黑龙江东部某牛场泌乳牛跛行调查及其与产奶量、胎次和干物质采食量的关系研究

为了调查泌乳奶牛跛行与产奶量、胎次和干物质采食量(DMI)的关系,研究采用5分制跛行评价标准,对黑龙江东部某牛场376头泌乳奶牛进行跛行评价,同时记录每头实验泌乳奶牛的平均日产奶量(kg·d-1)、胎次和DMI。跛行评分结果显示,1分泌乳奶牛头数为42(11.17%),2分泌乳奶牛头数为83(22.07%),3分泌乳奶牛头数为187(49.73%),4分泌乳奶牛头数为50(13.30%),5分泌乳奶牛头数为14(3.72%)。进一步统计分析结果显示,产奶量、DMI与跛行评分呈负相关,胎次与跛行评分呈正相关;跛行严重影响泌乳奶牛的产奶量,1分与4分泌乳奶牛相比,日产奶量相差约7 kg。研究通过跛行评分调查,明确了该牛场泌乳奶牛跛行情况,以及跛行评分与产奶量、胎次、DMI的关系,为奶牛跛行的防治及其对奶牛生产的影响提供了基础。     

中国几省市猪萨佩罗病毒巢式RT-PCR检测与遗传进化分析

为了准确了解猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)在中国流行情况及遗传进化规律,试验针对PSV 5'-NTR基因利用巢式RT-PCR方法对2015～2017年来自中国部分省市规模化猪场采集的368份样品进行检测,将阳性样品对VP1基因进行克隆、测序、构建进化树。巢式RT～PCR检测结果表明,368份样品中24份样品为阳性,总阳性率为6.52%;8份样品测序成功,序列分析结果表明核苷酸同源性为77.0%～99.7%,推导的氨基酸序列同源性为83.6%～100.0%,遗传进化分析结果显示,中国地区的PSV病毒呈现出遗传多样性,其中3个毒株与德国参考毒株亲缘关系较近,2个毒株与国内外参考毒株的亲缘关系均较远,变异较大。研究丰富了PSV分子流行病学资料,为进一步研究该病毒提供了参考。     

一例猪流行性腹泻病毒与致病性大肠杆菌混合感染的诊断及分析

为明确齐齐哈尔市泰来县某猪场引起哺乳仔猪腹泻的病因,试验采集腹泻仔猪的粪便样品,通过PCR检测、细菌分离培养、16S rRNA序列测定、同源比对分析以及分离菌株的致病性试验等对腹泻仔猪的病原进行了鉴定,同时对分离菌株进行药敏试验。结果表明：在腹泻仔猪粪便样本中猪流行腹泻病毒（PEDV）呈阳性;从病料中分离出的菌株与大肠杆菌（KJ477007.1、MW301234.1等）的同源性均超过99%;将分离菌株以腹腔接种的方法注射给BALB/c小鼠,约20 h后接种分离菌株的小鼠全部死亡,剖检和HE结果显示该分离菌株致病性较强;该分离菌株对头孢噻呋、头孢吡肟存在高度敏感性;对头孢喹肟和林可霉素存在中度敏感性;对庆大霉素、恩诺沙星、卡那霉素、氟苯尼考以及阿奇霉素存在耐药性。说明该猪场的仔猪腹泻主要是由猪流行性腹泻病毒和致病性大肠杆菌的混合感染所致,在进行治疗时,应结合药敏试验的结果进行用药。     

猪干扰素α-1基因的原核表达与多克隆抗体制备

[目的]利用大肠杆菌原核表达系统对猪干扰素α-1(Po IFNα-1)基因进行表达,制备Po IFNα-1重组蛋白多克隆抗体。[方法]根据Gen Bank发表的Po IFNα-1核苷酸序列,合成密码子优化的Po IFNα-1基因,构建Po IFNα-1基因的p ET-28a原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌后,利用IPTG进行诱导表达。表达的Po IFNα-1重组蛋白纯化后,免疫昆明系小鼠,制备多克隆抗体。采用Western blot技术检测Po IFNα-1重组蛋白的多克隆抗体与天然Po IFNα-1的反应性。[结果]合成的Po IFNα-1基因在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中成功表达,针对Po IFNα-1重组蛋白的多克隆抗体能够识别天然的猪干扰素α-1。[结论]合成的Po IFNα-1基因在大肠杆菌中获得了成功表达,为后续研究奠定了基础。     

3C样蛋白酶：重要抗PEDV药物的筛选靶标

<正>猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)成员。由于冠状病毒的RNA酶缺乏校正功能，PEDV等冠状病毒的基因组易发生变异。2010年末，PEDV变异株所致疫情在我国猪群中暴发以来，该病一直在我国猪群中反复流行，对哺乳仔猪的致死率高达100%。当前，疫苗接种仍然是防控PEDV感染的首选措施。然而，冠状病毒变异速度快、流行株多，导致现有疫苗株对当前流行变异株只起到部分的交叉免疫保护。抗病毒药物对于病毒感染的应急性治疗，特别是对新生仔猪等尚未形成完整免疫系统的动物，在缓解病情进一步恶化中发挥重要作用。在抗病毒药物的设计策略中，靶向病毒的药物可以在不影响宿主细胞的同时有效抑制病毒的复制，并且由于大部分病毒结构简单，病毒蛋白数量相对较少，易设计出特异性抑制病毒蛋白功能的抗病毒药物。