胡萝卜抗冻蛋白基因克隆及植物表达载体构建

以胡萝卜品种 Autumn King的幼苗为材料 ,用 CTAB法提取其基因组 DNA,以 PCR ( Polym eraseChain Reaction)的方法在体外扩增出胡萝卜抗冻蛋白基因 ( afp) ,以 p UCm - T Vector为载体构建成胡萝卜 afp的克隆载体 p TAF,用 Eco R 消化重组质粒 p TAF使其线性化 ,再用 DNA聚合酶 Klenow大片段补平末端 ,然后用Xba 消化 ,获得一末端粘 ,一末端平的目的片段 ( afp)。植物表达载体 p BI12 1用 X ba 和 Sma 双酶切 ,获得一末端粘 ,一末端平的线性质粒。将目的片段与线性质粒在 T4DNA连接酶的作用下进行定向连接 ,构建成胡萝卜 afp的植物表达载体 p BAF     

植物afp表达载体的构建及其对农杆菌的直接转化

详细报道了胡萝卜抗冻蛋白基因（afp)植物表达载体的构建过程及其直接法转化农杆菌的方法，以限制性内切酶从克隆载体上切取afp基因，将其连接在相应酶切的pBI121工程质粒上，构建成afp植物表达载体，采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌，并用PCR方法进行了鉴定。     

胡萝卜抗冻蛋白基因克隆及植物表达载体构建

以胡萝卜品种Autumn King的幼苗为材料，用CTAB法提取其基因组DNA，以PCR（Polymerase Chain Reaction)的方法在体外扩增出胡萝卜抗冻蛋白基因（afp),以pUCm-T Vector为载体构建成胡萝卜afp的克隆载体pTAF，用EcoRⅠ消化重组质粒pTAF使其线性化，再用DNA聚合酶Ⅰ Klenow大片段补平末端，然后用XbaⅠ消化，获得一末端粘，一末端平的目的片段（afp)。植物表达载体pBI121用XbaⅠ和SmaⅠ双酶切，获得一末端粘，一末端平的线性质粒。将目的片段与线性质粒在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接，构建成胡萝卜afp的植物表达载体pBAF。     

植物afp表达载体的构建及其对农杆菌的直接转化

详细报道了胡萝卜抗冻蛋白基因 (afp)植物表达载体的构建过程及其直接法转化农杆菌的方法。以限制性内切酶从克隆载体上切取 afp基因 ,将其连接在相应酶切的 p BI12 1工程质粒上 ,构建成 afp植物表达载体。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌 ,并用 PCR方法进行了鉴定     

胡萝卜Daucus carota var. sativus Hoffm Deutschl 抗冻蛋白基因的克隆及测序

 以宁夏吴忠胡萝卜、陕西华县胡萝卜和陕西汉中胡萝卜3个地方品种为材料,用PCR (polymerase chain reaction) 的方法克隆了中国胡萝卜的抗冻蛋白基因(afp) , 测定了其核苷酸序列, 并和英国胡萝卜的afp序列进行了对比。在所测1004个核苷酸中, 两变种碱基不同者有36 个, 占3. 6%, 其中无义突变21 个, 有义突变15个。按有义突变计, 同源性为98. 5%。     

抗冻蛋白应用研究进展

综述了近年来抗冻蛋白（antifreeze proteins,AFPs）应用研究的进展，内容包括：AFPs的特性和种类，AFPs在农业、渔业，食品工业，动物学和医学等领域的应用研究，AFPs在细菌和酵母菌中的表达以及AFPs和细菌膜的关系等。