1株多重耐药致病性大肠杆菌的分离鉴定与分子分群

2017年1月,新疆博乐某牛场犊牛群出现腹泻疫情,本试验旨在调查病因并制定相应的防控措施。采集6头腹泻犊牛的肛拭子和新鲜粪便样本,先用Speed V-Diar4~(TM)试纸进行轮状病毒、冠状病毒、隐孢子虫和大肠杆菌F5(K99)的检测,再对样本进行病原菌的分离鉴定和分子分群,最后对分离菌进行致病力及耐药性的检测。结果显示,所有粪便样本的试纸检测结果均为阴性,从6份样品中共得到6株大肠杆菌和1株爱德华氏菌,分子分群PCR检测结果显示6株大肠杆菌中A群占83.3%(5/6),F群占16.7%(1/6)。半数致死量结果显示,只有1株大肠杆菌(菌株XJ-B1)具有致病性,可致小白鼠腹泻和死亡。药敏试验结果显示,7株分离菌对这18种抗生素产生不同程度的耐药性,其中致病性大肠杆菌XJ-B1耐药程度最严重,对β-内酰胺类、磺胺类和多肽类抗生素耐药,为多重耐药菌。由此可见,这株致病性大肠杆菌可能是引起本次犊牛腹泻的病因之一,也是本试验首次分离到牛源的F群大肠杆菌,该菌的多重耐药性增加了临床治疗的难度,而本试验结果为该牛场治疗此次犊牛腹泻提供了依据。     

牛病毒性腹泻病毒感染对CD46基因修饰树突状细胞表型及其细胞因子分泌的影响

为研究CD46分子在BVDV感染树突状细胞(DC)介导的免疫应答中的作用,本研究根据牛CD46基因保守序列设计3对短发卡RNA(shRNA)的正义、反义寡核苷酸链,以及3对乱序列作为阴性对照,将其退火后分别克隆至p LL3.7质粒载体中,获得CD46基因shRNA重组质粒后将其转染MDBK细胞。采用荧光定量PCR和western blot技术筛选最佳沉默CD46基因的shRNA重组质粒,将其和表达载体p VAX1-CD46转染新疆褐牛DC(MDDCs)后利用BVDV感染MDDCs,通过荧光定量PCR检测DC表型及其细胞因子mRNA转录水平。结果显示,与未转染细胞组相比,CD46基因过表达的MDDCs中CD40、CD80、CD86和MHC-II的mRNA转录水平均明显升高(p0.05);而CD46基因沉默的MDDCs中CD40 mRNA转录水平也明显升高(p0.05),CD86 mRNA转录水平变化不明显(p0.05),CD80和MHC-II的mRNA转录水平均明显下降(p0.05)。与未转染细胞组相比,CD46基因过表达组IL-10和IL-12 mRNA转录水平变化不明显(p0.05),而CD46基因沉默的MDDCs中IL-10和IL-12 mRNA的表达均明显下降(p0.05)。本研究从新的角度初步揭示了CD46分子对BVDV感染DC成熟、初始T细胞增殖和分化的影响,为解决DCs对BVDV的免疫抑制作用提供新的思路。     

新疆部分地区牛场牛蹄病流行病学及治疗情况调查

为了调查新疆维吾尔自治区部分地区牛场中牛蹄病发病和治疗情况,本试验以乌鲁木齐市周边3个牛场为研究对象,连续5个月对跛行和牛蹄病发病和治疗情况进行记录并分析。结果显示,3个牛场跛行牛只中99.77%由牛蹄病所致,总体发病率为20.91%,其中A牛场为23.08%、B牛场为31.74%、C牛场为8.86%,牛生存环境和饲养管理方式越好的牛场牛蹄病发病率越低;蹄皮炎为主要牛蹄病类型,占80.37%,蹄底溃疡占14.25%,变形蹄占4.91%,蹄叶炎占0.47%。变形蹄以延蹄和拖鞋蹄为主,共占61.91%;48.84%的牛蹄病发生于两后蹄系部,23.14%的牛蹄病发生于趾间。治疗方面,A牛场、B牛场和C牛场患牛蹄病的牛只经3次治疗后治愈率分别为100%、100%和97.73%。结果表明,牛蹄病是新疆维吾尔自治区部分牛场中牛只跛行的主要原因,牛蹄病类型主要为蹄皮炎、蹄底溃疡、变形蹄和蹄叶炎,其中蹄皮炎最严重,且以后趾蹄皮炎发病率最高;采用腐蹄康散外用,蜂胶提取物、青霉素和链霉素外用,以及头孢噻夫钠、萘普生注射液和地塞米松注射液肌肉注射联用这3种用药治疗方式均有很好的疗效,提示牛场在加强牛蹄病预防...     

乌鲁木齐市冬春两季宠物源葡萄球菌的耐药性及耐药基因比较

采用琼脂稀释法,检测从乌鲁木齐市部分宠物医院冬季和春季分离鉴定的154株宠物源葡萄球菌(冬季75株、春季79株)对临床常用的12种抗菌药物(阿米卡星、克林霉素、硫酸庆大霉素、氟苯尼考、四环素、利福平、恩诺沙星、青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋、左氧氟沙星)的耐药性;通过卡方检验,比较供试菌耐药性差异;采用PCR方法,检测葡萄球菌的5类9种耐药基因。对抗菌药物的耐药结果显示:冬季葡萄球菌对苯唑西林和青霉素的耐药率高于90.0%,对头孢噻呋和四环素的耐药率高于50.0%;春季葡萄球菌对左氧氟沙星耐药率达92.4%,对苯唑西林和氟苯尼考耐药率高于80.0%。卡方检验结果显示:冬季葡萄球菌仅对苯唑西林的耐药率显著高于春季葡萄球菌(P0.05);春季葡萄球菌对氟苯尼考、利福平、左氧氟沙星、恩诺沙星和阿莫西林/克拉维酸的耐药率均显著高于冬季葡萄球菌(P0.05)。多药耐药差异性结果显示:冬季葡萄球菌多药耐药集中在1～3耐;春季葡萄球菌多药耐药集中在4、6、9耐。基因检测结果显示:冬季葡萄球菌主要检出的基因有ermB(40.0%,30/75)和fexA(22.7%,17/75);春季葡萄球菌主要检出的基因有fexA(39.3%,31/79)和femA(20.3%,16/79),冬、春季葡萄球菌均未检出cfr、fexB和tetA基因。     

某品牌鸽新城疫抗体ELISA检测试剂盒性能评价

为检验市场上鸽新城疫抗体ELISA检测试剂盒的准确性及可靠性,从新疆喀什地区规模化鸽养殖场及鸽养殖合作社采集192份肉鸽血样,同时用血凝及血凝抑制试验以及某品牌鸽新城疫抗体ELISA检测试剂盒进行抗体检测,并以前者的检测结果作为"金标准",对ELISA检测试剂盒的性能进行评价。结果显示:ELISA试剂盒的敏感性为12.3%,特异性为97.4%,阳性似然比为4.73,阴性似然比为0.90,符合率为29.1%,约登指数为0.097,ROC曲线下面积为0.635。结果表明,该ELISA试剂盒检测鸽新城疫抗体的能力较差。这提示养殖企业及实验室选择ELISA方法检测鸽新城疫抗体前,应先对试剂有效性进行科学评估。     

鸡肾型传染性法氏囊病的诊断与治疗

传染性法氏囊病( IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性传染病,法氏囊是受影响最大的器官[1].目前该病作为危害养禽业的三大主要疫病之一,呈世界性分布[2].法氏囊是鸡的中枢免疫器官,一旦受到损害,会引起免疫抑制,使鸡群对大肠杆菌、沙门菌、球虫等病原更易感,对马立克氏病疫苗、新城疫疫苗等的反应能力下降[3],直接影响养殖户的经济效益.IBD的诊断一般主要依赖于病理解剖学,观察胸肌、腿肌、法氏囊及腺胃等处的典型病变.而肾病变为主的IBD,单纯靠病理解剖很难做出诊断,需要用实验室方法确诊.最近本院门诊遇到一例以肾病变为主要病理变化的病例,通过琼脂扩散法确诊为IBD,用高免蛋黄液注射配合中药“法贝灵”饮水治疗效果很好.     

一例鸭疫里默氏杆菌病的诊治

1发病情况2010年9月10日,新疆乌鲁木齐市安宁渠某养殖户饲养的1500只20日龄雏番鸭下架后开始发病.据畜主介绍,16日龄前,鸭群精神、食欲均正常,无死亡.17日龄个别雏鸭无任何明显症状而突然死亡,18日龄死亡增加至20余只,鸭群采食量开始急剧下降,到我处诊断时已经死亡80余只.     

骆驼食道破裂的诊治

林场接诊一例6月龄骆驼以吞咽困难、逆流食物为主要症状的病例,通过触诊、投胃管、X线造影检查,确诊为颈部食道下1/3处破裂。采用外科手术缝合破裂食道及术后连续5 d抗菌消炎补能量后治愈该病。     

猪源葡萄球菌中氟苯尼考耐药基因及其移动元件检测分析

氟苯尼考是一种特效动物专用抗菌药,随着临床用药量加大,其耐药菌株的数量也呈逐年上升的趋势,因而其传播机制亟需研究。收集新疆乌鲁木齐市周边养殖场的猪直肠和鼻腔样品,采用琼脂稀释法对样品中分离出的葡萄球菌进行临床9种常用抗菌药物的药敏试验,通过PCR方法对耐氟苯尼考的葡萄球菌进行耐药基因cfr、fexA和fexB的检测和物种鉴定,并对引起其传播的插入序列IS21-558和Tn558转座酶基因进行检测分析,探究引起上述耐药基因在菌群间可能的传播机制。结果显示鼻腔和直肠分离的葡萄球菌对克林霉素和氧氟沙星的耐药率较高,而对庆大霉素耐药率较低;鼻腔葡萄球菌主要以6耐（19.9%）和7耐（19.9%）为主;而直肠葡萄球菌主要以8耐（27.1%）为主;直肠葡萄球菌比鼻腔葡萄球菌耐药情况更加严重。筛选出两株均携带cfr和fexA基因的葡萄球菌,分别鉴定为松鼠葡萄球菌（Staphylococcus sciuri）和木糖葡萄球菌（Staphylococcus xylosus）,1株携带fexA基因的葡萄球菌鉴定为腐生葡萄球菌（Staphylococcus saprophyticus）,未检出携带fexB基因的菌株。通过PCR扩增发现3株阳性菌携带部分IS21-558移动元件基因和Tn558转座酶基因,可能会增加cfr和fexA基因的水平传播风险,使多药耐药细菌的产生成为可能。本研究揭示应加强畜牧兽医临床对cfr和fexA基因的检测和监测工作,为进一步分析阳性耐药菌株的传播和流行提供基础数据。     

烧烙法摘除犬樱桃眼手术的操作

犬樱桃眼又称犬瞬膜脱出、第三眼睑突出症,是兽医临床常见的犬眼部疾病之一,也是各种犬特别是纯种小型犬的幼年犬和青年犬较多发生的一种眼科疾病。临床上常表现为犬的内眼角瞬膜缘处突然长出黄豆至花生米大小的粉红色软组织球,其表面光滑湿润,呈游离状态,基部有蒂与第三眼睑相连,轻者眼内分秘浆液性或黏液性分泌物,使眼角下面的皮肤被毛变湿,重者眼的发病部位骚痒,常被病犬用前爪搔扒造成眼睛各处的感染。