大环内酯类抗生素对细菌生物被膜作用的研究进展

细菌生物被膜(BBF)是一类由生物大分子包裹细菌而形成的具有特殊复杂结构的微克隆多细胞群体,由其感染所引起的疾病具有迁延不愈、反复发作等特点,在临床上有较大危害性。当前临床上用于治疗细菌生物被膜疾病的药物主要集中于大环内酯类抗生素,文章综述了细菌生物被膜结构特点和大环内酯类抗生素的药效动力学,并将大环内酯类抗生素清除、抑制细菌生物被膜的主要机理归纳为阻碍细菌黏附过程、破坏细菌生物被膜基础结构和干扰细菌的群体感应系统。     

5株牛源肺炎链球菌的分离鉴定及耐药性分析

为了确定导致吉林省某肉牛场肉牛发病的致病菌,对分离菌进行形态特征、生化特性、分子生物学等鉴定,并对分离菌进行致病性和耐药性检测。结果表明:细菌分离培养共分离到5株病原菌,经分子生物学鉴定,5株病原菌均为牛肺炎链球菌,且均具有致病性;5株牛肺炎链球菌对阿米卡星、氟苯尼考、头孢噻肟敏感,对复方新诺明、泰乐菌素、青霉素钠、红霉素和头孢吡肟具有较强的耐药性,对环丙沙星、氯霉素、强力霉素和庆大霉素呈现不同程度的耐药现象。说明头孢噻肟、氟苯尼考、阿米卡星可作为治疗牛链球菌病的首选药物。     

KGF-2单克隆抗体间接ELISA筛选方法的建立

目的建立KGF-2单克隆抗体间接ELISA的筛选方法 ,制备KGF-2单克隆抗体.方法以KGF-2为抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗血清.通过棋盘滴定方法确定间接ELISA的抗原包被浓度及一抗、二抗最佳工作浓度;利用建立特异性好的间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞株.结果通过棋盘滴定最终确定了500μg/L的抗原包被浓度、1∶1 000的一抗血清稀释倍数及1∶2 000的二抗血清稀释倍数;筛选到两株可稳定分泌抗体、效价较高的杂交瘤细胞株.结论该研究建立了灵敏度高、特异性好的间接ELISA筛选体系,可用于KGF-2单克隆抗体的制备及检测.     

oleosin-MT融合蛋白在拟南芥中的表达及鉴定

【目的】获得转金属硫蛋白(MT)基因的拟南芥植株,为利用植物生物反应器规模化生产MT奠定基础。【方法】利用融合PCR方法,扩增拟南芥MT基因与油体蛋白oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT。采用冻融法将质粒pOP-oleosin-MT转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化拟南芥,用PCR检测并筛选转基因拟南芥阳性植株,采用SDS-PAGE法检测oleosin-MT融合蛋白的表达,用邻苯三酚自氧化法和结晶紫法测定融合蛋白的体外抗氧化活性。【结果】成功构建了植物油体特异表达载体pOP-oleosin-MT,融合蛋白oleosin-MT在拟南芥种子中成功表达,其分子质量为26ku;总蛋白质量浓度达到50μg/μL时,超氧阴离子的清除率最高,为58.5%;总蛋白质量浓度为10μg/μL时,羟自由基清除率可达69.7%。【结论】成功获得转MT基因的拟南芥株系,并证明融合蛋白oleosin-MT在拟南芥中具有良好的体外抗氧化活性。     

红花药理作用及其开发与应用研究进展

红花作为一种传统中药,入药历史久远,是主要的活血化瘀药之一。红花含有多种化学成分,其主要有效成分为黄酮类。红花具有多种药理活性,研究发现红花对心脑血管、神经系统、免疫系统等具有一定的作用。红花作为一种研究和应用比较热门的传统中药材,经过不断地开发与应用,越来越受到人们的关注。文章通过文献查阅,综述了国内外学者对其在药理活性及开发应用的研究进展,为红花进一步的研究及合理开发利用提供参考。     

红花花瓣总RNA提取方法的比较研究

红花花瓣富含多糖、多酚和花色素苷等次生代谢产物,严重影响花瓣总RNA的提取。为探索适合红花花瓣总RNA的提取方法,以4种红花不同时期的花瓣为材料,通过对4种RNA提取方法,即RNA提取试剂盒、RNAiso Plus试剂法、改良的CTAB法和SDS法进行比较研究。结果表明:RNAiso Plus试剂法效果最好,提取的总RNA完整性好,纯度高、浓度高。通过RT-PCR验证,所提取的RNA达到基因克隆和实时定量PCR等分子生物学实验要求。     

植物金属硫蛋白的研究进展

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是从动物体中提纯出来的具有生物活性及性能独特的低分子量蛋白,自从MT被发现以来,它就成为了基础科学研究的热点之一。该文在简要介绍植物金属硫蛋白结构和分类的基础上,概述了金属硫蛋白的分离提取方法;总结了作为现代新型化妆品原料所具有的清除自由基与抗氧化、对金属离子的解毒、防辐射作用、调控基因的表达等特殊功效;并展望了金属硫蛋白的应用前景及存在的问题。     

烟草瞬时表达人表皮细胞生长因子(hEGF)

构建人表皮细胞生长因子(hEGF)病毒表达载体,为实现h EGF在烟草中瞬时表达提供理论和实验依据。PCR扩增获得hEGF基因,将其连接到马铃薯病毒表达载体pGR107上,利用农杆菌介导法感染烟草叶片,对其进行转录水平和翻译水平检测。根据GFP的表达确定收获hEGF时间为病毒侵染叶片后第7天;RT-PCR检测的结果表明hEGF基因在转录水平有表达;Western blotting、ELISA和MTT结果表明感染烟草叶片中有hEGF蛋白表达,表达量为总可溶蛋白的0.0103%,且具有生物活性。