猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立

在最佳条件下,通过对重组质粒pGEX-6P-N进行诱导表达,并利用Glutathione Sepharose 4B亲和吸附柱对表达产物（重组N蛋白）进行纯化。用重组N蛋白作为包被抗原,通过对相关条件进行优化（如抗原包被量,血清稀释度,酶标二抗最佳工作浓度,底物作用时间等）,确定判定标准,最终初步建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。用建立的间接ELISA方法检测360份血清样品,并与IDEXX公司研制的ELISA试剂盒检测的结果相比较,批内重复性试验变异系数均值为1.52%,批间变异系数为6.17%,符合率达92.5%,试验表明,建立的间接ELISA检测方法具有良好的重复性和特异性,可用于PRRSV血清抗体的检测。     

猪圆环病毒Ⅱ型ORF1基因的克隆与原核表达

根据GenBank中猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2) ORF1基因序列,设计合成了一对引物,扩增出PCV2新疆株ORF1基因片段.将扩增出的ORF1基因(945 bp)插入到pMD18-T载体中,筛选获得重组质粒,命名为pMD18-ORF1.将ORFI酶切产物亚克隆到原核表达载体pET-32a中,获得重组质粒,命名为pET-...     

新疆乌鲁木齐市犬绦虫感染状况调查

为了解乌鲁木齐市的犬绦虫感染情况,对2012—2015年在乌鲁木齐市8个区(县)采集的17 710份散养犬粪便,采用直接涂片法和漂浮法进行检查,对绦虫卵进行计数,统计感染率。结果共检出阳性样品1 870份,感染率为10.56%;半农半牧型区县的犬绦虫感染情况较主城区区县严重;4年内各区县的犬绦虫感染率整体呈下降趋势。建议各区县落实"犬犬驱虫,月月投药"策略,加强对城市流浪犬的管理。     

绵羊副结核病的病原学检测与分析

[目的]确诊一例疑似绵羊副结核分枝杆菌感染的病原学特征.[方法]将送检病料(肠系膜淋巴结)涂片、抗酸染色后进行显微镜观察;同时,提取肠系膜淋巴结组织DNA,采用PCR扩增副结核分支杆菌的IS900基因及亚型分型基因,并进行序列测定与分析.[结果]组织涂片染色镜检后可见抗酸染色阳性菌株;IS900基因及亚型分型基因的检测和序列分析结果表明,目标菌株为Ⅱ型(牛型)副结核分支杆菌.[结论]采用镜检及分子检测等手段确定从所送检绵羊肠系膜淋巴结组织为Ⅱ型(牛型)副结核分支杆菌感染样本.     

浙江丽水市农作物种业发展现状及对策探究

通过调研全面了解了浙江省丽水市农作物种业发展现状,对农作物种业发展成效进行总结,分析种业发展存在的 5个方面不足,研究提出了强化人才支撑、强化杂交水稻制种基地建设、推动种苗产业健康发展、做好农作物种质资源保护利用、加强政策扶持等具体措施,助推丽水市农作物种业高质量发展。     

PRRSV新疆株N基因的克隆及原核表达

根据GenBank上已发表的毒株,设计了一对引物扩增PRRSV新疆株N基因片段;将N基因克隆到pMD18-T,在亚克隆到pGEX-6p-1原核表达载体上,构建重组质粒pGEX-6p-N;在37℃条件下,经终浓度为1mmol／L的IPTG诱导表达4h后,获得了可溶性融合蛋白;经SDS-PAGE电泳检测和Western blotting分析,该融合蛋白分子量约为39kDa,与预期结果一致,并能与PRRSV阳性血清发生特异性反应,且非特异性背景很低。     

甬优9号在山区种植表现及栽培技术

2016年,引进甬优9号在浙江省丽水市景宁畲族自治县山区作单季晚稻试种,两年三地平均每667m~2产量在600~750kg之间。总结甬优9号在景宁县山区作单季稻多点种植的田间表现和主要栽培技术。     

牛病毒性腹泻病毒E0基因原核表达载体的构建及表达

采用RT-PCR方法,利用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)C24V株接种MDBK细胞,提取病毒RNA,扩增出BVDV-E0基因,将所得片段与pET-28a表达载体连接,转化至BL-21大肠杆菌中,筛选阳性克隆,鉴定后证明pET-28a-E0原核表达载体构建成功。经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定,鉴定结果表明,目的蛋白在大肠杆菌中得以表达。     

新疆乌鲁木齐市基层兽医实验室检测能力比对

为了解新疆乌鲁木齐市目前的基层兽医实验室检测能力,利用样品比对方法,对辖区内8个区县实验室进行了布鲁氏菌病虎红平板凝集试验、布鲁氏菌病试管凝集试验,以及H5亚型禽流感、猪瘟、口蹄疫抗体检测等5个比对项目考核。结果显示,上述5个比对项目的样品检测符合率分别为100.0%、80.7%、86.2%、88.3%和88.4%,平均符合率为88.0%。比对结果表明,新疆乌鲁木齐市基层兽医实验室已基本掌握了常用的动物疫病血清学检测技术,其中对布鲁氏菌病虎红平板凝集试验检测技术掌握较好,而对其他4个比对项目,尤其是布鲁氏菌病试管凝集试验检测技术,还需进一步提高检测水平。比对发现,2012—2015年的样品检测符合率均在90%以上,而在2016和2017年分别降至76.4%和84.9%,表明乌鲁木齐市基层兽医实验室检测水平还不稳定。这可能是实验室技术人员减少,且岗位不固定引起的。为此,应进一步加强基层实验室专项技能培训,稳固与提升基层兽医实验室检测能力。     

猪蓝耳病和猪Ⅱ型圆环病毒病感染的荧光PCR检测报告

笔者从乌鲁木齐市动物疾控中心门诊接诊的猪病病例中随机挑取了10份病料,根据畜主叙述的临床症状及病理剖解变化,采用实时荧光PCR方法对病料样品进行了猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)与猪细小病毒(PPV)的检测.结果显示,样品中PRRSV阳性率60%,PCV2阳性率80%,CSFV与PPV全为阴性,猪蓝耳病(PRRS)和猪Ⅱ型圆环病毒病(PCVD)混合感染率60%,本试验为乌鲁木齐市猪病的防控提供了科学依据.