林麝源肺炎克雷伯氏菌新LysR家族转录因子的原核表达

为研究林麝源肺炎克雷伯氏菌新LysR家族转录因子kp05372的功能,采用PCR方法扩增林麝源肺炎克雷伯氏菌新LysR家族转录因子kp05372基因,连接T载体进行克隆,双酶切后连接表达载体pET-32(a),构建重组表达质粒,并转入大肠杆菌BL21(DE3)细胞,然后对其最佳表达时间、温度、IPTG浓度进行筛选,利用SDS-PAGE与Western Blot鉴定重组蛋白,得到约53.2 ku的融合蛋白,与预期大小一致。本研究成功构建kp05372基因表达载体,并筛选出最佳表达条件,为进一步研究该蛋白结构功能奠定了基础。     

蜂王浆的抗菌活性研究

本文采用平板培养法研究蜂王浆的抗菌活性 ,发现新鲜蜂王浆对10种试验菌均有不同程度的抑制作用。根据抑菌斑的大小判断 ,蜂王浆对各种试验菌株的抑制程度为 :枯草杆菌>威克氏酵母>蜡状芽孢杆菌>隐球酵母>鼠伤寒沙门氏菌>大肠杆菌O111>福氏志贺氏2型菌>假单孢杆菌>N1 米曲霉>霉菌W15。     

基于园林废弃物真菌菌剂的制备及应用

采用"以废治污"的理念,将以园林废弃物为基质制备的真菌菌剂应用于污染河水中,以实现固体废弃物与废水的联动处理。考察园林废弃物的含量、基质厚度和初始含水率对该菌株孢子制备的影响,并用响应面法优化制备工艺。结果表明,影响孢子产量的因子主次顺序为基质厚度、园林废弃物含量和含水率;最佳制备工艺条件为园林废弃物含量46%、基质厚度3 cm、初始含水率57%,得到的孢子数为4.75×10~9CFU/g,该结果与回归方程预测值接近;将制备的孢子活化,并以0.50‰的接种量投加至污染河水中,曝气处理54 h后,COD、NH_3-N和TP的去除率分别达84.97%、97.07%和51.64%;连续试验表明,该菌剂能够有效地降低河水中的COD、NH_3-N和TP等污染物,且具有较高的稳定性。     

野猪源大肠杆菌的分离鉴定及肠毒素与耐药性分析

为探究1株从野猪粪便中分离的大肠杆菌致病类型及耐药表型,通过野猪粪便大肠杆菌分离纯化、培养特性分析、生化试验、16S rRNA基因分析、药敏试验,对野猪源大肠杆菌进行分离鉴定及耐药表型分析。并通过PCR扩增,对其携带的耐药基因和特定毒力基因进行检测。结果显示,在7份新鲜野猪粪便中分离出1株多重耐药大肠杆菌,该菌株对红霉素、四环素、头孢拉定、头孢他啶、林可霉素、氨苄西林和氨曲南等多类药物具有抗性。PCR扩增显示,该菌株携带有耐热肠毒素 STⅡ基因及mecA、blaOXA、blaIMP、carO、KPC-2、 ant(4′,4′)、 aph(3′)-Ⅱa、tetA和tetB等耐药基因。结果表明,该野猪粪便分离菌株为多重耐药产肠毒素大肠杆菌,研究结果为野猪源病源菌的致病性及耐药性研究奠定基础。     

蛆粪有机肥对玉米致病真菌及线虫的活性抑制研究

[目的]探讨蛆粪有机肥对玉米病害的防治效果。[方法]研究了不同浓度的蛆粪有机肥提取液对玉米致病真菌及线虫的抑制活性,并研究了蛆粪有机肥对染尖孢镰刀菌的玉米种子的防治效果。[结果]蛆粪有机肥提取液对5种玉米植物致病菌有较好的抑菌效果,当用添加有蛆粪有机肥浓缩液的培养基进行抑菌试验时,抑菌效果明显,其对线虫的杀伤作用也优于复合肥。玉米种子发芽试验结果表明用蛆粪有机肥提取液浸种,可减少真菌感染,提高发芽率。[结论]蛆粪有机肥对玉米真菌病害及线虫具有较好的防治效果,有望进一步研究与开发。     

母犬哺乳期缺钙的诊治

母犬在产后哺乳期患急性低血钙症是病程短、急性发作严重的代谢性疾病，如诊治不当，易造成死亡。本病常见于小型玩赏犬，1胎产仔过多，产后15天以内多发此病。自1994年以来，笔者收治3例，采取了相应的治疗措施，均获痊愈。现报道如下。1发病情况病例1：刘某饲养的一条小型狐狸犬，体重2.5Kg，营养状态一般。于1994年10月产下4只仔犬，母犬产后7天，突然发病，体温高达40℃以上，呼吸急促，张口喘息，嘴角流白沫，头部肌肉颤动，四肢步态瞒册，心跳加快至每分钟200次以上。该犬主食猪肺与米饭。病例2：林某于1995年7月携一条狮子母犬前来…     

林麝肠源和圈舍土源大肠埃希菌的分离鉴定及其耐药基因的检测

为了解林麝肠源大肠埃希菌耐药表型和耐药基因及其与圈舍土源大肠埃希菌的关系。从茂县、都江堰、理县、陕西、泸定、汉源6个林麝养殖场采集66份林麝新鲜粪便及养殖场20份土壤样本，通过分离纯化、生化试验、16S rRNA基因序列分析鉴定，得到59株林麝肠源大肠埃希菌和12株土源大肠埃希菌，并对其进行药敏试验。据其结果，设计相关12对引物，采用PCR方法对所有菌株的耐药基因进行检测。药敏试验显示，林麝肠源大肠埃希菌对青霉素、庆大霉素、链霉素、四环素、氯霉素具有较强耐药性，在所有菌株中所占比例分别为81.36%、5.08%、13.56%、20.34%和6.78%；土源大肠埃希菌对除氯霉素以外的同种类药物具有较强耐药性，在所有菌株中所占比例为91.67%、16.67%、16.67%、25.00%。PCR结果显示，林麝肠源大肠埃希菌7个基因检出率较高；而土源大肠埃希菌3个基因检出率较高。对于同一种耐药基因而言，林麝肠源大肠埃希菌耐药基因检出率普遍高于土源大肠埃希菌，但从耐药基因检测整体结果来看，林麝肠源大肠埃希菌与土源大肠埃希菌又存在一致性，这说明二者之间可能存在某种相互影响的关系。     

几种蜂产品中类黄酮及部分常量和微量元素含量分析

采用AlCl3 比色法分析几种蜂产品中类黄酮总量 ,发现油菜蜂花粉含2.429mg/g,荞麦蜂花粉为0.729mg/g ,工蜂为1.260mg/g ,蜂蛹和蜂王浆中未检测出类黄酮。采用塞曼原子吸收光谱法测定了蜂王浆和蜂蛹中Ca、Na、K、Mg、Fe、Mn、Zn、Cu、Co9种常量和微量元素含量 ,发现蜂蛹中除Co和Fe之外 ,其余7种元素的含量均高于蜂王浆。     

肺炎克雷伯氏菌毒力因子及其基因组学研究进展

肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）属于肠杆菌科、克雷伯菌属,在人和动物肠道、呼吸道以及水、土壤、林产品和农产品中广泛存在,肺炎克雷伯氏菌作为一种机会致病菌,是目前公认的导致人和动物发病的重要革兰阴性菌。该菌可引起宿主感染肺炎、肝脓肿、脑膜炎、肠炎、子宫炎、乳腺炎及败血症。此外,随着测序技术的发展,全基因组序列分析已经广泛应用于探究肺炎克雷伯氏菌入侵以及抵抗宿主免疫系统引起致病的研究。对肺炎克雷伯氏菌毒力因子荚膜（Capsule）、脂多糖（Lipopolysaccharides,LPS）、菌毛（Fimbriae）、外膜蛋白（Outer membrane proteins）、铁载体（Siderophores）、尿囊素（Allantoin）代谢相关因子及其基因组学研究进展进行综述,并对肺炎克雷伯氏菌研究中的一些问题进行探讨。