粤西籍人群Fv Leiden基因突变的初步调查

了解ＦｖＬｅｉｄｅｎ基因突变在广东籍正常人群中发生的情况。方法：用两种引物多聚酶链反应方法检测１３０例广东雷州籍正常人和３例静脉血栓患者ＦｖＬｅｉｄｅｎ基因突变情况，结果所有的样本均未检出ＦｖＬｅｉｄｅｎ突变。结论粤西籍正常人中尚未发现ＦｖＬｅｉｄｅｎ突变。     

基于EST和GSS序列的木豆miRNA生物信息学分析

应用miRtour在线分析工具对木豆EST和GSS序列进行miRNA生物信息学预测,应用psRNATarget进行靶基因预测。结果发现,43条不同的木豆miRNA成熟序列,隶属于33个不同的miRNA家族。靶基因预测发现有36条编码序列受miRNA调控,其中17条序列编码酶,2条编码转录因子,7条编码参与细胞信号转导的蛋白,5条编码参与蛋白质降解通路的蛋白。     

一个遗传性FXIII缺乏症家系的mRNA转录的表达

目的：观察F13基因缺陷对F13转录表达的影响,从而了解F13基因缺陷与F13功能不足的关系。方法：采用RT-PCR法对一个遗传性F13基因缺乏症家系的FXIIIA亚基mRNA转录表达水平进行分析。结果：家系不同成员中FXIIIA亚基mRNA的不同片段的转录水平存在差异。FXIIIA亚基mRNA片段l和片断2的水平在携带双重基因突变杂合子基因的先证者及其弟中明显低于在其父母中;FXIIIA亚基mRNA片段3的水平在整个家系中无明显差异。结论：复合杂合子基因中双重基因突变导致FXIIIA亚基mRNA转录表达异常．不能表达足量正常的FXIIIA亚基,导致FXIII缺乏症。     

雷公藤育苗气象因子影响分析与温室控制

为了探索雷公藤育苗过程中的生产规律,更好地掌握气象主要因子对雷公藤温室育苗的影响,提高雷公藤种苗的数量和质量,本研究以试验地的方式,对雷公藤温室与大田育苗的生长规律进行对比观测,并对温室育苗中的主要气象因子采取调控方法。试验结果表明：（1）温室培育的雷公藤苗年生长规律与大田苗年生长规律基本相同,年生产期约252天;（2）雷公藤苗木期较耐荫,温室育苗时适当遮荫,有利于苗木生长,即遮荫度50%较好;（3）雷公藤喜湿润的生长环境,水分对雷公藤温室苗生长影响较大,即供水量1400 mm的高度供水较佳;（4）雷公藤对生态环境的要求是忌风、少蒸发;（5）气温变化小,对雷公藤生长有利。本试验得出一般性结论：主要气象因子对雷公藤苗木生长有重要影响,在温室育苗中中度遮荫、加大供水、少风、减少温差等合理控制,有利于提高雷公藤的品质和产量。     

小鼠B7-H4原核表达载体的构建、表达及多克隆抗体的制备

目的探讨小鼠B7-H4原核表达载体的构建、表达及多克隆抗体的制备。方法采用特异性引物扩增小鼠B7-H4（mB7-H4）胞外功能区DNA,经酶切、拼接构建原核表达载体pET28a-mB7-H4。将构建的重组表达质粒转化入E.coliBL21（DE3）菌株,采用IPTG诱导表达、Ni-NTA柱亲和层析纯化目的蛋白、SDS-PAGE分析蛋白纯度。将纯化的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并对其进行纯化及鉴定。结果序列测定证实了构建的pET28a-mB7-H4重组表达载体含有mB7-H4编码序列,其序列分析与GenBank中公布序列对比一致,质粒在E.coli中诱导表达相对分子质量（Mr）为26.5 KD的目的蛋白,SDS-PAGE分析表明纯化后的目的蛋白达到电泳纯。双向琼脂扩散法检测抗体效价为1∶16,ELISA法检测抗体效价为1∶12 800,Western blot分析显示抗体能特异性结合mB7-H4。结论成功制备了高表达重组mB7-H4蛋白的原核表达载体及高效价抗mB7-H4多克隆抗体,为进一步研究B7-H4的功能奠定了基础。     

5种桉属植物的miRNA生物信息学预测

[目的]识别桉树miRNA基因和寻找与桉树木质形成相关的miRNA,为进一步开展桉树遗传品质改良工作奠定理论基础。[方法]将mirBase数据库中所有植物的3 228条miRNA序列提交到psRobot网站进行茎环结构预测,应用blast-2.2.27＋软件与rfam数据库和pfam数据库比对后去除非miRNA序列,并应用bioedit软件分析miRNA序列及前体序列的碱基组成特点。[结果]共计预测到26条miRNA前体序列和19条不同的成熟miRNA序列,并发现桉树miRNA序列在碱基偏倚现象,5’端第1碱基尿嘧啶出现的频率高达52.6%,而在第19碱基胞嘧啶出现频率为61.1%。靶基因预测发现3个与木质形成相关的miRNA。[结论]应用生物信息学方法首次在桉树中预测到了19条成熟miRNA序列,并识别到了3个与木质形成相关的miRNA。     

辅酶Ⅱ—亲和胶的制备和应用

本文介绍了NADP—Sepharose4B亲和胶的制备方法。利用此亲和胶分离纯化了人红细胞葡萄糖—6—     

人红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶变异型—Gd(一)湛江型的鉴定及分离纯化

利用自制合成NADP—Sepharose4B亲和胶,分离纯化了1例人红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶变异型,并进行了生化特征的鉴定。其生化特性与国内已报道的变异型不同,命名为Gd(—)湛     

人类红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶的分离纯化与鉴定

用人ACD抗凝全血450ml,制成溶血液,经NADP—Sepharose4B亲和层析,DEAE—Sephadex A50柱,Sephadex G200柱,获得G6PD纯品0.83mg。经SDS—PAGE显示单一电泳带,分子量60000。纯化倍数22027,比活性163IU/mg,回收率60％。     

临床生物化学检验理论课的教学改革初探

进入 2 1世纪 ,随着电子技术、信息技术的发展和基因后时代的到来 ,以生物技术、电子技术为主要依托 ,以研究人体内的生物化学改变及其检验技术为主要研究对象的临床生物化学检验正以前所未有的速度发展 ,为疾病的诊疗提供越来越多的信息。因此 ,临床生物化学检验作为现代检验医学主要的亚学科 ,其作用和地位越来越受到重视。如何把握好临床生物化学检验实验这门理论性、技术性都很强的应用学科课程的教学 ,以适应形势发展的需要 ,是当前教学改革亟待解决的问题 ,尤其是对临床生物化学检验实验的教学改革更是当务之急。其原因有三 :第一 ,在…