几种用于光学显微镜观测的桑叶表皮整体制片方法比较

为了简便而快速制作适用于光学显微镜观测的桑叶表皮标本,采用不同方法分别对桑叶表皮进行整体制片后于光学显微镜下观察其形态特征,比较制片效果。结果表明:用直接剥离法、煮沸剥离法和离析法制作的桑叶表皮标本在光学显微镜下均呈现出清晰结构,桑叶表皮气孔器开张的纵径和横径基本一致,其中离析法制作标本的桑叶表皮的气孔呈阔椭圆形,气孔器面积显著大于直接剥离法和煮沸剥离法制作标本的检测数据,最接近桑树成熟叶片气孔器充分开张时的面积值。因此认为,离析法最适用于桑叶表皮整体制片,该方法定位性能强,操作简便且效率高。     

农杆菌VirD2蛋白的定位特异性改造

农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)VirD2蛋白具有与单链T-DNA(ssT-DNA)共价结合并将其转运至植物细胞核,将外源基因高效整合进核基因组的功能;如果将该蛋白改定位于质体,则有可能利用其将外源基因携带进质体,建立质体转化新方法.本研究对VirD2蛋白的定位信号进行了改造,采用重叠延伸PCR突变技术对Vir2的N端核定位信号(NLS)编码序列进行点突变,对C端编码序列实施缺失突变,并在合成的突变VirD2(mVirD2)基因3’端连接上增强绿色荧光蛋白(eGFP)报告基因,在其5’端加上或不加源自拟南芥(A rabidopsis thaliana)冷调节基因(AtCOR15A)的质体定位信号肽编码序列,分别构成pt-mVirD2-eGFP和mVirD2-eGFP嵌合基因,由CaMV 35 S启动子控制,经农杆菌介导整合进烟草(ic otiana tab ac um)核基因组.荧光检验显示,mVirD2带质体定位信号时绿色荧光集中于叶绿体,mVirD2不带质体定位信号时绿色荧光弥散在细胞质中,且两者的细胞核均无荧光,表明pt-mVirD2-eGFP嵌合基因表达的蛋白具有质体定位特性,并失去了核定位能力.该结果为今后探讨利用pt-mVirD2融合蛋白将外源DNA主动定向牵引进质体,实现质体高效转化研究提供基础资料.     

拟南芥AtHOS10基因的克隆及其表达载体的构建

AtHOS10基因对植物冷调节起到重要作用,可以通过控制ABA合成来改变植物的脱水胁迫耐性。本文利用PCR方法从Columbia生态型的拟南芥基因组中扩增出冷调节基因AtHOS10,并插入克隆载体。序列分析表明,克隆片段长3453bp,与目前发表的序列完全一致。将pUC-AtHOS10和pBI-HEM进行酶切重组构建表达载体pBI-AtHOS10,然后将表达载体转化导入农杆菌中,为侵染烟草作准备。     

培养与制备条件对酵母菌基因组DNA提取质量的影响

以自橙汁中分离的酵母菌株为材料,从培养与制备条件出发,研究不同的培养基、培养容器、培养时间、菌液量和菌液浓度对酵母菌基因组DNA提取质量的影响,建立了酵母菌基因组DNA优良提取体系.即以YPD为液体培养基,三角瓶(100 mL)为培养容器,在30℃下震荡培养12～16 h至菌液OD600=1.5左右,然后用此菌液10 mL以上按试剂盒提供的方法提取基因组DNA.电泳结果表明,采用该体系提取的酵母菌基因组DNA量大、质量好.     

延龄草组织培养研究进展

延龄草是土家族的四大神药之一,具有重要的药用价值。随着延龄草药用价值的开发和利用,其需求量逐渐增大。基于此,从延龄草组织培养的外植体选择、外植体消毒处理方法、愈伤组织诱导、分化芽诱导等方面阐述研究人员对其组织培养上的研究进展,以期为解决延龄草部分资源问题促进开发利用提供理论依据。     

拟南芥AtHEMA1基因的克隆及其表达载体的构建

为探究AtHEMA1基因转化植物后对叶绿素合成机制的影响,本实验设计特异引物,以拟南芥基因组DNA为模板,采用PrimStar HS DNA聚合酶扩增AtHEMA1基因。将AtHEMA1基因克隆至载体pVCT2101,获得植物表达载体pVCT2298。     

番茄质体转化载体pTom-GFPaadA的构建

采用PrimStar HS DNA聚合酶从番茄基因组DNA中扩增出了质体的trnI-trnA基因序列.序列分析结果表明,所克隆的基因与GenBank公布的序列完全相同,与烟草的trnI-trnA基因序列同源性高达94%.将该片段作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn::gfp-aadA::TpsbA表达盒的番茄质体定点转化载体pTom-GFPaadA,酶切鉴定表明,所构建的载体符合预期设计.     

拟南芥AtHEMA1基因的克隆及其表达载体的构建

为探究AtHEMA1基因转化植物后对叶绿素合成机制的影响,本实验设计特异引物,以拟南芥基因组DNA为模板,采用PrimStar HS DNA聚合酶扩增AtHEMA1基因。将AtHEMA1基因克隆至载体pVCT2101,获得植物表达载体pVCT2298。     

彩叶桂花新品种‘红运彩桂’

‘红运彩桂’是从四季桂（Osmanthus fragrans Siji Group）的扦插苗中选育出的彩叶桂花新品种。丛生灌木或小乔木。嫩叶边缘初为紫红色或粉红色,中间浅紫红色,随着生长叶片渐变成边缘黄白色或黄色,中部绿色,每片叶呈现花叶。整株可呈现紫红色、粉红色、绿色、白色、黄色等多彩的颜色,花期从8月中下旬至次年5月中旬,可达10个月,观赏价值高。     

两株橙汁酵母菌落发育的动态特征及鉴定意义

利用体式镜对分离自橙汁的两株酵母菌YA2和Y17-2菌落形态发育的动态特征进行了细致观察,结果表明:不同菌株的菌落具有各自稳定且特定的发育特征.同一菌株不同培养时期的菌落,其形态结构有差异,早期的菌落呈半球形,随着培养时间的延长,菌落中央部分生长速度由快到趋于稳定或下降,由半球形隆起逐渐平缓至塌陷成凹坑;同时,菌落的大小、色泽和质地都将发生较大的变化,具有多样性;同一菌株在不同培养基上的菌落形态特征也有较大的差异.用菌落的发育动态特征来描述菌株,对菌株坚定具有更为直观和重要的意义.结合菌落特征与细胞形态、子囊孢子、假菌丝等特征的分析,将分离自橙汁的酵母菌株YA2和Y17-2分别坚定为Hanseniaspora和Pichia.