大白菜小植株突变体s1光合能力及光反应相关基因的转录组分析

植株的大小与光合能力密切相关。本研究以大白菜小植株突变体s1和其野生型WT为材料,通过测定叶绿素含量、净光合速率、叶绿素荧光参数以及对光反应相关基因的转录水平分析,解析大白菜植株大小与光合能力的相关性。结果表明:与野生型相比,大白菜小植株突变体s1的叶绿素含量无显著差异,但光合速率显著降低29%;Fv/Fm和Y(II)值在二者之间无显著差异(P>0.05),而s1的外叶和新叶ETR值都显著低于WT;进一步的转录组分析表明光合电子传递链上的PSII、PC、FNR、ATP合酶相关基因表达下调0.94～1.69倍。由此证实,大白菜小植株突变体s1光合速率低与光合电子传递链中的基因表达下降及光合电子传递速率下降有关。该研究为进一步挖掘大白菜植株大小相关的优异基因资源提供了良好的试验材料,也为大白菜分子设计育种提供了理论依据。     

大白菜生物钟突变体lcc-1突变表型的遗传分析

对甲基磺酸乙酯（EMS）诱变获得的生物钟长周期突变体lcc-1、野生型WT、杂交F₂群体及回交B₁和B₂群体进行田间表型性状调查,并对下胚轴长度、现蕾时间2个突变性状进行遗传分析。结果表明,lcc-1下胚轴长度、株高、开展度、外叶长、中肋长度均极显著小于WT,现蕾时间极显著长于WT。F₂代分离群体遗传分析结果表明,下胚轴长度及现蕾时间性状均符合2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因模型。结果可为调控生物钟和现蕾时间关键基因的挖掘和基因功能深入研究提供数据支持。     

一例猪传染性胃肠炎病毒与大肠杆菌混合感染的实验室诊断

四川某猪场发生10日龄内仔猪严重腹泻、呕吐疫情,发病率达80%,死亡率高达70%。为确诊病原,无菌采集腹泻致死仔猪的肝脏、十二指肠内容物及肠系膜淋巴结进行实验室检测。经分离、培养和鉴定,在十二指肠内容物中分离到大肠杆菌,致病性试验结果表明所分离大肠杆菌可在12小时左右致死小鼠。对提取的肠系膜淋巴结总RNA进行针对猪传染性胃肠炎（TGE）病毒的特异性RT-PCR检测,结果传染性胃肠炎病毒（TGEV）为阳性。根据临床症状、病理变化、病原检测综合判定本次疾病流行的主要病因为传染性胃肠炎病毒继发大肠杆菌感染。     

大白菜叶色突变体的HRM鉴定及其叶绿素荧光参数分析

将大白菜经甲基磺酸乙酯（EMS）诱变种子获得的42株叶色突变体按照生殖时期叶片颜色和叶绿素含量分为9种类型：深绿色、灰绿色、绿色、浅绿色、白绿色、白浅绿色、黄绿色、黄浅绿色、黄色;利用高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）技术对叶绿素荧光基因HCF164突变进行了筛选并结合叶绿素荧光参数测定,获得了1株黄绿色高光合效率突变体A29,1株黄绿色光合结构损伤突变体A35和1株浅绿色光合电子传递受阻突变体A21;对另外7个叶色相关基因的突变进行了HRM鉴定,表明叶绿素相关基因ATRCCR、CLH2、PORA突变可能是造成18个突变体叶色变化的主要原因,黄叶特异基因家族YLS突变与叶色变化也有关系。     

EMS 处理对大白菜种子萌发及主要生化指标的影响

为了探讨大白菜诱变育种的新方式，研究了不同浓度EMS 处理对大白菜种子萌发、幼苗生长及其主要生化指标的影响。结果表明：在0～1.0% 浓度范围内，随着EMS 浓度的增加，大白菜种子的发芽势、发芽率逐渐降低，幼苗根尖和叶缘褐化程度逐渐加剧，成活率下降，种子浸出液电导率以及种子和幼苗的MDA 含量均逐渐增加；EMS 对种子及幼苗SOD、POD 活性影响表现为低浓度促进，高浓度抑制。适宜大白菜种子诱变处理的EMS 浓度范围为0.4%～0.6%。     

HRM技术在大白菜EMS突变体筛选上的应用研究

以大白菜抗霜霉病基因相关的1段DNA序列为目标片段,利用高分辨率熔解曲线技术(HRM),对EMS诱变大白菜12-2和12-7花蕾进行小孢子培养获得的92个DH单株,鉴定出7株12-2突变株,6株12-7突变株。针对其中9株进行了PCR片段测序,结果表明全部为点突变,主要包括4种突变类型,最易突变位点为C-T类型,其次为A-C和C-A类型,没有G-C突变类型。试验明确了高效筛选大白菜EMS突变体的分析流程,验证了HRM技术筛选大白菜突变体的可行性,为大量筛选大白菜突变体库奠定了基础。     

大白菜GH3基因家族全基因组鉴定及表达分析

生长素酰胺合成酶（GH3）基因家族是生长素早期应答基因家族之一，在植物生长素信号转导过程中发挥重要作用。基于大白菜全基因组数据对大白菜GH3家族进行全基因组鉴定及生物信息学分析，结果表明，在大白菜基因组中共鉴定到45个包含GH3结构域的BrGH3家族成员；BrGH3家族成员编码氨基酸数在286～826之间，分子量介于32.06～90.77 KD之间；系统进化分析将BrGH3家族分为4类；基因结构分析发现该家族成员外显子数为2～10个；蛋白保守基序（motif）分析表明，除了BrGH3.2和BrGH3.18外，BrGH3家族成员都含有10个Motif;41个BrGH3成员在10条染色体上均有分布，4个基因未定位到染色体上；共线性分析发现29个基因参与片段复制事件，存在5个串联重复；启动子顺式作用元件分析表明，BrGH3成员含有大量光、激素、逆境和生长发育等响应元件。基于大白菜结球野生型和不结球平塌突变体结球前期叶片不同部位转录组数据，分析BrGH3差异表达，结果表明，其中BrGH3.28和BrGH3.41基因在大白菜突变体叶片不同部位的FPKM值均高于野生型，为野生型的1.22～4.83倍，且BrGH3基因家族在LF亚基因组中优势表达，初步推测BrGH3基因家族成员参与调控大白菜叶球发育。本研究为进一步研究BrGH3基因家族的功能和大白菜叶球发育机理提供参考。