11种兰属植物DNA的提取及RAPD-PCR实验体系的建立与优化

采用改进的CTAB-DNA提取方法，从11种兰属植物的嫩叶中提取总DNA。所得的DNA样品的A260／A280值在1．7～1．9之间，琼脂糖凝胶上主带清晰，较少降解，样品纯度高，DNA量大。另外，对影响RAPD-PCR的Mg^2＋、dNTPs、Taq酶、引物浓度等因素进行了优化。确定优化的反应体系为：75ng模板DNA，1×Buffer，2．5mmol／LMg^2＋，0．15mmol／LdNTPs，0．75UTaq酶，引物浓度0．4μmol／L，反应总体积为25山。该体系在20个供试兰属实验材料中获得较好的扩增结果。     

贵州野生半夏资源遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR标记对来自贵州省及周边省区的60份野生半夏(Pinellia ternate(Thunb.)Breit.)遗传多样性进行分析.从100条引物中筛选出16条多态性丰富,条带清晰的引物,共扩增出150条谱带,其中119条显示多态性,总多态百分率为79.33%,平均每个引物能扩增出9.4条;贵州省不同样品间的遗传差异性较大,多态百分率为38.0%～60.3%.高于55%的样品占全部贵州省样品的2/5,分布于全省各个地州市;样品间相似系数分布在0.63～0.93之间.UPGMA法将60份样品分为6类,样品的聚类存在一定的地域性.     

贵州苹果砧木资源亲缘关系的ISSR分析 

利用ISSR标记,对原产于贵州的10份苹果砧木种质及5份外来资源进行亲缘关系分析。结果表明:采用筛选出的10条引物,共扩增出75条重复性好的谱带,其中67条(占89.3%)具有多态性;应用引物827、M05、M08可以有效区分出15份种质资源,构建其DNA的ISSR指纹图谱;聚类分析表明,供试种质间的遗传相似系数在0.49～0.93之间,贵州威宁苹果砧木资源遗传多样性较为丰富,ISSR分析结果与已知苹果砧木间的谱系较为一致。     

16份野生半夏的遗传多样性分析

为了对半夏种质的鉴定、新品种选育及资源保护提供科学依据,采用形态学性状及ISSR标记,对来自贵州半夏主产区和其他省份的16份野生半夏种质进行了遗传多样性评价。结果表明,筛选出的16条引物共扩增出清晰、重复性好的谱带128条,其中98条为多态性谱带,多态性比率为76.6%;不同样品间的遗传差异性较大,形态学遗传距离变化范围在2.06～9.09,采用UPGMA法可以将16份样品聚为3类;ISSR遗传距离变化范围在0.14～0.53,以0.32为阈值可以将供试样品分为3类。结论:样品的聚类与形态特征密切相关,所选用的形态学性状在半夏资源评价中具有合理性。     

贵州12种兰属植物资源形态学和RAPD标记的比较分析

采用35个形态学形状和272个RAPD标记,对贵州12种兰属植物的亲缘关系进行研究。结果表明,引物s13,s26及S139扩增的谱带多、清晰、多态性明显,它们单独及结合使用,能有效地将所有供试种类区分开来。尽管这两种标记系统进行亲缘关系分析时,存在一定的差异性,但仍具有很大的同一性,经相关性检测,二者呈极显著相关。形态学形状分析显示,莲瓣兰及春剑与菅草兰的亲缘关系高度同源,这一结果得到RAPD分析的有力支持。因此,莲瓣兰及春剑应为菅草兰的变种,而不应归为新种。     

贵州4种刺梨的比较形态解剖学研究

通过对贵州４种刺梨比较形态解剖学的研究，表明：４种刺梨营养器官形态解剖结构基本相似；重瓣刺梨的花托及托附杯呈浅杯状，其余３种刺梨均呈壶状，重瓣刺梨雄蕊大中全部花瓣化，有的外缘的改皮也逐渐转变成花瓣。     

除草膜防除烟地杂草试验初报

烟地杂草因其且种类多,生长快,直接与烟叶争水肥,严重影响烟叶的产质量,因此,防除烟地杂草十分重要.近年来,用绿色除草塑料薄膜(简称除草膜,下同)新技术防除玉米、蔬菜等作物地的杂草取得较好防效.但用于防除烟地杂草未见报道.1999年,笔者采用除草膜新技术对烟地杂草进行防除试验研究,防效显著,现报告如下.     

50%敌草胺可湿性粉剂防除烟地杂草试验

通过喷施50%敌草胺可湿性粉剂覆盖农膜防除烤烟地杂草试验。结果表明，不同处理的除草剂对烤烟地一年生禾本科杂草的防效很好，对双子叶杂草稍差，30d、60d调查，总防除效果在87.4%-93.8%。其中对禾本科杂草防效为83.8%-97.3%，对双子叶杂草的防效为40.2%-71.2%。用50%敌草胺可湿性粉剂除草剂盖地膜防除烟地杂草对烤烟不造成药害，生长安全，无不良影响。     

不同除草剂防除烤烟苗床杂草的药效比较试验

用50％敌草胺WP、96％金都尔、48％氟乐灵、50％除草通4种除草剂对烤烟苗床杂草进行除草试验。播种40d后调查结果为：4种除草剂对单子叶杂草的防效分别为93．01％，84．79％、94．62％，86．02％，对双子叶杂草防效分别为86．36％、78．18％、92．72％、67．27％。经方差证明，4种除草剂之间差异并不显著，与对照相比，差异达显著水平。     

50％敌草胺可湿性粉剂防除烟地杂草的效果

烤烟是贵州省的主要经济作物之一,其在生长期中常受到杂草的危害,造成烟产量损失达 12.3%以上.由于烤烟的特殊性,目前用于防除烤烟地杂草的除草剂甚少.敌草胺除草剂在烟地应用防除烟地杂草的报道尚少.目前仅陈爱东等、陈乾锦等、白万明等用该剂分别在山东、湖南、福建烟地做防除烟地杂草的试验,除草效果显著,达 80%～95%以上,以防除禾本科杂草效果更突出[4～6].该剂于2001年已被中国烟草总公司推荐作为全国烟地使用的除草剂品种[7].为探索新型除草剂--50%敌草胺可湿性粉剂对烟地杂草的防效,笔者于2000年5月在都匀市烟草公司烤烟基地开展了除草试验,收到良好效果.