借助于色谱图判断色谱仪中出现的故障

最近,作者在色谱工作中遇到了一些实际问题,通过分析、查找、判断,最后解决了这些问题。现向同行作以简单介绍,以使大家在今后的工作中遇到同样或类似的情况,能够用来参考、借鉴。     

家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右     

贵州火龙果生态栽培管理技术(二)

<正>(上接本刊2019年第2期"贵州省火龙果生态栽培管理技术(一)")4火龙果种苗繁育技术4.1扦插枝条准备选择优质、无病虫害的健壮植株,采集棱宽1.5厘米以上、棱厚0.2厘米以上的色深、健壮枝条。将枝条截成20～30厘米茎段,将基部的三棱削成斜面,并露出1厘米左右的木质部,刀口处用灭菌灵粉或高锰酸钾消毒,放阴凉通风处晾3～5天扦插。扦     

百香果‘紫香1号’成熟果实的氨基酸分析与营养评价

[目的]测定百香果‘紫香1号’的氨基酸含量,以评价其营养价值。[方法]用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测了百香果‘紫香1号’成熟果实的氨基酸含量,以FAO/WHO氨基酸参考模式为评价标准,对百香果‘紫香1号’果汁蛋白质营养价值进行了全面评价。[结果] 百香果‘紫香1号’已检测出的17种氨基酸中,以天冬氨酸(Asp)含量最高,占氨基酸总量(TAA)的16.96%；人体必需氨基酸(EAA)和儿童必需氨基酸(CE)占氨基酸总量的23.36%和13.67%；味觉氨基酸中的鲜味氨基酸(FLA)含量最高,占氨基酸总量的47.89%；药用氨基酸(MAA)含量也很丰富,占氨基酸总量的62.68%,以天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)含量为主；氨基酸比值系数分(SRC)为89.69,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸(Met+Cys)；[结论]百香果‘紫香1号’含丰富的氨基酸,有较高的营养价值和保健作用。     

贵州低热河谷地区西番莲的优质高效栽培技术

西番莲作为贵州省"十三五"主推精品水果之一,在贵州省果树产业助力脱贫攻坚中扮演重要角色。其特有的芳香气息与酸甜口感使之成为水果市场新宠。从适用范围、环境要求、常见繁殖方式及后期管理、栽培要点、主要病虫害防治、采收时期等方面介绍了贵州低热河谷地区西番莲的高效栽培技术。     

浅谈茶与快乐体育在体育教学中的应用

将茶和快乐体育与高校体育教学相结合,是一种全新的教育理念,对于学生的身心健康和人格完善具有一定的促进作用。传统的高校体育教学存在着教学内容枯燥、学生不感兴趣等问题,这违背了素质教育的要求。因此,高校体育教学迫切需要改革。本文主要介绍了茶与快乐体育融入体育教学中的必要性,并具体分析了茶和快乐体育在高校体育教学中的应用。     

全球养猪业疾病形势日趋严峻

正对现代养猪业而言,疾病的暴发是常见的威胁,这需要严格的生物安全措施以及先进的科技手段。不仅在畜禽行业新闻中,在大众媒体中牲畜疾病问题的曝光率也越来越高。一些人畜共患疾病的曝光可能会引起民众恐慌,而另一些疾病对养猪户或地区经济也可能会造成灾难性影响。猪流行性腹泻在北美和欧洲的暴发都引起了生产者的恐慌。口蹄疫     

高职院校辅导员队伍现状及职业化建设方法研究

近些年来,我国高等职业院校发展迅猛,在很多方面取得了长足的发展。但我们还要看到,在一些方面还存在着这样那样的问题。高职院校辅导员是高职院校建设中的重要支撑力量,本文就高职院校辅导员队伍现状进行了简要的分析,并就其职业化建设方法给出了一定的思路。     

精氨酸对哺乳仔猪生长性能及内脏器官的影响

选用产期相近、产仔猪数为10～12个、胎次相同或相近的10窝母猪(长×大)。每窝选取5头体重相近的7日龄仔猪(2.7 kg左右),随机分成5个处理,每个处理1头猪。各处理组精氨酸的添加水平分别为0、125、250、375mg/(kg·d)和500 mg/(kg·d),结果表明:与对照组相比,250 mg/(kg·d)和375 mg/(kg·d)精氨酸添加组仔猪7～14日龄平均日增重分别提高了3.39%和1.49%;14～21日龄仔猪平均日增重分别提高了6.68%和5.33%。精氨酸添加组仔猪内脏器官相对重量高于对照组(P0.05)。哺乳仔猪精氨酸的最适添加量为250 mg/(kg·d)。     

一例金丝猴截肢手术

<正>截肢术是用手术方法,将肢体的一部分由骨骼或关节部位截断或解脱,后者亦称关节离断术。金丝猴截肢手术临床尚未见有报道,某动物园1只金丝猴因高血糖并发右后肢动脉血栓,引起右小腿局部破溃、坏死,保守治疗无效,行截肢手术,伤口愈合良好。现报道如下。1发病情况与临床检查2009年5月份,某动物园金丝猴馆1只金丝猴,