霍乱弧菌TcpA蛋白的表达及其免疫活性分析

采用PCR方法从鱼源霍乱弧菌Y1株（Vibrio cholerae Y1）扩增毒素共调菌毛蛋白A(toxin-corcgulated pilin A,TcpA)基因并克隆至pMD 18-T载体.序列分析显示tcpA基因ORF长675 bp,编码224个氨基酸(GenBank登录号EU649677).同源性比对发现,该基因与GenBank中登录的7个霍乱弧菌参考株相应基因序列的核苷酸同源性和氨基酸同源性均很高,分别为99.6％～ 99.7％和98.7％～ 99.1％,表明TcpA蛋白相当保守.将tcpA基因亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,并进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现分子量约为47.0 kD的重组TcpA融合蛋白主要以包涵体形式表达.Western blot检测结果显示,重组TcpA融合蛋白可与鼠抗Vc Y1菌株菌毛蛋白抗血清发生特异性结合反应.用纯化的重组TcpA融合蛋白免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)制备抗血清,双相免疫扩散试验检测抗体效价达1:16,且该抗血清能够明显抑制Vc Y1菌株对HEp-2细胞的黏附.草鱼免疫后第25天用Vc Y1菌株攻毒,结果相对免疫保护率达到73.33％.研究结果表明,组TcpA蛋白仍保留着天然菌毛蛋白的免疫原性、免疫反应性和免疫保护性,重组TcpA蛋白可作为霍乱弧菌的候选诊断抗原和疫苗抗原.     

我们是怎样搞好种子服务体系建设的

建立健全种子服务体系是加速新品种推广,搞好社会化服务,促进农业增产的物质和组织保证。内乡县种子公司自1988年以来,在各级政府及有关部门的支持下,投资220万元,完成了县种子公司迁建、4个分公司及13个供种站的服务体系基本建设任务,占16个乡(镇)的     

肾型传染性支气管炎病毒M基因的遗传分析及其在杆状病毒表达系统中的表达

对肾型鸡传染性支气管炎病毒分离株Ck/Jiangsu/DS10/2008株(DS10株)膜蛋白(M)基因进行扩增、克隆和序列测定,并与GenBank中的其它25株参考株的M基因进行比对分析并构建进化树,研究其遗传进化关系。另将M基因克隆至杆状病毒表达系统pFastBac1载体并转染Sf9昆虫细胞进行表达,经间接免疫荧光鉴定,用琼扩试验验证表达产物的反应性,以研究M基因表达产物的生物学活性。测序结果表明DS10的M基因全长为678bp,编码225个氨基酸。遗传进化分析表明,DS10病毒与其它不同致病型的传染性支气管炎病毒共属同一大分支。间接免疫荧光检测表明,M蛋白在Sf9细胞中得到表达,琼扩试验验证表达产物具有良好的反应性,以上结果表明所表达的M蛋白具有良好的生物学活性。本研究表达的M蛋白可为其生物学活性研究及其诊断抗原、新型疫苗开发提供基础材料。     

鸭源H5亚型禽流感全禽源分子标记疫苗候选株的构建

为了开发用于南方水禽且适合血清学监测的H5亚型禽流感疫苗,作者通过反向遗传技术,删除A/mallard/Huadong/S/2005(H5N1,S株)病毒HA编码多碱性氨基酸序列,使之成为低致病特征,分别与A/duck/England/1/1956(H11N6,E株)和A/Chicken/Shanghi/F/98(H9N2,F株)的NA组合,再以本室禽源高产病毒F株的6个内部片段为骨架,构建全部基因都来自禽流感的疫苗株.成功拯救出2株重组病毒,分别命名为rH5N6/F和rH5N2/F,并引入分子标记N6和N2.重组病毒在鸡胚和MDCK细胞上均具有较好的繁殖能力,且rH5N6/F更适合在鸡胚中生产,对SPF鸡和鸡胚无致病性.重组病毒在clade2.3.4毒株中具有很好的抗原代表性,引入的分子标记有利于血清学监测的区分,为防控水禽H5亚型禽流感提供了良好的疫苗候选株.     

鹅副黏病毒病发病情况调查及其诊断

鹅副黏病毒病是由禽Ⅰ型副黏病毒引起的急性病毒性传染病,根据B.Lomniczi等建立的基因分型方法,鹅源副黏病毒在基因分型上归属于鸡新城疫病毒基因Ⅶ型副黏病毒[1].国内自1997年发现该病以来,已在许多地区的鹅群中暴发流行,对养鹅业危害极大.笔者对合肥郊县鹅群的发病情况进行了调查,对其死因进行了确诊.……     

农产品加工业的现状与发展

本文在对中国农产品加工业的现状进行了分析的基础上，提出了加快发展中国农产品加工业的具体要求及应采取的措施。     

猪附红细胞体病的诊断与防治

猪附红细胞体病是1928年首先在啮齿动物发现的一种血液寄生虫病,能感染多种动物和人.世界各地,特别是近几年,从仔猪到怀孕母猪均有猪附红细胞体病发生的大量报道.我国自1982年后相继有部分省份发现该病,近年还在陕、甘、宁调查发现人群感染也相当普遍.今年夏天,我市某县该病大量流行,造成巨大的经济损失.现将该病的有关情况介绍如下,希引起广大养猪户的关注.     

鸭传染性浆膜炎的诊治

鸭传染性浆膜炎 (也叫鸭疫里氏杆菌病 ) ,是鸭、火鸡、鹅等多种禽类的一种接触性传染病。该病以绿色下痢、神经失调等为主要症状 ,以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎为典型病变。我国于1 982年有报道本病的发生 ,目前各养鸭省区均有发生。鸭群一旦感染本病 ,在其群体内发病率和死亡率均较高 ,往往造成极大的经济损失。1　发病情况2 0 0 1年 5月中旬 ,苏北某个体户从江苏六合购进樱桃谷肉鸭 1 65 0只。饲养至 1 4日龄时 ,开始有鸭发病 ,表现精神呆滞、下痢、食欲不佳。两天后有病鸭开始死亡。发病率 30 % ,死亡率达 45 %。2　临床症状多数病…     

对麻鸭不同致病力H5N1亚型禽流感病毒的鉴定

禽流感病毒（avain influenza virus,AIV）根据其HA和NA蛋白分为不同亚型,目前16种HA亚型和9种NA亚型均已从水禽中分离到。2002年之前的研究表明,H5N1亚型AIV对水禽不致病,在宿主体内呈相对稳定的“静止”状态进化。自2002年香港首次出现大量野生水禽和家养水禽感染H5N1亚型AIV后,相关报道越来越多。以上均提示,高致病性H5N1亚型AIV对水禽的致病力已经明显增强。