酵母单杂交文库构建及巨峰葡萄VvFT基因启动子上游调控因子筛选

[目的]利用酵母单杂交文库筛选巨峰葡萄VvFT基因启动子上游调控因子,挖掘参与调控葡萄开花时间的因子,为揭示花期转变代谢通路和定向改良葡萄品种提供理论参考.[方法]利用PlantCARE分析预测VvFT基因启动子顺式作用元件,并以VvFT基因启动子为诱饵,利用酵母单杂交文库筛选技术,筛选作用在VvFT基因启动子上游的调控因子.[结果]葡萄VvFT基因启动子区域存在13种启动子顺式作用元件,包括A-box、CAAT-box和TATA-box组成型调控元件;光响应调控元件ATC-motif、Box 4、G-Box和GT1-motif;茉莉酸甲酯(MeJA)响应调控元件CGTCA-motif和TGACG-motif;干旱诱导的MYB结合位点元件MBS;玉米蛋白代谢必需的调控元件O2-site;参与生物钟控制的调控元件circadian;厌氧诱导必需调控元件ARE.以VvFT基因启动子为诱饵,筛选获得34条表达序列标签(EST),其中有21条为未知功能,有13条在植物生长、抗逆防御、信号转导、转录调控、蛋白酶等方面均有已知或预测的功能,包括转录抑制因子ft41、GRF1互作因子ft44、NAP1相关蛋白ft64及ft70分子伴侣DnaJ10.酵母单杂交点对点验证结果表明VvDnaJ10和VvFT基因启动子之间有相互作用.[结论]通过酵母单杂交文库筛选获取13条候选EST,虽然大部分EST功能预测分析结果与VvFT调控开花时间无明显的直接关系,但研究结果为进一步探索VvFT转录或表达水平控制葡萄开花时间的分子机制提供侯选基因.     

梨园常规施药与土壤重金属潜在污染风险评价

【目的】了解常规施药(每年8~10次)梨园土壤重金属污染程度。【方法】分别测定了北京平谷、大兴、密云、顺义、房山5个郊区46个常规施药梨园0~20 cm、20~40 cm和40~60 cm土层的镉(Cd)、铬(Cr)、铅(Pb)、砷(As)、汞(Hg)的含量,采用单因子和内梅罗综合(多因子)污染指数及单污染物与多污染物潜在生态风险指数对梨园土壤重金属潜在污染程度及风险进行分析和评价。【结果】各取样梨园的各土层Cd含量均超北京市土壤背景值(0.12 mg·kg-1),大部分地区超出国家土壤环境质量标准(0.6 mg·kg-1);Cr与Hg超北京市土壤背景值,但未超出国家土壤环境质量标准;其余检测元素均未超标。Cd在46个梨园的3个土层(除大兴40~60 cm土层外)的单因子污染指数均大于1,已造成了污染,其余检测元素均未造成污染。顺义区梨园40~60 cm土层的内梅罗综合(多因子)污染指数为重度污染水平,多污染物潜在生态风险指数(471.57)为重度风险水平,Cd的潜在生态风险指数(459.41)达到了严重风险水平;密云区梨园0~20 cm土层的多因子污染指数也为重度污染,多污染物潜在生态风险指数(202.5)为中度风险水平,Cd的潜在生态风险指数(184.56)达重度风险水平。大兴区20~40 cm土层、顺义区20~40 cm及0~20 cm土层的Cd潜在生态风险指数依次为157.50、93.76、89.66,处于较重风险水平;其他区梨园的Cd则为中低度风险水平。其余郊区、土层的其他单、多污染物潜在生态风险指数均为低度风险水平。【结论】顺义、密云地区测试梨园土壤已发生Cd污染。建议梨园减少含磷化肥农药使用,种植Cd超富集植物牛膝菊、碎米芥等。     

基于乘客感知的城市轨道交通客运服务质量综合评价初探

随着我国交通建设技术不断加强,城市轨道交通建设步伐也不断加快。在为城市提供轨道交通服务时,就会涉及大量客运服务,为了保证客运服务质量,就必须对城市轨道交通客运服务质量情况进行调查和评价。基于乘客感知对城市轨道交通客运服务质量进行综合性评价,不仅能保证评价质量还能有效改善乘客体验。本文将利用多层前馈神经网络工具,按照误差逆传播算法,建立城市轨道交通客运服务综合评价模性,基于乘客感知,科学进行评价。     

“四个优先”全面稳固农业基础

党的十九届五中全会指出了“农业基础还不稳固,城乡区域发展和收入分配差距较大”的问题,并提出了“优先发展农业农村,全面推进乡村振兴”的战略举措。本文对进一步稳固农业基础、缩小城乡差距的实现路径进行了探讨,以期为农业农村优先发展落到实处提供参考。     

平衡施肥与水稻主要病虫害的关联性探讨

水稻是我国主要粮食作物之一,每年水稻的产量占粮食总产量的45%左右。在水稻的生长发育过程中,需要大量的营养物质促进其生长,尤其是需要大量的氮素。化肥的施用一定程度上有利于提升水稻的产量,但过度施用化肥导致营养过剩会诱发水稻病虫害。根据自身相关从业经验,并结合广泛的社会实践调查研究,就平衡施肥与水稻主要病虫害发生的关联性展开了相关的探讨,希望能为相关工作人员提供借鉴。     

玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR 检测方法的建立与应用

【目的】由大斑突脐蠕孢（Exserohilum turcicum）和玉蜀黍平脐蠕孢（Bipolaris maydis）引起的玉米大斑病和小斑病是玉米生产上重要的叶部真菌病害,本研究旨在建立玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR检测方法,为玉米大斑病菌和小斑病菌的交配型田间分布和有性生殖研究提供技术方法。【方法】根据GenBank中已登录的玉米大斑病菌（登录号MAT1-1：GU997138和MAT1-2：GU997137）和小斑病菌（登录号MAT1-1：X68399和MAT1-2：X68398）交配型基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计2种病原菌交配型多重PCR检测特异性引物,采用单因素法对引物的退火温度以及扩增程序中延伸时间和循环数等重要参数进行优化,建立玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR检测方法,并对2种病原菌的交配型多重PCR检测灵敏度和特异性进行检验。同时,对田间采集的129株玉米大斑病菌和194株玉米小斑病菌单孢菌株的交配型进行多重PCR检测,以明确建立的交配型多重PCR检测方法的适用性。【结果】建立的多重PCR方法和设计的交配型特异引物StMAT01-2F/R、StMAT02-3F/R、ChMAT01-3F/R和ChMAT02-2F/R可分别扩增出MAT1-1、MAT1-2型菌株大小为816、132 bp（大病斑菌）与490、136 bp（小病斑菌）的特异性目的条带。25 μL多重PCR扩增体系：2×Multiplex PCR Mix 12.5 μL,引物各10 pmol,DNA模板100 ng,退火温度为57.2℃（大病斑菌）和55.0℃（小斑病菌）,35个循环。该多重PCR对玉米大斑病菌MAT1-1、MAT1-2型单孢菌株的检测灵敏度分别为0.1、0.01 ng基因组DNA,而对玉米小斑病菌MAT1-1、MAT1-2交配型的检测灵敏度均为0.1 ng基因组DNA。该交配型多重PCR检测方法对玉米大斑病菌和小斑病菌特异性很强,能够很好地区分玉米大斑病菌和小斑病菌相应的近缘种和14株其他真菌菌株。不同地理来源的玉米大斑病菌和小斑病菌交配型检测结果表明,该多重PCR能够准确地检出129株玉米大斑病菌和194株玉米小斑病菌的交配型,且检测结果与随机抽取的菌株杂交验证结果完全吻合。【结论】构建的玉米大斑病菌和小斑病菌交配型多重PCR检测方法灵敏度高、特异性好、操作简便,能够准确、快速地检测出玉米大斑病菌和小斑病菌的交配型,为玉米大斑病菌和小斑病菌的交配型田间分布和监测及有性生殖研究提供了可靠的技术方法。     

杨庄煤矿区农田塌陷水域多介质OCPs污染特征及生态风险研究

为研究采煤活动影响下农田塌陷水域有机氯农药(OCPs)的污染特征及潜在生态风险,使用GC-MS对淮南潘一矿的杨庄农田塌陷区水体和底泥中的OCPs特征污染物六六六(HCHs)及滴滴涕(DDTs)进行质量浓度测定,利用ArcGIS进行OCPs分布特征及来源研究,并选择共识沉积物质量基准法(CB-SQGs)对潜在生态风险进行分析。结果表明:杨庄沉陷区溶解态ΣOCPs质量浓度范围为72.06～218.89 ng·L~(-1),均值为167.32 ng·L~(-1);悬浮态和沉积态ΣOCPs范围为199.35～405.04 ng·g~(-1)dw和24.34～1 247.32ng·g~(-1)dw,均值为277.07 ng·g~(-1)dw和238.78 ng·g~(-1)dw;悬浮态和沉积态OCPs质量浓度自上游向下游方向随水流呈削减趋势;杨庄塌陷水体中HCHs主要来自于林丹,DDTs主要来自于农业三氯杀螨醇;溶解态OCPs低于国家Ⅲ类水质标准限额,处于低生态风险水平;悬浮态和沉积态OCPs处于中高生态风险水平,其中沉积态OCPs毒性发生率略低于悬浮态OCPs毒性发生率。     

黑龙江省动物疫病预防控制机构发展现状分析

为了掌握基层动物疫病预防控制机构发展现状,通过调研了解,黑龙江省84个市县级动物疫病预防控制机构的基础设施建设、仪器设备配置、人员队伍结构等情况有较大提升,但仍存在业务用房面积不达标,设备陈旧老化,物资储备欠缺,人员老龄化,工作经费不足和信息化管理薄弱等问题,难以适应当前动物疫病防控总体需要。这提示应进一步强化基础设施建设,更新仪器设备,加强防疫物资储备,健全冷链管理体系,充实专业队伍,建立经费保障机制和推动信息化平台建设,以期进一步推进基层动物疫控机构发展。     

红壤区肥液浓度对涌泉根灌水氮运移特性的影响

为提高红壤区涌泉根灌水氮利用效率,通过室内肥液入渗试验,研究了不同肥液浓度(0,10,20,35,60 g/L)条件下涌泉根灌土壤的入渗能力、湿润锋运移距离、土壤水分分布以及铵态氮和硝态氮的运移特性,并建立了红壤涌泉根灌土壤累计入渗量及湿润锋在竖直向上、竖直向下和水平方向的运移距离与肥液浓度的关系模型。结果表明:土壤累计入渗量、湿润锋运移距离以及湿润体内水分和氮素的分布均受到肥液浓度的影响。在同一入渗时刻,土壤累计入渗量及湿润锋运移距离随肥液浓度的增大而增大,且与入渗历时均呈幂函数关系;在灌水结束时,相同土层深度内,肥液浓度越大,土壤含水率就越大,土壤中铵态氮和硝态氮的浓度也越大,且与铵态氮相比,硝态氮的分布范围更广。随着肥液再分布的进行,土层内最大含水率位置逐渐下移,且土壤含水率的分布也更加均匀;土壤中铵态氮和硝态氮浓度的变化趋势不同,浅层中铵态氮的浓度逐渐降低,而硝态氮的浓度先降低后增加;深层中铵态氮的浓度先增加后降低,而硝态氮的浓度逐渐增加。该研究成果可为进一步研究红壤区涌泉根灌肥液入渗氮素运移及转化提供理论参考。