罗非鱼无乳链球菌与嗜水性单胞菌病的防治初探

罗非鱼是华南地区鱼类养殖中数量最多的品种之一,因其抗病力强、生长快、繁殖力强、适应性广、营养价值高、适合内销与外销等优点而受广大养殖户青睐,使我国成为世界最大的罗非鱼生产国,罗非鱼也成为我国对外出口的主要养殖品种.然而近年来由于养殖水体环境恶化、气候变化异常及养殖密度大、饲料品质参差不齐等诸多因素,使其病害发生率明显增加,其中细菌病的爆发是造成罗非鱼经济损失的重要原因之一.自2009年7月,广东、广西、海南等华南地区爆发链球菌病（海豚链球菌、无乳链球菌）以来,近几年一直呈现高发态势;与此同时,嗜水气单胞菌作为主要的病原菌之一,其发病率及耐药性也逐年增加,给广大养殖企业和养殖户造成重大损失,也给罗非鱼产业带来严重危害.     

以偶联多肽为抗原建立检测O型猪口蹄疫 病毒抗体的ELISA方法

以偶联多肽为抗原建立检测O型猪口蹄疫病毒抗体的ELISA 方法。通过FMDV 多肽序列的筛选、化学 合成及反应原性鉴定,将多肽与非蛋白结构多聚体载体进行偶联。利用偶联多肽作为抗原,通过方阵滴定确定偶联 多肽、血清及HRP 的最佳工作浓度,确定方法的阴阳性临界值,然后进行特异性试验、敏感度测定及临床猪血清样 本的免疫效果评估等。结果表明,偶联多肽具有良好的反应原性,最佳包被浓度为1.0 滋g/mL,血清最佳稀释度为1: 32,HRP 最佳稀释度为1:8 000,方法特异性好,敏感度高,操作方便省时,能够对FMDV 的自然感染进行检测,也可 对FMDV 免疫后的猪血清抗体水平进行评估。     

一株尼罗罗非鱼致病性嗜水气单胞菌的 分离鉴定及药敏试验

从自然感染发病的尼罗罗非鱼肝脏和脑组织中分离出1 株细菌,经革兰氏染色镜检、生化鉴定和PCR 鉴定,确定为嗜水气单胞菌,命名为GD001,进一步采用药敏纸片法测定分离菌株对多种抗生素的敏感性,并用该菌 株接种健康尼罗罗非鱼,鉴定其致病力。结果发现,GD001 菌株对恩诺沙星、头孢噻吩、四环素和克莱霉素等抗生素 敏感,对链霉素轻度敏感,对卡那霉素和青霉素不敏感。从人工感染10 g 左右的健康罗非鱼发现,GD001 菌株具有很 强的致病力,试验鱼在感染后3~4 h内全部死亡,且患病症状与自然发病症状的鱼一致。     

布氏杆菌活菌苗多次免疫后动物机体血清凝集抗体变化的观察

冻干布氏菌羊五号(M5)活菌苗的免疫效果和保护力已经肯定,但免疫次数问题和多次免疫是否会引起动物机体免疫力降低?尚有待实验来回答。为此,我们对用冻干布氏羊五号活菌苗连续免疫四年的羊群,做了血清凝集抗体消长趋势的观察,现将结果报告如下:     

种蛋保存时间对宣凤黄鸡孵化效果的影响

根据种蛋的保存时间 ,将入孵种蛋分成 4组 :Ⅰ组 (1～ 3天 ) ,Ⅱ组 (5～ 7天 ) ,Ⅲ组 (9～ 1 1天 ) ,Ⅳ组 (1 4～ 1 6天 )。试验结果表明 ,4组受精蛋孵化率分别为 93 .5 % ,91 .7% ,88.0 % ,82 .3 %。Ⅰ组受精蛋孵化率比Ⅱ组提高 1 .8% ,差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;Ⅰ组比Ⅲ组提高 5 .5 % ,差异显著 (P <0 .5 ) ;Ⅰ组比Ⅳ组提高 1 1 .2 % ,差异极显著 (P <0 .0 1 )     

利用多肽抗原建立同时检测 CSFV 和PRRSV 抗体的胶体金免疫层析方法

利用合成多肽作为抗原,建立一种同时检测猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的胶体金免疫层析方法。用人工筛选合成的 CSFV 多肽和 PRRSV 多肽葡聚糖偶联物作为包被抗原,以多肽-Biotin-链霉亲和素作为胶体金标记物,羊抗猪 IgG 包被硝酸纤维膜作为质控带,建立了同时检测CSFV 和 PRRSV 抗体的胶体金免疫层析方法（GICA）。结果表明,多肽与葡聚糖和生物素的偶联效率较高,分别为84．65％和91．37％;链霉亲和素与胶体金结合最佳 pH 和最佳标记量分别为8．2μg／mL 和30μg／mL。试纸卡灵敏度试验表明,血清1∶80稀释仍可检出,与 Idexx ELISA 试剂盒检出结果基本一致,特异性良好,不与伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒和细小病毒的阳性血清发生交叉反应。与 Idexx ELISA 试剂盒平行检测结果表明,CSFV 抗体总体符合率为86．36％;PRRSV 抗体总体符合率为83．33％。说明利用偶联多肽制备的试纸卡灵敏度高,特异性好,能够同时检测两种病毒抗体,适于基层养殖场使用。     

广东猪输血传播病毒流行病学调查及其主要抗原编码区进化分析

为了解广东省猪群中猪输血传播病毒(TTSuVs)的感染情况,采用Nest-PCR方法对广东省7个不同地区规模化猪场抽检采集的159份育肥猪血清进行检测.结果表明,TTSuVs的2个种——TTSuV1和TTSuV2的阳性检出率分别为54.72％和35.22％,二者的共感染率为29.56％,说明TTSuVs在广东猪群中有较为广泛的传播.挑选Nest-PCR检测TTSuV1和TTSuV2为阳性的样品,分别在病毒保守区设计引物,扩增病毒基因,测序验证后,与其它已发表的不同属种TTVs ORF1序列进行进化树分析.结果表明猪TTVs与人、犬、猫、猴的TTVs分别处在进化树的不同分枝,具有很大差异 ;本次研究获得的TTSuV1 ORF1序列与国内多株已发表的TTSuV1 ORF1序列相似性为72％～75％;获得的TTSuV2ORF1序列与现有测序的多株TTSuV2的ORF1序列相似性为88％～97％.此研究为进一步研究TTSuVs流行状况、血清学诊断方法和临床防治技术奠定基础.     

狮子滩水电厂下硐电站水轮机保护性改造

根据重庆市下硐电站转轮能量指标明显偏低、过流能力也偏低和受三峡水库回水影响而损失发电量的实际，考虑来流有旋及叶片有限厚度等，采用准三维设计模型，研究出了下硐电站的新型专用转轮。新转轮在不改变原水轮机流道并满足气蚀和稳定性要求的条件下，使下硐电站在受到三峡水库回水影响时，保证机组出力达15．0MW。     

猪干扰素α质粒-PLL聚合体对猪PRRSV弱毒疫苗免疫增强作用研究

本文探讨聚合体形式的猪干扰素α真核表达质粒(p VAX1-PIFNα)对猪PRRSV弱毒疫苗免疫作用的增强作用。在猪免疫PRRSV弱毒疫苗的同时,注射p VAX1-PIFNα重组表达质粒与多聚赖氨酸(PLL)的聚合体(PLL-p VAX1-PIFNα),以研究聚合体状态的干扰素对PRRSV免疫的增强作用。将分泌表达干扰素α的重组真核表达质粒p VAX1-PIFNα与PLL聚合,同时免疫PRRSV弱毒疫苗和PLL-p VAX1-PIFNα聚合体,使用ELISA试剂盒检测PRRSV中和抗体;另外,分离培养猪外周血白细胞(PBMC)进行体外试验,分析PLL-p VAX1-PIFNα聚合体刺激淋巴细胞后IFN-γ的分泌情况。中和抗体的结果表明,PLL-p VAX1-PIFNα的使用可明显提高PRRSV活疫苗诱导产生PRRSV中和抗体的能力;细胞试验的结果表明,经PLL-p VAX1-PIFNα刺激后,明显提高了淋巴细胞分泌表达IFN-γ的水平。在PRRSV疫苗免疫中,聚合体状态的猪IFNα重组表达质粒可有效提高机体的体液免疫和细胞免疫水平,这一结果也为干扰素或其他重组蛋白在疫苗免疫中的应用提供了新的思路。