基于微流控芯片电泳的番茄黄化曲叶病毒快速检测

【目的】探索微流控芯片电泳方法在PCR产物检测方面的效果,并建立针对番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV）的微流控芯片电泳检测方法,弥补琼脂糖凝胶电泳方法在试剂消耗、所用时间、安全性方面的缺陷。【方法】通过对TYLCV的基因组进行分析后,在该基因组中相对稳定的位置设计引物,同时兼顾引用已被研究者研究过的引物,对这些选择的引物进行特异性、稳定性、灵敏度等方面的验证,筛选出用于后续试验的引物。选择DNA标准物φX174/BsuR I(Hae Ⅲ) marker,分别进行琼脂糖凝胶电泳和微流控芯片电泳,对二者在耗材、耗时和灵敏度方面进行比较,确定微流控芯片电泳在核酸检测方面的应用价值。利用筛选出的其中1对引物对番茄叶片的实际样品进行PCR扩增,随后通过微流控芯片电泳对其进行检测,以此探讨微流控芯片电泳在病毒检测方面的检测效果。【结果】共筛选出14对TYLCV备用引物,其中2对引自文献,12对为本文设计,每对引物均可满足微流控芯片检测要求。选择其中1对引物TYLCV-T作为随后的研究对象。利用琼脂糖凝胶电泳和微流控芯片电泳对DNA标准物检测,结果表明微流控芯片电泳在耗时方面不足琼脂糖凝胶电泳的1/10,约为13 min,试剂消耗为琼脂糖凝胶电泳的1/8,检测灵敏度方面至少比琼脂糖凝胶电泳高103倍,根据DNA标准物原液浓度计算可知,微流控芯片电泳至少可准确检测到浓度为5×10-6 μg?μL-1的核酸样品。利用微流控芯片电泳对TYLCV-T扩增的TYLCV PCR产物进行检测,将检测峰值图与DNA标准物的峰值图时间比较,就可判断出产物峰的大小范围。【结论】筛选出的关于TYLCV的备用引物可作为进一步研究微流控芯片技术在该病毒检测方面的基础;通过将琼脂糖凝胶电泳和微流控芯片电泳进行比较,确立了后者在核酸检测方面的应用价值;通过微流控芯片电泳对TYLCV PCR产物的检测,建立了基于微流控芯片电泳的TYLCV快速检测方法,为TYLCV的快速检测提供新的技术支持。     

农作物秸秆用于养猪业关键技术研究与示范

为探讨现代养殖业与种植业的可持续发展模式,促进农牧结合、发展循环经济,武宣县大力推进畜禽养殖粪污和农业废弃物资源化利用,通过益生菌发酵技术把种植业和畜牧业有效结合,种养循环、互利互补,将大面积的废弃农作物茎秆、叶片等和养猪产生的粪污发酵后利用,使农作物养分循环到田间,进行生态修复与环境保护。推广生猪养殖粪污处理异位发酵床模式关键技术,对其进行综合研究,可以为养殖业与种植业可持续发展提供技术支撑,因此该研究具有重要的研究和应用示范意义。     

微流控芯片技术研究概况及其应用进展

微流控芯片(microfluidics)技术是在芯片上对化学或生物样品进行操作和检测的一项新兴技术,具有样品体积小、检测效率高、使用成本低、易于和其他技术设备集成以及兼容性好等特点,有望发展为一种便携式检测装置。微流控芯片技术的应用性研究主要集中在医学上,在农业、食品方面还处于起步阶段。本文从微流控芯片相关概念和技术出发,对该技术及其在医学、农业和食品方面的应用进行综述,对其发展前景进行了展望。