菊花绿变病植原体在中国的发生及分子鉴定

对内蒙古农业大学校园内表现花器绿变症状的菊花样品进行采集和DNA提取,应用植原体16S rRNA基因和rp基因的引物进行巢式PCR扩增,从感病样品中分别扩增得到了长度均约为1.2 kb的片段。序列一致性分析表明,菊花绿变植原体16S rRNA基因与翠菊黄化植原体匈牙利风信子株系(GenBank登录号MN080271)、印度玉米株系(KY565571)、印度繁缕株系(KC623537)和印度马铃薯株系(KC312703)的核酸一致性最高,为99.9%,rp基因序列与翠菊黄化植原体立陶宛洋葱株系(GU228514)的核酸一致性最高,为99.8%。基于16S rRNA基因和rp基因构建系统进化树时发现,菊花绿变植原体均与16SrI-B亚组成员聚为一起。16S rRNA基因相似性系数分析表明,菊花绿变植原体与洋葱黄化植原体(AP006628)的相似性系数最高为1.00,洋葱黄化植原体(AP006628)在分类上属于16SrI-B亚组。因此,我们可以确定该菊花绿变植原体属于16SrI-B亚组。这是我国首次报道菊花绿变病的发生。     

美人酥、满天红与彩云红的贮藏品质比较

为了初步了解云南新引进红色沙梨品种彩云红在果实采后贮藏过程中品质的变化及其推广潜力，本研究采收4年生的彩云红果实，并以同园中的美人酥和满天红为对照，测定货架期30天内三个红梨品种的呼吸强度、果皮色泽、果肉硬度、可溶性固形物、可滴定酸和维生素C含量等指标的变化。结果表明彩云红果实同美人酥和满天红一样耐贮藏，货架30天仍能保持较好的硬度和可溶性固形物；彩云红果实的酸度低，固酸比达到本园中美人酥和满天红的3.25与2.94倍，并且着色更好，VC含量相对较高。基于初步的贮藏特性及品质比较，确定彩云红具有很好的推广前景。     

采后碳酸氢钠和碳酸钠处理对南果梨轮纹病的控制及贮藏品质的影响

为控制采后南果梨轮纹病，本试验在离体和体内条件下研究不同浓度碳酸氢钠和碳酸钠处理对采后南果梨轮纹病的控制及对果实贮藏品质的影响。结果表明：南果梨轮纹病致病菌为葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）；离体试验中，1.0%碳酸氢钠和0.8%碳酸钠对梨轮纹病菌均有明显防效，可完全抑制病菌菌丝生长，显著降低菌丝干重和抑制孢子萌发（P＜0.05）。碳酸钠对病菌抑制效果优于碳酸氢钠。在活体试验中，碳酸氢钠和碳酸钠处理显著降低了梨果在室温（20 ℃）条件下的自然发病率，减小了人工损伤接种B. dothidea梨果的病斑直径，但抑制率较低，分别为10.2%和11.0%。碳酸氢钠和碳酸钠可延缓初期果实硬度的下降，维持较高可溶性固形物含量，碳酸钠可显著延缓果实可滴定酸的下降，而碳酸氢钠加速了可滴定酸的下降，但降幅较低。碳酸氢钠和碳酸钠对离体条件下轮纹病菌有显著抑制作用，而对室温（20 ℃）活体接种轮纹病菌控制效果较差。因此，建议生产上采用碳酸氢钠或碳酸钠结合冷藏等其他采后措施控制果蔬病害。     

五种秋子梨果实采后品质变化及生理差异研究

以京白梨、南果梨、花盖梨、尖把梨、安梨5种秋子梨果实为试材,研究其在常温(20±1)℃下果实采后品质变化及生理差异,并分析了果实硬度与其他品质指标的关系。结果表明,供试品种货架期长短存在差异;在后熟过程中,五种秋子梨果实硬度和VC含量均呈下降趋势,可溶性固形物(SSC)含量和相对电导率均呈上升趋势,果皮色泽由绿转黄;京白梨的呼吸强度显著高于其他4种秋子梨(P0.05)且有呼吸跃变峰;京白梨、南果梨、花盖梨及尖把梨的乙烯释放速率均呈先升高后降低的趋势,且均存在乙烯释放跃变,京白梨和南果梨的乙烯释放速率极显著高于其他3种秋子梨(P0.01),安梨没有乙烯跃变峰且乙烯释放速率最低。硬度与其他品质指标的相关性分析表明,除了果实硬度、VC含量、果皮色泽和相对电导率影响秋子梨果实后熟软化外,京白梨的可滴定酸(TA)含量,南果梨的SSC和呼吸强度,以及安梨的SSC均与果实后熟软化呈显著(P0.05)或极显著相关(P0.01)。     

油菜菌核病生防放线菌的分离与筛选

[目的]分离筛选出对油菜菌核病菌具有较好防治效果的生防放线菌。[方法]采用平板稀释法从采集土样中分离纯化放线菌,以油菜菌核菌为靶标菌,通过生长速率法、菌核萌发试验和盆栽试验,筛选对其具有高效抑菌活性的放线菌。[结果]从采集土样中共分离纯化到132株放线菌,其中有35株对油菜菌核菌菌丝生长抑制率大于60%,占总分离菌株的26.5%。所分离的35株放线菌中有11株对菌核萌发抑制率在70%以上,其中菌株GSA22-4、GSA26-2、HVA25-3、HVA36-4和AXW4-1可完全抑制菌核的萌发。盆栽试验结果表明,有6株放线菌对油菜菌核病的防治效果在60%以上,其中放线菌株X1-8的防治效果达91.7%。[结论]该研究初步筛选出对油菜菌核病有良好生防效果的放线菌,为进一步的研究工作奠定了基础。     

梨灰霉病拮抗放线菌L-30的筛选、鉴定及作用机制研究

采用平板对峙培养法从果树根际土壤中筛选出对梨灰霉病菌(Botrytis cinerea)及10种常见果实采后病害具有抑制活性的放线菌株L-30,同时利用分子方法结合形态观察对其进行鉴定,并测定其对B.cinerea孢子萌发的抑制作用、对‘皇冠’梨的诱导抗性和果实防御酶系活性的影响。结果表明,菌株L-30对梨灰霉病菌的活体抑制活性达到40%以上,基于16S rDNA核酸一致性和系统发育分析及培养特性证明L-30为链霉菌属(Streptomyces)的多产色链霉菌(S.polychromogenes)。L-30稀释100倍发酵液对梨灰霉病孢子萌发抑制率为52.04%。L-30处理皇冠梨果实能显著降低梨灰霉病菌的扩展,并提高果实的过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性。     

水蜡A病毒在呼和浩特市和哈尔滨市紫丁香上的发生及其基因组分子特征分析

为明确侵染紫丁香Syringa oblata并引起褪绿花叶症状的病毒种类及其基因组分子特征,利用透射电子显微镜对分离自呼和浩特市和哈尔滨市的紫丁香病样中的病毒粒子进行观察,并通过小RNA高通量测序和RT-PCR技术对其进行检测分析。结果表明,在紫丁香显症叶片的病毒粗提液中观察到长约600 nm、宽约13 nm的线状病毒粒子。利用小RNA高通量测序和RT-PCR技术从病样中检测到水蜡A病毒（Ligustrum virus A,LVA）,发病率为3.7%。呼和浩特市紫丁香分离物LVA-Sob的基因组序列全长8 525 nt,包含6个开放阅读框,分别编码Rep（1 968 aa）、TGB1（229 aa）、TGB2（107 aa）、TGB3（60 aa）、CP（294 aa）和NABP（119 aa）共6个蛋白。序列一致性分析表明,分离物LVA-Sob与韩国水蜡树分离物LVA-SK的基因组序列一致率高达97.9%,而与我国辽宁省暴马丁香分离物LVA-DX的基因组序列一致率仅为73.6%。在这3个LVA分离物基因组中没有检测到重组事件;基于基因组和cp基因序列的系统发育树显示这3个LVA分离物形成一个分支,并与瑞香S病毒（daphne virus S,DVS）有较近的亲缘关系。     

拮抗茄子黄萎病菌土壤放线菌的分离筛选和鉴定

为了研究土壤拮抗性放线菌对茄子黄萎病的生防价值,从陕西省延安市宝塔区与汉中地区土壤中分离、纯化获得154株具有纤维素降解活性的放线菌。采用平板对峙培养法进行初筛,用生长速率法对抑菌效果较好的菌株ZX-10-4进行抑菌谱的测定,并进行盆栽试验验证其对茄子黄萎病的防治效果,通过形态、培养特征及16S rDNA序列分析研究其分类地位。结果显示,有17株放线菌对茄子黄萎病菌抑菌效果较好且抑菌活性稳定,其中菌株ZX-10-4的抑菌活性最高,抑菌率达90.15%;活性菌株ZX-10-4发酵原液对茄子黄萎病的保护和治疗作用分别为70.00%和60.33%,稀释5倍液的防效也在50%以上。根据形态、培养特征、生理生化指标和16S rDNA序列分析,初步确定菌株ZX-10-4为白网链霉菌Streptomyces albireticuli的近似种。     

树干注药后吡虫啉在核桃组织中的分布动态研究

采用高效液相色谱(HPLC)测定了吡虫啉经树干注药后在核桃树体中的分布动态。结果表明,树干注药后吡虫啉在核桃树体内具有较好的传导、分布性能,其在不同组织中的含量差异较大,含量由大到小顺序为:叶片＞果皮＞果仁。吡虫啉在核桃树体内残留期较长,注药后60 d时,药剂在核桃叶片、果皮和果仁中的含量分别为0.256、0.178 和0.046 mg/kg;注药后80 d时,吡虫啉在叶片、果皮和果仁中的含量均小于0.05 mg/kg。根据吡虫啉在核桃果仁中的残留量变化动态及国外相关最大允许残留限量标准,建议在利用吡虫啉树干注药防治核桃害虫时,注药时间距核桃采收期应大于60 d。     

利用酵母双杂交技术筛选与苹果褪绿叶斑病毒运动蛋白互作的西方烟蛋白

苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV)是蔷薇科果树上的一种重要病毒,其致病机制尚不清楚。以具有基因沉默抑制子功能的运动蛋白(movement protein, MP)为诱饵,利用酵母双杂交技术筛选与其互作的西方烟37B(Nicotiana occidentalis 37B)蛋白。构建了库容量为9.6×10⁶ CFU、平均插入片段>1 kb的西方烟cDNA文库,从中筛选到15种蛋白,涉及植物光合作用、ATP合成代谢、过氧化物代谢、氨基酸代谢、抗逆等过程,可为解析ACLSV的致病机制提供依据和方向。