花鲈肝脏hepcidin相关cDNA Hepc2的克隆及序列分析

Hepcidin(Hepc)是一类性质独特的抗菌肽,具有广谱的抗革兰氏阳性、阴性细菌和真菌等作用。利用RT-PCR和RACE等技术,从经过多种细菌攻毒的花鲈(Lateolabrax japonicus)肝组织中克隆出Hepc全长cDNA,命名为Hepc2,Genbank登录号为AY604195。Hepc2有581个碱基,其中阅读框有258个碱基,编码86个氨基酸。预测氨基酸序列和白鲈及其他鱼种在相同保守的区域有8个半胱氨酸,相对分子量为9418.55dal。在3’非编码区有225bp,包含终止密码子下游189nt处的多腺苷酸化AATAAA信号和212nt处的polyA信号。预测蛋白的信号肽断裂位点在第24和第25个密码子之间。通过与白鲈(Morone chrysops)、人和其他鱼种来源的Hepc cDNA和蛋白质同源性分析表明,从花鲈肝中分离的Hepc2 cDNA属于Hepc基因家族的新成员。     

水貂绿脓杆菌分离株的生物学特性和血清型分析

为了解国内水貂出血性肺炎病原绿脓杆菌的生物学特性和血清型分布,2002—2010年间从国内5个省水貂养殖场暴发出血性肺炎的水貂肺中分离获得45株绿脓杆菌,测定了分离株的生化特性、血清型、抗生素敏感性和对小鼠和水貂的半数致死量(LD50)。结果表明:分离菌株的主要生化指标除甘露醇和ONPG与人医临床分离株的不同外,其余均与绿脓杆菌的生理生化特性相同。45株菌共分为3种血清型:G型(42/45),B型(2/45)和I型(1/45),此结果与国外近几十年流行的水貂出血性肺炎和人医临床分离的绿脓杆菌主要流行血清型相同。45株菌对5种抗生素均较敏感,敏感性与分离的年份和菌株的血清型无关系。经动物试验证明,所选的4株菌毒力均不同,2株B型菌株毒力均较G型弱,4菌株对水貂的毒力均强于对小鼠的毒力,说明菌株对水貂较易感。     

狂犬病毒RT-PCR检测方法的建立

根据狂犬病毒保守序列设计引物,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)建立了一种检测狂犬病毒的方法,以期实现对严重危及人和动物生命安全的狂犬病毒直接检测。     

鹿布氏杆菌病流行病学调查

对我国部分省区鹿布氏杆菌病进行流行病学调查表明,我国鹿场饲养的梅花鹿、马鹿群中普遍存在鹿布氏杆菌病,母鹿阳性率明显高于公鹿,梅花鹿阳性率分别为10.06%、4.77%;马鹿阳性率分别为4.90%、11.15%。     

毛皮动物犬瘟热RT-PCR方法的建立与应用

根据GenBank上发表的犬瘟热病毒（CDV）核衣壳（N）蛋白基因序列，设计合成了1对寡聚核苷酸引物，建立CDV的RT—PCR检测方法。结果表明，该对引物能够从CDV疫苗株和疑似病例RNA反转录产物中扩增出大小为335bp的核苷酸片段，与理论值一致；该方法特异、敏感，检出率高，可用于CDV临床快速检测。     

水貂肠炎细小病毒PCR检测方法的建立和应用

根据GenBank上已发表的水貂肠炎细小病毒基因序列,在其编码VP2结构蛋白基因的高度保守区内,设计合成1对特异性引物,建立水貂肠炎细小病毒PCR诊断方法。经过敏感性及特异性检测,该引物能与MEV标准株和地方分离株核酸发生特异性结合,扩增出一段长度为570bp的DNA片段,而与CDV、ADV等病毒的PCR反应均呈阴性。设计的该对引物可用于MEV的临床检测。     

腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊的免疫试验

将转化C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达质粒的工程菌PAK／2pfsC在含羧苄青霉素的营养肉汤中表达，用MgCl2法在培养物上清中提取表达产物(纤毛蛋白)。将表达的纤毛蛋白用弗氏完全佐剂乳化，制成疫苗，疫苗免疫4只健康绵羊，定期采血，用对流免疫电泳和K凝集试验检到实验绵羊的体液免疫应答及抗体水平。结果发现，免疫后5d即可产生相应抗体，2ld后抗体效价达到1：4000以上。试验表明，腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因工程疫苗对绵羊具有较好的免疫应答和免疫保护性。     

75例雉鸡结核病的病理剖检

雉鸡结核病是由禽型结核分枝杆菌引起的一种接触性传染病。患病雉鸡表现为进行性消瘦,羽毛蓬乱无光泽,缺乏华丽感,不愿活动,经常蹲于阴暗处,打瞌睡,产蛋率下降,最后多因衰竭死亡.雉鸡结核病的发病率和死亡率较高,严重影响雉鸡饲养业的发展。近几年,我们建立了雉鸡结核病的平板凝集等几种血清学诊断方法。75例平