扁桃AcDHN1基因的克隆及原核表达分析

【目的】 克隆与分析扁桃脱水素基因,为研究脱水素基因在扁桃抗逆机制中发挥的功能提供参考。【方法】 以新疆栽培的扁桃品种‘纸皮’叶片为材料,通过PCR技术克隆扁桃AcDHN1基因并对该基因进行原核表达分析,构建原核表达载体,在大肠杆菌进行表达。【结果】 克隆得到了一个脱水素基因,命名为AcDHN1,GenBank登陆号为KT949395,该基因全长924 bp、编码308个氨基酸的多肽,为稳定的亲水性蛋白,属于Y₂K_n型脱水素,推测蛋白分子质量为32.4 kD,亚细胞定位于细胞核中。将该基因与原核表达载体连接构建重组质粒pET-AcDHN1,然后将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。SDS-PAGE电泳结果表明,该蛋白分子量的大小约为52.7 kD,与预期长度一致。【结论】 对重组蛋白的诱导条件进行优化后结果显示,该基因在IPTG浓度0.1 mmol/L、诱导3 h表达量最佳。     

天山樱桃EST-SSR引物开发及PCR反应体系优化

以新疆天山樱桃叶片为试材,从NCBI数据库中搜索天山樱桃EST序列,利用SSRHunter 1.3软件查找SSR位点,结合Primer 6.0设计引物,通过正交实验和单因素试验优化天山樱桃SSR-PCR反应体系,并用最佳体系对所开发的引物进行验证,以期为研究天山樱桃遗传多样性、构建遗传连锁图谱奠定基础。结果表明:从58对备选引物中随机挑选30对引物进行试验,有21对引物能够扩增出特异性条带,有效扩增率为70%。20μL天山樱桃SSR-PCR最佳反应体系为dNTP 0.2mmol·L~(-1)、引物0.4μmol·L~(-1)、Taq酶0.75U、模板DNA 60ng。     

新疆农业大学园艺专业课程需求调查——基于园艺专业毕业生问卷分析

本文通过调查问卷方式,从应聘者和用人单位需求两个角度对新疆农业大学园艺专业近四界毕业生进行调查,对报考专业途径、就业状况、能力需求以及课程设置等方面进行分析。对园艺专业培养模式进行了探索与建议,从而进一步提升园艺专业教学质量与教学效果,为园艺专业人才培养提供参考。     

基于新疆特色的园艺专业人才培养探讨

针对新疆园艺产业发展需求和新疆农业大学园艺学科园艺专业人才的培养特点,以问卷调查的形式,对用人单位及毕业生从专业技能培养需求和毕业生能力素质2个方面展开调查,在分析调查问卷的基础上探讨当前新疆特色园艺产业人才培养模式,并提出改进建议,期望为区域园艺专业人才培养提供参考。     

‘新世纪梨’ב崇化大梨’F1代分子遗传连锁图谱的构建

研究目的在于为以后控制重要农艺性状的QTL定位、梨分子标记辅助育种及品种改良提供基础理论。利用‘新世纪梨’ב崇化大梨’杂交得到的210 株F1代实生苗为作图群体,对分离群体进行了ISSR、SRAP、SSR 标记的多态性检测,共得到154 条多态性条带,其中偏离孟德尔遗传比例的含21.4%(P＜0.01)。应用JoinMap 4.0 软件对154 个多态性条带进行遗传连锁分析,构建了一张包括9 个SSR标记,79个SRAP标记,8个ISSR标记,合计96个标记分属于14个连锁群的遗传图谱,图谱总长度为1530 cM,平均图距为16.1 cM,最大的连锁群含有64个标记,最小遗传距离小于0.1 cM。     

新疆扁桃花粉萌发及花柱离体培养试验研究

对‘纸皮'、‘双果'、‘克西'、‘麻壳'、‘267'共5个扁桃品种进行花粉萌发试验,结果表明‘纸皮'花粉萌发率最高,为84.83%。‘克西'的萌发率最低,为0.65%。通过对5个品种自交和杂交授粉后的花柱进行离体培养可以看出,自交时,‘双果'ב双果'的自交组合优势最为明显;杂交时,‘双果'ב纸皮'的授粉组合优势最为明显。     

2个野扁桃自交不亲和SFB基因全长的克隆与序列分析

为给野扁桃的遗传改良和自交不亲和机制的进一步研究提供理论依据,以新疆野扁桃花药为试材,利用RT-PCR和RACE技术克隆野扁桃自交不亲和性花粉特异性决定因子编码基因SFB全长序列。采用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,CDD分析蛋白保守结构域,Prot Param分析蛋白理化性质,TMHMM预测蛋白跨膜区,Signal P预测蛋白信号肽,Sub Loc预测蛋白亚细胞定位,SOPMA分析蛋白二级结构,DANMAN进行氨基酸多序列比对,MEGA6进行系统进化分析,Prot Fun预测蛋白功能。结果表明:克隆到的Pt SFB16基因和Pt SFB17基因属于F-box基因家族,与其它多种植物的SLF/SFB基因的序列相似度为88%,推导的氨基酸序列均具有F-box蛋白典型结构;Pt SFB16基因ORF长1 146 bp,编码381个氨基酸,Pt SFB17基因ORF长1 131 bp,编码376个氨基酸;预测2个SFB蛋白均为略显亲水性、不稳定的细胞质蛋白,二级结构均以α-螺旋,延伸链和无规则卷曲为主,SFB/SLF蛋白在蔷薇科李属植物中具有较高的系统进化一致性,种间同源性可能大于种内同源性,SFB蛋白可能的功能主要有辅助因子生物合成、能量代谢和裂合酶。     

扁桃AcCBF1基因VIGS载体构建与功能分析

【目的】利用VIGS(TRV-mediated Virus Induced Gene Silencing)方法沉默扁桃(Amygdalus communis L.)AcCBF1基因表达,并初步探讨AcCBF1对低温条件下花药发育的调控。【方法】从‘纸皮’扁桃花药中克隆AcCBF1基因(729 bp),并设计4个不同长度(729、345、464、270 bp)的AcCBF1基因片段,连接到pTRV2载体上,构建VIGS载体,转化根瘤农杆菌GV3101,并用注射法侵染到扁桃花蕾内。对侵染的花器官低温处理,用半定量PCR和荧光定量PCR分析AcCBF1基因表达,以及对花器官表型进行初步分析。【结果】成功构建了3个AcCBF1基因沉默表达载体,pTRV2-AcCBF12和pTRV2-AcCBF14能显著沉默扁桃花药中AcCBF1的表达;低温处理后这两组处理的扁桃花瓣小且颜色浅,花芽和花药鲜重轻且小,与对照相比差异显著。【结论】AcCBF1在调控低温条件下对花器官表型指标发挥重要作用。该研究结果可为扁桃生殖期抗冻相关基因的功能验证和分子调控机制研究提供重要的参考和技术支持。     

库尔勒香梨结果枝类型与坐果关系研究

以6年生库尔勒香梨为研究材料，分别随机选取500个结果枝和1年生发育枝，测定枝条长度、粗度、叶长、叶宽和叶片叶绿素含量。在果实成熟期，随机选取其不同类型（短枝、中枝、长枝）结果枝各50个，调查每个结果枝的单枝果实数量、单枝坐果率、单枝产量和果实品质。结果表明，库尔勒香梨1年生发育枝和结果枝可分为三类：长度<5.21cm的枝条为短枝，长度在5.21～19.89cm范围内的为中枝，长度>19.89cm的枝条为长枝。1年生发育枝以中枝为主，占比70.00%，叶片特征无显著差异。结果枝以短枝为主，占比71.66%，不同结果枝类型的叶长、叶宽差异显著。库尔勒香梨坐果集中为短、中果枝且粗度为5.0～7.0mm的枝条。库尔勒香梨结果短枝、中枝、长枝的单果重、纵径、横径、可溶性固形物、维生素C和可溶性糖含量均有显著性差异，均表现为短枝>中枝>长枝，而不同结果枝类型在石细胞、果形指数、硬度和可滴定酸方面差异不显著。综上所述，库尔勒香梨结果枝以短枝为主，短果枝在枝类组成、叶片特征、果实数、坐果率、单枝产量和果实品质方面均优于中果枝和长果枝。因此，库尔勒香梨生产中应加强对结果短枝的培...