36％;PRRSV 抗体总体符合率为83．33％。说明利用偶联多肽制备的试纸卡灵敏度高,特异性好,能够同时检测两种病毒抗体,适于基层养殖场使用。