不同草莓品种无菌苗增殖及不定芽诱导的研究

采用4个不同草莓品种的无菌苗,研究基因型和继代时间对增殖倍数的影响,同时对获得的无菌苗采用叶片和叶柄2个部位的材料,接种到不同培养基上进行培养,获得了大量的不定芽。结果表明,1)红颜草莓增殖倍数最高,为7.767,其生根数也最多,达11.1个,随着继代天数的增加,增殖倍数增加。培养过程中红颜和章姬不易产生愈伤组织,伸展的叶片正常,红颜叶大而平展,绿色,叶厚,说明增殖过程中愈伤组织的产生不利于根及叶片等其他器官的发育生长。2)不定芽诱导时,4个品种中叶片再生率均高于叶柄,其中红颜叶片的再生率最高,达到80.40%,每叶片外植体平均再生不定芽数达3.65个,最适宜不定芽诱导的培养基为R2(MS+3.0mg·L~(-1) BA+0.1mg·L~(-1) 2.4-D+6g·L~(-1)琼脂+30g·L~(-1)蔗糖)。     

月季bHLH基因的克隆、表达及其与MYB和WD40的互作分析

以月季‘月月红’(Rosa chinensis‘Slater’s Crimson China’)花瓣为材料,利用同源克隆法鉴定到1个Rcb HLH基因的c DNA全长序列,并研究了其生物信息学特征、组织特异性表达及其与MYB和WD40的互作关系。序列分析表明,Rcb HLH的开放阅读框长2 112 bp,编码703个氨基酸,基因登录号为KY783912。结构域序列分析显示,Rcb HLH为一个保守的N端含有碱性氨基酸的DNA结合区、C端含有α螺旋–环–α螺旋的b HLH蛋白。对Rcb HLH进行系统进化分析发现,Rcb HLH与草莓及其他蔷薇科植物的b HLH蛋白具有较高的同源性。组织特异性实时定量RT-PCR分析揭示Rcb HLH基因主要在花瓣中表达。酵母双杂交结果显示,Rcb HLH能与Pav MYB和Pav WD40相互作用形成MYB-b HLH-WD40复合物。以上结果为进一步研究Rcb HLH的功能鉴定奠定了基础。     

草莓FaSKP1-1基因的克隆与表达分析

为研究草莓中SCF复合体的功能,以栽培草莓品种‘74’为试材,采用同源克隆的方法分离出2个SKP1基因。这2个基因核苷酸序列全长均为519bp,核苷酸序列相似性为98.46%,氨基酸序列相似性为98.84%,并具有特殊的‘GVDED’尾巴结构,分别命名为FaSKP1-1a和FaSKP1-1b(基因登录号分别为KU975057和KU975058)。RT-PCR和dCAPS分析发现FaSKP1-1a和FaSKP1-1b在草莓根、茎、叶、花托、花粉、花柱、果实中均高表达,在花瓣中表达量低。上述结果表明FaSKP1-1可能在草莓SCF复合体的形成过程中发挥重要作用。     

树莓SSR反应体系的优化及应用

本研究主要对树莓SSR-PCR体系进行优化,以‘来味里（Reveille）’红树莓为试材,利用L9（34）正交试验设计和两因素完全随机试验,研究各主要参数的适宜浓度,建立适合树莓SSR反应的最佳体系,并通过16个不同的树莓栽培品种对优化后的体系进行验证。结果表明：各影响因素中,引物浓度的变化对扩增结果的影响最大,优化后的最佳反应体系（25μL）中,Taq DNA聚合酶和DNA最适用量分别为1.0U和30ng;Mg2＋、dNTP和引物最适浓度分别为1.5、0.2mmol/L和0.4μmol/L。利用优化后的反应体系和10对SSR引物对16个树莓品种进行PCR扩增,不同品种间扩增结果稳定,多态性位点丰富,共有54个等位位点,表明该体系稳定可靠,适合树莓的SSR分析。     

转CBF1基因地被石竹的抗寒性评价

本研究以4个转拟南芥CBF1基因的地被石竹株系及非转基因地被石竹为材料,通过测定相对电导率、脯氨酸含量及丙二醛含量进行抗寒性评价。研究发现不同低温处理后,转基因株系比对照植株(CK)的相对电导率和丙二醛含量低,而脯氨酸含量高,说明转入CBF1基因后,地被石竹的抗寒性增强了。转基因各株系之间有差异,其中株系27的抗寒性最强。     

日光温室基质栽培对‘红颜’草莓品种生长发育的影响

研究了追施有机肥的基质栽培对日光温室‘红颜’草莓生长发育的影响。结果表明,基质栽培地温的日变化趋势与对照基本一致,10 cm、15 cm日平均地温与对照一致,而5 cm、20 cm处存在差异;基质栽培植株生长势比对照稍弱,主要表现在叶片数减少、叶片纵横径变小;基质栽培植株显蕾期、盛花期比对照晚3~5d,但果实始熟期和成熟期仅比对照晚1 d;基质栽培产量和果实品质与对照差异不显著。基质栽培比较接近土壤栽培,可以用于解决设施栽培中草莓的重茬问题。     

适于SSR分析的树莓基因组DNA的快速提取

通过改良CTAB法对不同品种的树莓幼嫩叶片进行DNA提取,并对得到的DNA进行了电泳检测、含量测定和SSR分析.结果表明:该方法所提DNA的纯度和产率都较高,OD260/OD280比值均介于1.7～1.9之间,OD260/OD230比值介于2.0～2.5之间,无降解现象,RNA去除干净,产率均在50～130μg/mL之间.经SSR-PCR分析条带清晰,多态性好,说明此方法提取的树莓基因组DNA完全适于SSR分析.     

生长点点滴法在筛选鉴定转基因植株中的应用

对转化体 (种子或幼苗 )筛选的培养基筛选法和生长点点滴筛选法进行了比较分析。结果表明 ,在 4d苗龄的转化芥菜幼苗生长点点滴 80 0 mg/L 的潮霉素 ,获得了转基因植株 ,PCR检测结果表明 ,两种筛选方法的筛选结果一致。生长点点滴法的优点是 ,转基因幼苗不易污染 ,且成活率高。     

芥菜植株原位真空渗入遗传转化方法的研究

以蕾期的芥菜生态型雪里蕻和圆叶芥为试材,在携带潮霉素磷酸转移酶标记基因的根癌农杆菌菌株GV3101的介导下,对影响芥菜植株原位真空渗入遗传转化效果的真空渗入时间、根癌农杆菌悬浮孢子的浓度、渗入培养基、感染方式以及根癌农杆菌菌株等进行研究。结果表明,真空渗入时间为2min／间歇30s／30s;菌液浓度OD600为0．8;渗入培养基为1／2MS无机 B5有机;菌株采用强感染型的;对花蕾进行真空渗入,可以获得最佳转化效果。     

鲜食枣新品种‘京枣60’

北京市农林科学院林业果树研究所2004年从西城区官房胡同发现一株大果鲜食类型的实生枣树．2005年进行高枝改接，并与主栽品种‘京枣39’（潘青华等，2003）对比．发现该类枣裂果率明显较低．且可溶性固形物含量高，2007—2009年分别在北京顺义区、河北沧州。