狍鹿ANXA-2基因编码序列的克隆及序列分析

首次从狍鹿鹿茸组织中成功克隆出包含膜联蛋白A2(ANXA-2)基因全部编码区的c DNA序列。通过生物信息学软件分析表明,该基因的开放阅读框共包含1 020个碱基,编码339个氨基酸,编码蛋白质的相对分子质量为38 612.09,理论等电点为7.224。蛋白保守区预测表明,该基因的蛋白保守区共有4个Annexin结构域。同源比对表明:ANXA-2基因与梅花鹿、马鹿、牛的CDS区的同源性分别为98%、98%和96%。用Mega5.0软件进行物种间遗传距离计算,结果表明该基因与蟾、原鸡的遗传距离最远,与梅花鹿、牛、羊的遗传距离最近。     

鹿茸粉及鹿茸醇提物对小鼠药物性肝损伤的作用

扑热息痛(APAP)是应用广泛的解热镇痛药物,正常治疗剂量非常安全,但如果长期低剂量或1次性过量使用可造成严重的肝损害,其肝毒性主要与毒性代谢产物N-乙酰-P-苯醌亚胺的堆积有关[1].     

鹿茸对小鼠酒精急性肝损伤保护作用的显微及超微结构分析

利用乙醇复制小鼠急性肝损伤模型,将平均体质量为(20±1)g的60只雄性小鼠随机分为空白组、模型组、鹿茸醇提物高剂量组、鹿茸醇提物低剂量组、鹿茸粉组和联苯双酯组,制作肝组织的病理切片及电镜超薄切片,观察肝组织的病理改变及肝细胞的超微结构改变。结果显示:各治疗组肝损伤情况均有不同程度的改善,发生肝细胞坏死的动物例数减少,病变程度减轻。电镜检测结果表明:鹿茸能改善染色质边集、内质网扩张、线粒体肿胀、细胞质膜受损等病理改变。鹿茸对小鼠酒精急性肝损伤有明显的保护作用。     

马鹿精子形态与超微结构研究

文中对马鹿(Cervus elaphus)精子形态与超微结构进行了研究。马鹿精子经固定、脱水、置换、包埋和聚合,用超薄切片机切片,再用醋酸双氧铀、柠檬酸铅染片,最后于透射电镜下观察其超微结构的变化。观察结果表明:马鹿精子全长(58.75±2.35)μm,由头部(8.93±0.24)μm、颈部(1.00±0.16)μm和尾部(48.18±1.18)μm三部分组成;头部呈扁卵圆状,绝大部分被浓缩且电子密度较高的精核所占据,顶体似帽状扣在精核之上,约占头部的2/3,其前部较为膨大;颈部位于头部和尾部之间,这个区域较短;尾部可分为中段、主段和终段。马鹿尾部轴丝的结构类型为"9+2";微管结构类型为"9+9+2"。     

鹿茸不同生长期MALAT1基因的差异表达

以不同生长期的鹿茸尖端组织为材料,采用mRNA差异显示技术检测不同生长期鹿茸尖端间充质组织的差异表达基因。对其中一条差异表达片段进行克隆测序分析,得到400 bp左右的片段,与野猪的非编码基因MALAT1有高度同源性,同源性为90%。进一步实时荧光定量RT-PCR鉴定发现,该基因在鹿茸生长发育的前期和中期表达量高于后期,该基因在鹿茸快速生长期的上调表达暗示其在鹿茸生长发育过程中发挥作用,是鹿茸生长发育相关基因的候选基因。     

四种禽类Sox8基因部分cDNA序列的克隆及其序列分析

应用RT—PCR法扩增了鸭、孔雀、榛鸡和鹧鸪的Sox8基因的部分cDNA序列并测序，计算机模拟预测了其氨基酸序列，并将所得的序列与GenBank上发表的家鸡的相应序列进行同源性比较。结果表明：5个物种的核苷酸序列同源性可达96％以上。。     

东北狍PDGFA基因cDNA克隆及表达分析

为了研究血小板衍生生长因子A(PDGFA)基因在狍茸生长发育中的调控作用,试验采用分子克隆技术得到PDGFA基因全部编码区的cDNA序列并结合生物信息学方法进行分析。结果表明:获得的东北狍PDGFA基因cDNA长度为653 bp,其中包括594 bp的开放阅读框(ORF),编码197个氨基酸。PDGFA基因编码蛋白为不稳定蛋白,相对分子质量为22 259.65,等电点为8.53,具备信号肽,属于分泌性蛋白。蛋白质二级结构由α-螺旋、扩展链及无规则卷曲结构组成。通过构建系统进化树发现,狍与白尾鹿亲缘关系最近,与野牦牛、水牛、野猪、绵羊的亲缘关系较近,与原鸡、人、褐家鼠、斑马鱼的亲缘关系较远。实时荧光定量PCR分析显示,PDGFA基因在狍茸顶端组织不同组织层表达存在差异,其中前软骨层和软骨层的相对表达量显著高于皮肤层和间充质层(P0.05)。     

鹿茸粉对四氯化碳急性肝损伤的保护作用

利用四氯化碳构建小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理学形态,分析肝损伤程度.结果显示:鹿茸粉中、高剂量组与四氯化碳模型组相比ALT、AST水平显著降低(P<0.01),小剂量组差异不显著(P﹥0.05),中、高剂量组发生肝细胞坏死的动物例数减少,病变程度减轻.鹿茸粉对小鼠四氯化碳急性肝损伤有保护作用,且呈剂量依赖性.     

毛细管电泳概述及其在动物遗传育种中的应用

毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)是20世纪80年代中后期在全世界范围内迅速发展起来的一种分离分析技术,现已进入一个新的发展阶段,其发展速度之快,影响之大,足以和20世纪50年代末、60年代初的气相色谱(GC)或70年代初的液相色谱(HPLC)相比.CE因其分离效率高、分析速度快、样品用量少、抗污染能力强及易自动化等特点而被广泛应用于分子生物学、医学、药学、高分子等领域,特别是在生物分析及生命科学领域中已展示了诱人的应用前景[1].     

梅花鹿鹿茸组织Anxa-1基因cDNA克隆及表达

从梅花鹿(Cervus nippon)鹿茸间充质中成功克隆出包括膜联蛋白A1(Anxa-1)基因全部编码区的c DNA序列,并结合生物学信息方法及实时荧光定量技术对该基因的氨基酸序列及不同生长时期的表达情况进行了分析。结果表明:Anxa-1基因编码346个氨基酸。经生物学信息分析,该基因编码蛋白为稳定蛋白,不具备信号肽,相对分子质量为38 830.4,理论等电点为6.17,一级结构中亮氨酸占最大比例(10.4%)。同源序列比对及系统进化树分析表明,梅花鹿Anxa-1氨基酸序列与藏羚羊(Pantholops hodgsonii)、绵羊(Ovis aries)、山羊(Capra hircus)和水牛(Bubalus bubalis)相似性较高。实时荧光定量RT-PCR分析表明,Anxa-1基因在不同生长时期鹿茸顶端间充质表达存在差异,生长前期的表达量高于中期与后期。