广西猪链球菌2型药物防治及疫苗保护试验

用广西猪链球菌2型强毒株GX01、GX02分别以菌量1.92×108CFU及2.80×109CFU接种猪链球菌2型商品疫苗免疫猪、北里霉素预防猪及对照猪进行药物防治及疫苗保护试验。结果对照猪72h内全部死亡,从死亡猪分离到的细菌应用建立的3重PCR检测方法检测及序列分离证实为GX01、GX02;而疫苗免疫猪、北里霉素预防猪攻毒15d后仍存活,经活体采扁桃体分离、检测,猪链球菌2型阴性。猪链球菌2型商品疫苗及北里霉素对广西猪链球菌2型强毒株具有很好的预防效果。     

猪链球菌9型的分离与鉴定

猪链球菌属于1987年新设立的一个种,按荚膜抗原的差异分为35个血清型,包括1~34和1/2,猪链球菌2型是其中毒力最强、最常见的一种人畜共患病〔1~3〕,猪链球菌9型也是猪链球菌病的一种重要病原,在荷兰、巴西、意大利、加拿大、法国等都有流行〔4,5〕。我国是养猪大国,随着猪规模化养殖的不断扩大,猪链球菌病也呈明显上升趋势,发病率和死亡率均较高,损失非常严重〔6,7〕。目前对猪链球菌2型研究很多,但对猪链球菌9型研究甚少,我们实验室对分离到的9型菌株进行了分子生物学鉴定。1材料和方法1.1材料1.1.1标准毒株:猪链球菌9型毒株由中国动物卫生…     

猪链球菌2型多重PCR检测方法的建立及应用

设计3对引物,分别扩增链球菌属特异性gdh、猪链球菌种特异性16S rRNA和猪链球菌2型特异性cps2J等基因,目的片段大小分别为725bp、523bp和387bp。利用合成的3对引物并通过对反应条件与反应体系的优化建立了多重PCR。应用该多重PCR检测了分离到的链球菌1105株,检出猪链球菌667株,猪链球菌2型33株。研究结果表明,该方法特异性高、敏感性强,可广泛应用于猪链球菌病的快速诊断及流行病学调查。     

猪链球菌亚种及1、2、9型四重PCR检测方法的建立

根据序列分析设计了4对引物,分别扩增猪链球菌gdh、cps1、cps2J和cps9G基因的725、212、387bp和556bp大小的片段,利用合成的4对引物并通过对反应条件与反应体系的优化建立了四重PCR,结果显示,猪链球菌阳性出现1条725bp目的带,猪链球菌1型阳性出现725bp和212bp两条目的带,猪链球菌2型阳性出现725bp和387bp两条目的带,猪链球菌9型阳性出现725bp和556bp两条目的带。应用该多重PCR检测了分离到的链球菌1095株,检出猪链球菌阳性667株、猪链球菌1型8株、2型33株、9型16株。研究结果表明,该方法特异性高、敏感性强,可广泛应用于猪链球菌病的快速诊断及流行病学研究。     

5株H9N2亚型禽流感病毒HA、NA基因的序列分析

为了从分子生物学角度了解H9N2亚型禽流感病毒（AIV）在广西的遗传变异情况,对5株不同年代的广西H9N2亚型AIV的HA和NA基因进行克隆测序及同源性、遗传进化分析。结果表明,5株分离株均为低致病性AIV（LPAIV）,HA、NA基因均属于欧亚谱系中的DK/HK/Y280/97（第I亚群）,与我国代表株CK/BJ/1/94HA基因核苷酸、氨基酸同源性为93.5%～95.9%,NA基因核苷酸、氨基酸同源性为93.8%～95.8%。分离株DK/GX/51/05、CK/GX/55/05HA基因第226位氨基酸由谷氨酰胺（Gln）突变为亮氨酸（Leu）,具备人类流感病毒的受体特征,而在糖基化位点方面,除了CK/GX/6/00HA基因的第218位发生变异以外,5株分离株HA基因上其余各糖基化位点均未发生变异;分离株DK/GX/51/05、CK/GX/55/05、QA/GX/B1/06NA基因均缺失第63、64、65位3个氨基酸,导致1个糖基化位点缺失,而CK/GX/6/00、WB/GX/A1/06NA基因则未发生缺失。