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【目的】炭角菌属具有珍贵的药用价值和较高的经济价值。本研究对采自白蚁废弃巢穴上的炭角菌菌株进行鉴定,对其液体发酵和固体培养条件进行优化,并对液体发酵产物抗菌、抗氧化活性进行测定,以期为痂状炭角菌的开发利用提供参考。【方法】通过形态观察及ITS序列测序对炭角菌进行鉴定;探讨液体发酵中添加不同碳源、氮源和金属离子对痂状炭角菌菌丝体生长的影响;分析固体培养基中添加氨基酸对无性子座生长的影响;利用平板抑菌法和DPPH法对液体发酵产物抗菌和抗氧化活性进行测定。【结果】采集菌株经形态鉴定和分子鉴定,为痂状炭角菌。液体发酵最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为蚕蛹粉,最佳无机盐为MgSO4。正交试验筛选的最佳液体培养基组成为可溶性淀粉4%(w)+蚕蛹粉0.6%(w)+MgSO4 0.06%(w)。固体培养基中添加缬氨酸、异亮氨酸和苏氨酸均能显著促进无性子座的生长。液体发酵产物抗菌效果显著优于山梨酸钾,对DPPH的抗氧化活性为(75.19±2.08)%,显著优于维生素E。【结论】优化的液体发酵和固体培养条件可以显著提高痂状炭角菌菌丝体产量,促进无性子座生长。痂状炭... 相似文献
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采用阳离子交换层析、RP-FPLC及RP-HPLC分离纯化技术,从细菌诱导的桔小实蝇蛹中分离鉴定出桔小实蝇抗菌肽Bactrocerin-1的同系物Bactrocerin-2。结果表明:Bactrocerin-2含有20个氨基酸残基,分子量为2 311.51 u,序列为VTKTWIKVIRGIGKSKIKWA;并且Bactrocerin-2与Bactrocerin-1的相似性极高,氨基酸同源性达到90%;该肽与鞘翅目Coleoptericin C-末端的20个氨基酸也具有较高的相似性。氨基酸组成分析结果表明,该肽是一种疏水、带正电荷的抗菌肽。该研究将有助于对昆虫天然免疫反应的认知,并为设计有效的抗菌分子奠定基础。 相似文献
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家蝇生境中充满病原菌,其有效的防防机制成为研究的热点。通过三氟乙酸缓冲液浸提、热处理、固相萃取以及两次RP-HPLC等方法,从混合细菌液诱导的家蝇蛹中分离纯化出4种具有抗菌活性的物质。结果表明,提取的家蝇蛹粗提液抗菌谱较广,对多种微生物具有不同程度的抗菌作用,且抗菌效果好于天然肽类防腐剂和一些化学防腐保鲜剂。4种抗菌物质中包括3个抗菌肽和1个抗菌化合物。Tricine-SDS-PAGE结果显示3个抗菌肽的分子量分别约为12kDa、8kDa和4kDa。本研究表明细菌诱导家蝇蛹中具有丰富的抗菌物质。 相似文献
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为深入研究昆虫病原真菌蝉拟青霉疏水蛋白PChyd基因的功能,根据蝉拟青霉基因组信息克隆疏水蛋白PChyd基因,对该基因序列进行生物信息学分析,使用qRT-PCR技术对其在不同培养条件或阶段下的表达模式进行分析,并通过酶切酶连的方法构建了该基因的敲除载体。结果表明:PChyd基因的开放阅读框序列全长303 bp,编码100 aa,包含22 aa的信号肽序列和70 aa疏水蛋白功能区域。系统发育分析显示该基因与粗糙虫草菌亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示PChyd基因在PDA培养的菌丝体、诱导的附着胞、诱导的芽生孢子中表达量显著高于另外2个样品,其中芽生孢子表达量最高,暗示该基因在蝉拟青霉侵染初期和在昆虫血腔中定殖阶段可能具有重要作用。凝胶电泳结果表明,成功构建了该基因的敲除载体,扩增出含有上臂、HPH、下臂的3356 bp左右的片段。本研究为进一步探究蝉拟青霉疏水蛋白PChyd基因的致病机理、生防工程菌的改造奠定了基础。 相似文献
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为探讨小菜蛾Plutella xylostella对病原真菌入侵的免疫防御机制,利用抑制消减杂交技术构建蝉拟青霉Paecilomyces cicadae侵染的小菜蛾幼虫的抑制性差减文库,并对文库进行鉴定。ESTs序列聚类分析共获得412个独立基因。通过同源比对,28.24%ESTs为未知功能基因,71.76%ESTs与已知功能基因序列相似,包括免疫相关、金属离子结合和加工、核酸和蛋白代谢及加工、细胞信号、细胞结构、形状和流动、能量代谢、胁迫和解毒以及其它基因。鉴定出39个可能参与小菜蛾免疫蝉拟青霉侵染的免疫基因,包括:识别分子、蛋白酶及蛋白酶抑制剂、效应因子及其它免疫基因。qRT-PCR结果表明肽聚糖识别蛋白、器官芽生长因子、葛佬素、溶菌酶、酚氧化酶原激活蛋白酶3以及转铁蛋白基因均可诱导表达。免疫相关基因在不同微生物诱导下的表达模式存在不同。结果表明当病原真菌蝉拟青霉侵染寄主小菜蛾后,小菜蛾体内发生了一系列的复杂反应,小菜蛾抵御病原真菌侵染是一个多途径共同作用的复杂过程。该研究为进一步研究小菜蛾抵御病原真菌入侵的分子机制提供基础信息。 相似文献
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为了制备茶叶抗菌肽粗提物并将其应用在冷却肉保鲜上,以龙井茶叶为材料提取茶叶抗菌肽粗提物,采用平板抑菌法检测茶叶抗菌肽粗提物的抑菌活性,通过细胞膜渗透率、磷离子泄漏、DNA结合和透射电子显微镜等指标分析茶叶抗菌肽粗提物对细菌的作用机制,通过微生物菌落数量和pH值两个指标评价茶叶抗菌肽粗提物对冷却肉的防腐保鲜效果。结果表明:提取的茶叶抗菌肽粗提物主要包括分子量小于18.4 ku的多肽,其对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均具有抑菌活性,可造成细菌细胞膜渗透率增强,引起细菌细胞外磷离子浓度增加,造成细菌细胞膜不完整、出现破损,但不与细菌基因组DNA结合。茶叶抗菌肽粗提物可以显著抑制冷却肉中微生物的生长,延缓pH值上升,延长保鲜时间,对冷却肉具有防腐保鲜作用,具有较高的开发利用价值。 相似文献