一种单子叶植物总DNA提取方法的改进及应用

本文报导了一种可用于多种单子叶植物总ＤＮＡ提取的简易方法，其特点是迅速简易、成本低、产量高、纯度好，所得粗提总ＤＮＡ产量达３００μｇＤＮＡ／ｇ组织，经ＲＮＡ酶（ＲＮａｓｅＨ）处理后，电泳检测未发现残余ＲＮＡ。该方法可用于不同用途的单子叶植物总ＤＮＡ的提取与纯化，如用于花粉管导入法分子育种的基因源植物总ＤＮＡ的提取、对转基因植物进行ＤＮＡ分析等研究。     

利用PIG基因枪进行水稻基因转化的研究

我们利用自行安装的ＰＩＧ基因枪瞬时转化水稻悬浮细胞，对其操作参数及转化条件的优化进行了研究。ＰＩＧ基因枪结构简单，操作方便，价格及维持费很低。研究结果表明，在设计参数为轰击持续时间５０ｍｓ及样品室真空度为２９～３０ｉｎ．Ｈｇ时，其它操作参数的优化值为氦气压力６０ＰＳｌ，轰击高度为１７ｃｍ，缓冲网板高度为ｇｃｍ。水稻悬浮细胞在轰击前后分别进行高渗处理（含有０．５Ｍ甘露醇的ＬＳ０．５培养基）４ｈ和１０～１６ｈ可提高转化率４倍以上，在ＤＮＡ吸附过程中，用乙醇进行后处理比用水处理可提高转化率３．８倍。另外，用金粉为ＤＮＡ载体比钨粉效果好，转化量可提高一倍以上。这些结果证实ＰＩＧ基因枪的可靠性及稳定性。这对促进ＰＩＧ基因枪在植物基因工程中的应用有着重要意义。