P277多肽的表达、纯化及初步药效学分析

通过PCR方法得到P277多肽基因,插入到含门冬酰胺酶C端第199~326氨基酸残基片段的后面,形成融合蛋白,中间预留酸水解位点,并在P277多肽和融合蛋白之间加入一段碱性序列,构建pET28AnsB-C-KR-P277高效表达载体。克隆的基因在大肠杆菌中高效表达,通过Triton X-100洗涤、乙醇分级沉淀纯化融合蛋白AnsB-C-KR-P277,酸水解后经等电点沉淀去除杂蛋白,再经阴离子交换柱层析,进一步分子筛脱盐,可得到纯化的目的多肽P277。这种多肽生产平台,为多肽生物合成提供了一个很好的方法。纯化后的P277免疫型糖尿病模型动物NOD(non-obese diabetic)小鼠,可明显降低NOD小鼠自发性糖尿病的产生。     

江苏吴县东山红桔3种疫霉病菌生物学研究

江苏吴县东山红桔３种疫霉病菌生物学研究刘景晶，殷恭毅（南京农业大学植物保护学系．南京２１００１４）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＢＩＯＬＯＧＹＯＦＴＨＲＥＥＰＨＹＴＯＰＨＴＨＯＲＡＳＰＥＣＩＥＳＩＮＦＥＣＴＩＮＧＣＩＴＲＵＳＴＲＥＥＳＩＮＤＯＮＧＳＨＡＮ，ＷＵＸ...     

牛乳铁蛋白抗菌肽(Lactoferricin)基因的克隆与表达质粒构建

按大肠杆菌偏爱密码子设计了牛乳铁蛋白肽的3段引物序列,通过PCR合成BeL1-2-3,经双酶切后克隆入pED质粒的BamHⅠ和HindⅢ位点之间,构建出牛乳铁蛋白肽的表达载体,转化至E.coliBL-2(1 DE3),获得牛的乳铁蛋白肽基因克隆菌。该克隆菌经诱导后,可表达出可观的融合蛋白,且表达量与诱导时间呈一定相关性。