牛病毒性腹泻病活疫苗BVDV2/JZ05-1株毒力返强试验

研究了BVDV2/JZ05-1株免疫犊牛后是否会出现毒力返强现象.以病毒含量为10-7.26 TCID50/mL的BVDV2/JZ05-1活疫苗滴鼻免疫犊牛(4mL/头),通过疫苗回滴,连续临床观察,采集抗凝血和鼻拭子,对淋巴细胞数量变化进行分析,并从淋巴细胞和鼻拭子中分离病毒.结果表明,BVDV活疫苗BVDV2/JZ05-1株免疫犊牛没有出现BVDV感染的临床症状,淋巴细胞数量正常,鼻拭子和淋巴细胞病毒分离阴性.可见,该毒株对犊牛免疫没有出现毒力返强的现象.     

广东省农业风险投资中介服务问题与对策

为了了解广东省农业风险投资中介机构存在的问题,特进行了访谈和实地调研。调研结果表明,广东省农业风险投资机构存在信息平台建设不完善、服务方式僵化、专业中介服务机构相对缺乏、风险投资机构人才匮乏等问题,并针对存在的问题,提出了促进风险投资中介机构发展的对策。主要包括：加强专业队伍建设,创新服务方式,建立信用平台等。     

重组hIL-2表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达

本试验根据hIL-2氨基酸序列、三维结构及其与受体IL-2R结合机制,设计并合成IL-2Rα亚基结合位点修饰性hIL-2基因片段。合成的修饰性hIL-2基因序列被插入真核表达载体pPIC9K,并转化入毕赤酵母基因组中。经筛选得到阳性重组子后,通过诱导培养得到了表达产物。对表达产物进行Elisa初步测定,结果成功表达出重组hIL-2,表达水平达0.93g/L。本项研究为进一步开展IL-2Rα结合位点修饰性hIL-2的生物活性研究奠定了基础。     

水貂阿留申病基因工程诊断抗原的制备

本研究旨在建立一种生产水貂阿留申病(Aleutian disease,AD)诊断抗原的新方法。试验提取水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)的基因组,PCR扩增ADV核衣壳蛋白VP2基因,构建重组表达质粒Bacmid-VP2,脂质体介导其转染昆虫细胞Sf9获得重组杆状病毒AcMVPV-VP2。电镜下观察表达的VP2蛋白,Western blotting检测目的蛋白的反应原性。以传统接毒方法生产的AD诊断抗原作对照,通过对流免疫电泳试验检测表达蛋白的生物学活性。结果表明,表达的重组VP2蛋白在电镜下组装成病毒样颗粒且能与ADV阳性血清发生反应。与商业诊断抗原相比,重组抗原诊断AD的阴阳性的符合率为100%。该方法可成为生产AD诊断抗原的替代方法。     

低氮胁迫下黄瓜钙依赖蛋白激酶基因的克隆及表达分析

在低氮胁迫下，以黄瓜品种津研4 号叶片为供试材料，以cDNA 为模板，依据黄瓜基因组数
据库中Csa002986 基因编码区全序列，应用Primer Premier 5.0 软件设计引物，克隆得到黄瓜钙依赖蛋白
激酶基因（calcium-dependent protein kinase，CDPK）。该基因全长1 584 bp，编码527 个氨基酸。预测
该基因编码的蛋白是一个稳定的亲水蛋白，无跨膜结构，无信号肽，存在蛋白激酶结合区、EF 手型钙结
合区、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性位点、N 酰基化位点等多个位点。CDPK 基因在不同氮浓度处理下黄瓜
各部位表达分析结果显示，在无氮条件下，CDPK 基因在茎尖表达量最高，其次为叶和茎；在低氮条件下，
CDPK 基因在茎中表达量最高，其次为茎尖和叶；在正常及高氮条件下，CDPK 基因在茎尖表达量最高，
其次为茎和叶。CDPK 基因在叶中的表达模式分析结果显示，在无氮及低氮胁迫下CDPK 基因表达量增加，
随着氮浓度的降低，CDPK 基因的表达量增加并明显高于对照；在高氮胁迫条件下，CDPK 基因的表达量
低于对照。     

味喃丹防治花生根结线虫病试验

花生根结线虫病今年在我县属首次发现.据调查,该病为害花生影响产量较大.为探索呋喃丹防治花生根结线虫病的效果以及对花生生长、产量的影响.我站按区植保总站下达的试验方案在山口镇圩仔坡村委林.明剑农户的秋花生地实施本试验.现将试验总结于下.     

珠海，在氧吧里呼吸

凡到过珠海的人都会发出同样的感叹:环境优美,四季如春,城市整洁,空气清新,城海相连,山城相依,是最适合人类居住的城市。不愧为南海绿色明珠、绿色氧吧、滨海森林生态城市。珠海市位于广东省南部,珠江出海口西岸,濒临南海。东隔珠江与深圳、香港相望,南与澳门陆路相通,西邻新会     

IL-2Rα结合位点修饰型OviIL-2在毕赤酵母中的表达与鉴定

IL-2主要由激活后的T细胞产生,是一种天然的免疫增强剂,临床应用广泛。之前构建了适用于毕赤酵母表达系统的重组绵羊IL-2的真核表达载体pPIC9K-roIL2。本研究在此基础上使用pPIC9K-roIL2转化毕赤酵母GS115,筛选得到阳性克隆,命名为GS115-roIL2并经过摇瓶培养和诱导表达得到表达产物。通过SDS-PAGE进行初步鉴定,证明成功表达出了roIL-2。本研究为下一步roviIL-2免疫机理研究奠定了基础。     

细菌菌落计数培养基TTC浓度的筛选研究

以细菌菌落计数方法,研究大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌在不同2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)浓度的平板计数琼脂上菌落形态和数量的变化情况。结果表明,3种菌在TTC终浓度≥0.0008%时,菌落颜色比较明显,逐渐加深;大肠埃希菌在TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,TTC终浓度≥0.02%菌落数量明显减少;金黄色葡萄球菌在TTC终浓度≤0.004%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在0.04%TTC平板计数琼脂上不能生长;鼠伤寒沙门氏菌TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在TTC终浓度≥0.02%的平板计数琼脂上菌落数量减少。不同浓度的TTC对鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌的生长影响较小,对金黄色葡萄球菌影响较大,故在食品(或饲料)细菌总数检测中,TTC的终浓度应选在0.0008%~0.004%之间。     

水貂肠炎病毒NS1基因进化分析

采用PCR方法,从辽宁省、吉林省、山东省、河北省采集的32份样品中检测出21份水貂肠炎病毒感染阳性样品。每个地区选取有代表性的样品共计11份进行NS1基因的克隆和测序,并与已知参考毒株进行比对及系统发育分析。结果显示,本次检测的11个阳性样品的核苷酸序列和氨基酸序列同源性为98.8%~100.0%和98.5%~100%;本次测序序列和国内毒株MEVB基因的核苷酸和氨基酸序列同源性为98.7%~99.9%和98.7%~99.9%;与国外毒株MEVAbashiri基因的核苷酸和氨基酸序列同源性为99.0%~99.5%和98.7%~99.1%。11份阳性样品中水貂肠炎病毒的NS1基因有24个氨基酸位点存在变异。11份阳性样品可划分为3个分支。