CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达

有研究证实,霍乱毒素(CT)A1亚基与葡萄球菌G蛋白的D肽偶联构建的融合蛋白CTA1-DD具有良好的佐剂效果。为了获得重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中的表达,将CTA1-DD基因连接到表达载体pHT43中,构建重组枯草杆菌表达载体pHT43-CTA1-DD。将重组载体转化到枯草芽胞杆菌WB600中,用IPTG诱导重组菌表达,发酵液离心后取上清液,通过SDS-PAGE和Western blot方法分析蛋白表达情况。发酵上清液经Ni-IDA琼脂糖树脂纯化,与流感病毒HA抗原混合后共同滴鼻免疫小鼠后采集小鼠血清和支气管肺泡灌洗液检测IgG和IgA的抗体水平。结果显示：重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中能够分泌表达,在发酵罐中发酵36 h情况下蛋白表达量最高,目的蛋白大小在42 kDa左右,蛋白产量最高能到700μg/mL,Western blot检测目的蛋白正确表达。重组蛋白经过Ni-IDA琼脂亲和层析纯化后与HA抗原混和滴鼻免疫小鼠,ELISA结果显示CTA1-DD蛋白组针对HA抗原能够诱导更高的血清IgG和黏膜IgA抗体水平,说明枯草芽胞杆菌表达的CTA1-DD蛋白具有佐剂活性...     

生根剂在樱花、红叶李嫩枝扦插育苗上的应用研究

不同生根剂对樱花、红叶李等嫩枝扦插育苗的影响研究结果说明:ABT、GGR生根剂比萘乙酸钠有更好的生根效果,其中最好的是ABT1号效果最好,扦插成活率高,根数多,生根时间快。     

根际解钾菌的筛选及其对烟草钾素吸收的影响

为提高烟叶钾含量,减少化肥施用量,采用选择性培养基结合烟草凝集素的筛选方法从烟草根际筛选高效解钾菌株,并分别通过盆栽试验和田间试验评估菌株对促进烟草生长及钾素吸收的效果。共筛选获得6株烟草根际解钾菌株,其中假单胞菌(Pseudomonas sp.)LK26菌株具有较优良的促生长特性。盆栽试验表明LK26菌株可显著提高烟草叶片和根系重量,提高烟草根际土壤钾含量及烟叶钾含量。田间试验表明,与施加减钾肥20%、未接种菌液及施全肥、未接种菌液的烟草植株相比,接种LK26菌株的烟草植株其根际土壤钾含量分别提高27.71%和10.25%;其下叶、中叶和上叶钾含量分别提高17.80%和5.30%,40.59% 和24.48% 以及15.69% 和5.36%。该菌株是一株潜在的烟草用生物钾肥优良菌株,具有进一步研究和应用潜力。     

不同移栽期对保山香料烟叶片碳氮代谢关键酶活性和化学成分的影响

通过大田试验,研究了不同移栽期对保山香料烟叶片碳氮代谢关键酶活性和烟叶化学成分的影响,结果表明:11月18日移栽的烟株,在生长发育时期由以氮代谢为主向以碳的积累为主的转变较为平衡,但是在此移栽期的基础上,应注意烟株生长发育过程中氮素的适当追加,以提高上部叶烟碱含量.使上部叶化学成分趋于协调.移栽期过早或过晚,由于气候因素的影响,都会导致烟叶在整个发育时期内碳氮代谢转变不平衡,烟叶化学成分不协调.     

水仙家养正当时——中国水仙，喇叭水仙，红口水仙的莳养

清香淡雅的中国水仙 中国水仙（通称水仙）别名凌波仙子、玉玲珑、金盏银台、天葱、雅蒜等，属石葱科、水仙属多年生草本植物。     

转运真核表达盒的重组T7噬菌体构建

为了构建转运真核表达盒的重组T7噬菌体,并分别在体外、体内条件下检测其标签蛋白质EGFP的表达。以T7噬菌体基因组左侧578 bp处为插入位点,取上游400 bp和下游200 bp片段作为左右同源臂,并在其中插入表达EGFP基因的真核表达盒(EEB),构建同源重组质粒p UC-L-EEB-R。将该质粒载体转化T7噬菌体宿主细菌BL21,在噬菌体繁殖过程中完成同源重组,PCR筛选重组T7-EEB噬菌体。提取该重组噬菌体基因组转染Vero细胞后体外检测EGFP蛋白质表达,纯化的噬菌体免疫小鼠后体内检测EGFP蛋白质表达。结果显示,通过同源重组方法成功构建了携带真核表达盒的重组T7噬菌体,PCR检测和酶切鉴定均证明表达盒已正确插入。T7-EEB基因组转染真核细胞可见明显的EGFP蛋白质表达,免疫小鼠后活体荧光检测到EGFP蛋白质信号,在小鼠肝脏、脾脏组织中RT-PCR检测到EGFP基因的mRNA转录。表明同源重组方法可以用于构建重组T7噬菌体,噬菌体能够转运真核表达盒并实现蛋白质表达。     

十堰植烟土壤有效态微量元素分布特征及评价

[目的]研究十堰市植烟土壤有效态微量元素现状,分析其丰缺程度,以期为全市烟区烟草平衡施肥方案的制订及烟叶品质的改善提供理论依据。[方法]以十堰烟区植烟土壤为研究对象,对房县、竹山、竹溪和郧西4个植烟土壤有效态微量元素含量及分布进行分析。[结果]十堰烟区植烟土壤中有效铜、有效铁含量丰富,有效锌含量整体处于中等偏低水平,有效硼、有效钼、水溶性氯含量大部分处于缺乏或者潜在缺乏水平;十堰烟区有效态微量元素含量分布存在明显的地域差异,其中,郧西产区有效钼、有效硼、水溶性氯、有效锌含量偏低,竹山产区有效钼、有效锌、有效硼含量偏低,竹溪产区水溶性氯含量偏低,房县产区有效硼、水溶性氯含量偏低。[结论]在生产中,十堰烟区应适当补充含硼、含钼、含氯等微量元素肥料,其中,郧西产区应补充硼肥和钼肥,竹溪产区应补充氯肥,竹山产区应补充锌肥和硼肥。     

多雨年份富士苹果典型叶果病害的发生与防治

山东烟台、潍坊等地近两年降雨量偏多,晚熟富士苹果叶部和果实病害频发,尤其是褐斑病和炭疽病、轮纹病更为严重,且有扩展蔓延趋势.轻者当年的产量和质量受到影响,重者在苹果果实进入二次膨大期以前,就出现严重的大面积落果、落叶的现象,造成了很大的经济损失.     

果树盆景的后期养护要点

盆景成型后，后期养护非常重要，主要注意以下几点：1补足光照，及时浇水果树盆景喜光照，生长期宜放置在露地或阳台见光处。观赏期一般10d左右搬到屋外阳光下，养护一周再搬回室内观赏。浇水是常做又不易掌握好的盆栽技术，果树盆景需水较多，