林麝源肺炎克雷伯氏菌新LysR家族转录因子的原核表达

为研究林麝源肺炎克雷伯氏菌新LysR家族转录因子kp05372的功能,采用PCR方法扩增林麝源肺炎克雷伯氏菌新LysR家族转录因子kp05372基因,连接T载体进行克隆,双酶切后连接表达载体pET-32(a),构建重组表达质粒,并转入大肠杆菌BL21(DE3)细胞,然后对其最佳表达时间、温度、IPTG浓度进行筛选,利用SDS-PAGE与Western Blot鉴定重组蛋白,得到约53.2 ku的融合蛋白,与预期大小一致。本研究成功构建kp05372基因表达载体,并筛选出最佳表达条件,为进一步研究该蛋白结构功能奠定了基础。     

林麝肺源致病性大肠杆菌分离鉴定及毒力基因PCR检测

为鉴定引起林麝肺炎的病原,本研究采用常规鉴定方法和16S rRNA PCR方法从94份患肺炎的林麝肺组织病料中分离鉴定出30株大肠杆菌(E.coli)分离株。小白鼠感染试验表明,30个分离株均为致病性E.coli,对小白鼠的致死率为100%。通过PCR方法检测这30株林麝肺源致病性E.coli分离株的10种毒力基因结果表明,其中ompA毒力基因检出率为80%,显著高于其sat(36.67%)、vat(26.67%)和iucDa(23.33%);而neuC、sitD ep.a、sfa/focCD、afa/draB、iha和sitD chr.毒力基因的检出率均为阴性。结果提示结合常规鉴定方法,16SrRNA PCR可作为临床快速检测林麝肺源致病性E.coli的有效方法。对林麝肺源致病性E.coli毒力基因的检测及鉴定,为进一步研究林麝肺源致病性E.coli的致病机理奠定了基础,同时为防治林麝E.coli性肺炎提供了依据。     

麝化脓病细菌性病原诊断鉴定

目的:寻找麝化脓病细菌性主要病原,为防治麝化脓病以及麝化脓病病原的研究奠定基础。方法:病料组织触片镜检,兰氏染色后镜检,用LB培养基、鲜血培养基对56份病料进行病原菌的分离培养,观察菌落形态,兰氏染色镜检,用微量生化反应管对细菌进行生化试验,对分离得到的菌株用纸片法进行药物敏感性试验。结果:从分离菌的形态、培养特征、生理生化特性等,可以证实分离的3种菌分别为巴斯德菌(Pasteurella spp)或绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)或耶尔森菌(Yersinia spp)、化脓隐秘杆菌(Actinomyces pyogenes)和葡萄球菌(Staphylo-coccus spp)。结论:根据流行病学特点、对死亡麝病变组织的剖解检查和病原菌分离培养鉴定的结果,可以证实引起麝发生化脓病病变的病原菌为巴斯德菌或绿脓杆菌或耶尔森菌、化脓隐秘杆菌和葡萄球菌。临床治疗首选药物为左氧氟沙星、磺胺、先锋霉素Ⅳ。     

林麝肺炎及化脓性疾病的病理组织学观察

为观察患肺炎及化脓性疾病死亡林麝的肺脏、肝脏、心脏和肾脏的病理组织学变化,采用石蜡切片、苏木素-伊红染色后显微镜检查.结果发现,肺脏主要表现为化脓性肺炎,肝脏主要表现为急性肝炎,心脏主要表现为急性心肌心包膜炎,肾脏主要表现为急性肾小球肾炎.     

林麝大肠杆菌病三价铝胶灭活疫苗的研制及其抗体水平测定

采用林麝致病性大肠杆菌血清型菌株O4,O26和O139为抗原,经甲醛灭活,以铝胶为佐剂,制成林麝大肠杆菌病三价铝胶灭活疫苗,含菌量为20×108/ml。疫苗成品纯粹检验、安全性检验均达到相关要求。将疫苗分别肌肉注射怀孕母麝及其所产仔麝,采用首免后7天进行二免及其二免后14天进行三免的免疫方法,并用微量血凝试验检测母麝和仔麝的血清抗体水平。结果表明：怀孕林麝产后35天至产后68天的血清抗体水平较稳定,怀孕林麝产后68天的血清抗体仍可维持到平均24.75;仔麝可获得母源抗体,但母源抗体在出生后60天消退,因此仔麝首免时间确定为出生后60日龄,仔麝三免后可获得一定的抗体水平,可使仔麝对林麝致病性大肠杆菌有一定的保护力。该疫苗的试制为致病性大肠杆菌性化脓病和肺炎的预防奠定了一定的基础。     

山羊抗绿脓杆菌免疫球蛋白对黑熊胆囊炎防治研究

1.前言活熊取胆,引流后胆囊炎的发病率非常高,这不仅影响熊的利用年限,而且导致产品数量、质量下降。研究表明,绿脓杆菌是熊胆囊炎的主要病原菌。绿脓杆菌在自然界分布极广,对多种抗生素具有较强的耐药性,给防治带来较大困难。为此我们试制了山羊抗绿脓杆菌免疫球蛋白,用于防治黑熊胆囊炎,取得了满意的效果。2.材料与方法2.1 菌株从黑熊胆囊炎病料中分离出134株绿脓杆菌,从中筛选出代号为19—     

麝地方流行性肺炎病原分离鉴定及防治研究

１９８５年以来，从麝地方流行性肺炎的３３个病死麝肺中分离得到１８株霉形体。菌体呈以环状为主的多形态；菌落无中心，经Ｄｉｅｎｅｓ染色，菌落中心呈深蓝色；其生长需要胆固醇，能产生过氧化氢，分解葡萄糖，但不分解精氨酸和尿素，氯化四氮唑还原反应呈阳性。生长抑制试验证实，分离的霉形体其生长均能被其中的１０号代表菌株抗体所抑制（表明为同种），但该抗体不能抑制猪肺炎霉形体Ｚ、绵羊肺炎霉形体Ｙ９８、絮状霉形体、殊异霉形体、丝状霉形体丝状亚种Ｃ８８、丝状霉形体山羊亚种Ｃ８７、猪鼻霉形体ＢＴＳ－７、禽败血霉形体Ｓ６和无乳霉形体（表明为异种）。药敏试验结果，分离菌株对枝原净高度敏感，土霉素中度敏感，氯霉素低度敏感，红霉素和链霉素不敏感。研究证明，麝地方流行性肺炎的原发性病原为麝肺炎霉形体，继发病原为绿脓杆菌、葡萄球菌、链球菌和肺炎双球菌等。该病用枝原净等治疗后Ｘ光胸透证明，治愈率达９０％。