手术治愈细颈囊尾蚴脐疝1例

本乡独阜岭村教师杨某拉来一头约60公斤重的肉猪求治。主诉:该猪腹底出一疙瘩,逐渐增大,食欲渐减,消瘦,生长缓慢,猪龄已达13个月。检查脐部有一排球大疙瘩,触之凉,不软不硬,无痛感,按压触摸不到疝气环,     

黄牛网瓣口阻塞一例

一头9岁公黄牛,病已3年,逐渐消瘦,被毛粗乱无光泽。平时无异常表现,唯在反刍时往往犯病。反刍突然停顿,流口水和白色泡沫,随之发喘,心音洪亮,体温升高,精神极度沉郁,以后渐复常。犯病次数夏秋多于冬春。1987年8月在一次犯病中突然死亡。剖检:网瓣口处有一只已被结缔组织包埋的解放牌鞋。     

当心牛敌百虫中毒

牛体涂敌百虫灭蜱,效果不错,但由于用量不当,或用药时间不适宜,容易发生中毒,且因来不及抢救而很快死亡。1982年夏秋季节,本县丁河乡因用敌百虫灭蜱引起中毒的牛不下10余头,死亡6头。     

厚朴温中汤治疗耕牛虚寒胀满

六年来,笔者用厚朴温中汤治愈耕牛虚寒性胀满13例,其中黄牛9例、水牛4例,均治愈。例1 1981年9月12日,五里桥乡北堂村乔斌运一头3岁水牛就诊。主诉:5天前因灌降火药野菊花秧过多,当天发现水牛不吃草,腹部膨胀。检查:口、鼻、耳温度偏低,瘤胃蠕动音弱,口内不时有清水流     

来源于Selenomonas ruminantium的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达

 应用酶解效率更高的高比活植酸酶是进一步提高植酸酶发酵效价、降低植酸酶生产成本的有效途径。根据毕赤酵母对于密码子的选择偏向,对来源于原核瘤胃微生物Selenomonasruminantium的高比活植酸酶基因phyS进行了密码子优化,将优化后的植酸酶基因phyS(m)与未优化的phyS插入到毕赤酵母转移载体pPIC9中,转化毕赤酵母得到重组子,在摇瓶水平上,phyS(m)的表达水平比phyS高10倍。在5L发酵罐中,优化后的植酸酶基因phyS(m)其蛋白表达量达到4mgml-1发酵液,效价达到1.6×106I     

鲎素抗菌蛋白及在饲料工业中的应用前景

一、前言 我国年产饲料7000万t,因其中的有害微生物造成的饲料变质而使营养物质流失达到15％～20％,每年造成的直接损失高达10亿元以上;而有害微生物引起的动物中毒造成的损失更高,达30亿元以上。 饲料中富含蛋白质、糖类等多种营养,易于畜禽消化吸收,同时也有利于病原腐败菌的生长。在饲料中添加防腐剂、防霉剂等饲料保存剂,是解决、延长保质期的有效措施之一,但这些饲料保存剂主要是化学药剂,存在残留的问题,被畜禽吸收到体内并有一定程度的累积,这种累积     

在烟草中表达的高比活性木聚糖酶XYNB

来源于橄榄绿链霉菌（Streptomyces olivaceoviridis）A1的木聚糖酶XYNB是一性质优良的高比活性木聚糖酶，已在饲料中作为添加剂应用。本研究利用携带双35S启动子和AMV增强子的表达载体，在烟草中高效表达了XYNB。转基因烟草及其子代植株基因组PCR检测证实xynB基因已整合到转基因烟草的基因组中, ELISA和SDS-PAGE以及Western blotting分析确证了xynB基因的高效表达, 木聚糖酶活性分析证实了表达酶具有正常的生物学活性。表达的XYNB约占叶片总蛋白含量的6%， 转基因烟草表现的最高酶活性约为170 IU/g鲜叶片(23 IU/mg总蛋白)。表达酶蛋白分子量为20.8 kD, 与理论分子量相当。转基因植株可以正常生长和繁殖，T₁子代植株表现了与亲代相似的酶活性，具有较好的遗传稳定性。     

环状芽孢杆菌乳糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质分析

摘要: 将环状芽孢杆菌(Bacillus circulans )中的乳糖酶基因在大肠杆菌(Escherichia coli )中进行了高效表达, 并测定了表达的乳糖酶的基本酶学性质。结果表明, 表达的乳糖酶有生物学活性, 但与来源于环状芽孢杆菌的原始酶相比, 其酶促反应的最适pH、最适温度、Km值, 以及酶的pH稳定性和温度稳定性等酶学性质均有较大变化。表达的乳糖酶最适pH为5.0, 低于原始酶的pH 6.5; 最适温度为37 ℃, 而原始酶为55 ℃; 其耐酸性、耐热性及对金属离子的抗性等方面比原酶有所提高; 而且表达的乳糖酶Km比原始酶小285倍、Vmax比原始酶大5.4倍，表明经大肠杆菌表达的乳糖酶有较高的底物亲和力，酶促反应效率更高。从乳糖酶的单位表达量来看, 原始酶在环状芽孢杆菌的表达量为20.98 U/mL，而在大肠杆菌中的表达量提高到33.102 U/mL。     

橄榄绿链霉菌A1所产43kD木聚糖酶XYNA的纯化及其酶学性质

橄榄绿链霉菌A1(Streptomyces olivaceoviridisA1)所产木聚糖酶XYNA经阴离子交换层析和分子筛层析分离,得到纯化的XYNA.XYNA的分子量约为43 kD.其最适温度为60℃,最适pH5.6.XYNA在55℃下以4-O-Me-D-glucurono-D-xylan的Km值和Vmax分别是332 g/kg和15.72μmol/(mL@min).SDS、EDTA对XYNA有轻微的抑制作用.XYNA无纤维素酶活性.胃蛋白酶、胰蛋白酶处理30 min,对酶活性无影响.XYNA成熟蛋白N端10个氨基酸序列为Ala-G1u-Ser-Thr-Leu-Gly-Ala-A1a-Ala-Ala.     

高比活木聚糖酶XYN-W及其突变体在酵母中的高效表达

将来源于瘤胃真菌Neocallimastix frontalis的高比活木聚糖酶基因xyn-w整合到毕赤酵母表达载体pPIC9上,通过电击转化得到重组转化子。SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,木聚糖酶基因xyn-w得到了高效分泌表达,在5 L发酵罐中木聚糖酶蛋白表达量达到1 mg/mL,酶活性达到13 000 IU以上。XYN-W 的C端57个氨基酸序列为连接序列和锚定区域,利用PCR方法将此段序列去除,得到截短的木聚糖酶序列xyn-m。用相同方法构建高效表达XYN-M蛋白的毕赤酵母工程菌株,表达产物经纯化后进行酶学性质测定, 结果表明, 其比活为19 856.6 IU/mg, Kcat值为4 433.8 s-1,与纯化的XYN-W蛋白(比活性13 795.3 IU/mg、Kcat值2 717.1 s-1)相比,分别提高了43.9%和63.2％。