暗诱导衰老小麦叶片内一种耐热蛋白水解酶的分离及其生化特性鉴定

采用30%～50%饱和度的硫酸铵沉淀、凝胶层析脱盐及聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,再通过直接切胶后用回收槽电洗脱回收的方法,从暗诱导衰老小麦叶片中分离得到了1种耐热的蛋白水解酶.该酶具有良好的热稳定性,且表现出相当宽的pH稳定范围.该酶的最适温度为50 ℃,最适pH为8.分离得到的酶液在0～60 ℃处理1 h后,酶活性无明显变化,70 ℃处理1 h后仍有部分活性.酸性蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和半胱氨酸蛋白酶抑制剂都不能抑制该蛋白水解酶的活性,但丝氨酸蛋白酶抑制剂能部分抑制该酶的活性.     

黄瓜叶片生长期间内肽酶活性和同工酶变化及其生化特性

研究了黄瓜自然生长期间叶片可溶性蛋白质降解、内肽酶活性及其同工酶的变化,并对叶片衰老后期粗提液内肽酶的基本生化特性进行了研究.结果表明,黄瓜叶片内肽酶活性在叶片伸出5 d时较低,叶片衰老后期(叶片伸出35 d)显著升高,Rubisco蛋白发生明显降解;叶片全展以后叶片蛋白质含量与内肽酶活性显著负相关.黄瓜叶片粗提液总内肽酶的最适pH为7.0,最适温度为40 ℃,内肽酶活性可被Ca2+、Zn2+、半胱氨酸等激活.内肽酶抑制剂试验显示,丝氨酸类型的内肽酶活性占内肽酶总活性的57%左右.采用以明胶为底物的内肽酶梯度凝胶电泳活性染色方法,检测到叶片中至少有4种内肽酶同工酶,各同工酶在叶片生长过程中出现的时间和活性大小不同,丝氨酸型内肽酶同工酶活性随叶片生长明显增强,暗示该类内肽酶在黄瓜叶片衰老过程中可能具有重要作用.     

NO荧光探针应用于植物细胞的研究

[目的]探讨一种能够有效地应用于植物细胞的NO荧光探针装载方法。[方法]在相同荧光探针浓度,进行不同装载时间（0、6、12、18h）及不同装载温度（4、25℃）的探针装载,并用荧光显微镜观察荧光强度。[结果]植物细胞的荧光强度随装载时间的延长和温度的降低而增强。[结论]延长装载时间及低温均有利于植物细胞的NO荧光探针装载。     

小麦叶片内1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基由53 000到50 000裂解反应的定位研究

研究了小麦叶片内1，5-二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶（Rubisco，EC 4．1．1．39）大亚基（LSU）由53000裂解为50000的反应。结果显示，成熟叶片的粗提液在pH5．5的条件下反应后能检测到50000的裂解产物，而暗诱导衰老叶片的粗提液在pH7．5的条件下也能发现LSU的这一降解。分别从成熟叶片和衰老叶片中提取叶绿体，以其裂解液为反应体系研究LSU由53000裂解为50000这步反应的细胞器定位。结果显示，衰老叶片中的叶绿体裂解液在pH7．5时反应1h后能检测到50000降解产物，而成熟叶片叶绿体裂解液在pH5．5和pH7．5的条件下反应后均未检测到LSU的50000裂解产物。上述结果表明：衰老叶片中ISU由53000部分裂解为50000的反应定位于叶绿体内，而成熟叶片中LSU由53000裂解为50000的反应可能定位于叶绿体外。     

不同肥力条件下小麦施用叶绿酸铁的效果

研究了叶绿酸铁对不同肥力条件下小麦生长、产量及品质的影响.小麦在播种前用0.3 mg/L叶绿酸铁水溶液浸种,生长期用1.6 mg/L叶绿酸铁水溶液喷洒4次.结果表明,叶绿酸铁处理能促进小麦生长,提高产量,对品质无不良影响,能减少肥料的用量.在半肥(化肥施用量减半)条件下,能增产27.8％,增产增收效果显著.     

黄瓜叶片生长期间内肽酶活性和同工酶变化及其生化特性

研究了黄瓜自然生长期间叶片可溶性蛋白质降解、内肽酶活性及其同工酶的变化,并对叶片衰老后期粗提液内肽酶的基本生化特性进行了研究.结果表明,黄瓜叶片内肽酶活性在叶片伸出5 d时较低,叶片衰老后期(叶片伸出35 d)显著升高,Rubisco蛋白发生明显降解;叶片全展以后叶片蛋白质含量与内肽酶活性显著负相关.黄瓜叶片粗提液总内肽酶的最适pH为7.0,最适温度为40 ℃,内肽酶活性可被Ca2 、Zn2 、半胱氨酸等激活.内肽酶抑制剂试验显示,丝氨酸类型的内肽酶活性占内肽酶总活性的57%左右.采用以明胶为底物的内肽酶梯度凝胶电泳活性染色方法,检测到叶片中至少有4种内肽酶同工酶,各同工酶在叶片生长过程中出现的时间和活性大小不同,丝氨酸型内肽酶同工酶活性随叶片生长明显增强,暗示该类内肽酶在黄瓜叶片衰老过程中可能具有重要作用.     

暗诱导衰老小麦叶片内一种耐热蛋白水解酶的分离及其生化特性鉴定

采用30%～50%饱和度的硫酸铵沉淀、凝胶层析脱盐及聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,再通过直接切胶后用回收槽电洗脱回收的方法,从暗诱导衰老小麦叶片中分离得到了1种耐热的蛋白水解酶.该酶具有良好的热稳定性,且表现出相当宽的pH稳定范围.该酶的最适温度为50 ℃,最适pH为8.分离得到的酶液在0～60 ℃处理1 h后,酶活性无明显变化,70 ℃处理1 h后仍有部分活性.酸性蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和半胱氨酸蛋白酶抑制剂都不能抑制该蛋白水解酶的活性,但丝氨酸蛋白酶抑制剂能部分抑制该酶的活性.     

叶绿酸铁对盐胁迫下绿豆幼苗生长和氧化损伤的影响

150 mmol/L NaCl盐胁迫下,用不同浓度叶绿酸铁处理绿豆幼苗,研究叶绿酸铁对叶片脂质过氧化的影响.结果表明:10、1、0.1 mg/L叶绿酸铁在处理后期(第4～8天)均能够显著提高叶片叶绿素的含量,分别比对照增加38.6％、48.1％、36.1％;活性氧氧化膜脂产物丙二醛含量分别降低30.2％、31.3％、20.0％;同时,叶绿酸铁可明显提高过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)等活性氧清除酶活性,并且促进抗氧化物质脯氨酸含量升高.说明叶绿酸铁可以通过提高盐胁迫下绿豆叶片的抗氧化能力来缓解氧化损伤,这是首次发现叶绿酸铁对逆境植物有抗氧化作用.     

羟丙基-β-环糊精/胰岛素的合适包合比及体外透膜能力研究

[目的]研究羟丙基-β-环糊精/胰岛素包合的合适比例及经包合后的胰岛素的体外透膜能力。[方法]连续递变试验测定包合比递增的作用变化,溶液法制备包合物;DTA和1H-NMR验证包合物;HPLC检测中性条件下包合后胰岛素的溶解度;Caco-2细胞模型考察包合后胰岛素的体外透膜能力。[结果]羟丙基-β-环糊精与胰岛素分子比增大至120∶1,包合作用仍未现饱和;40∶1分子比包合物中胰岛素中性条件溶解度达16.70 g/L,且胰岛素表观渗透系数较包合前增大约10倍。[结论]羟丙基-β-环糊精包合胰岛素难达饱和,其40∶1包合物即有较高胰岛素Caco-2细胞转运能力。