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犬瘟热病毒Lederle株H,N全基因序列分析及表达研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用RT-PCR方法自犬瘟热病毒Lederle株基因组RNA中扩增出H基因(1 911 bp)和N基因(1 707 bp)片段,序列测定和分析表明与Onderstepoort株、CDV3株等疫苗毒株的同源性在95%以上,而与野外分离株的同源性介于90%~95%;以获得的H,N全基因片段为模板,分别扩增H基因近3′端996 bp的基因片段以及N基因中间高度保守区562 bp的基因片段,经克隆测序后分别插入原核表达载体pET-32a中进行表达,结果显示H片段和N片段分别表达大小约为57 kD和37 kD的融合蛋白,Western blotting检测结果显示,表达蛋白均可与CDV抗血清发生阳性反应,提示原核表达产物具有与CDV抗血清结合的免疫反应性。 相似文献
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2009年4月19日凌晨,陕西省某养殖公司从美国进口的1000头种猪直达西安空港,在陕西出入境检验检疫局严格监管下,运抵隔离场,依据《中华人民共和国从美利坚合众国输入猪的检疫卫生条件》要求,实施了45天的隔离检疫,在此期间,完成了A型H1N1猪流感、猪密螺旋体痢疾、猪布氏杆菌病、猪伪狂犬病、猪传染性胃肠炎、结核病、猪传染性胸膜肺炎、猪蓝耳病等疫病实验室检疫,检出:猪伪狂犬病抗体阳性猪2头、猪传染性胃肠炎抗体阳性猪9头、猪传染性胸膜肺炎抗体阳性猪11头、猪蓝耳病抗体阳性猪13头,按有关法律规定,对阳性猪进行扑杀无害处理,疫病检出率5%,合格率达到95%,检疫合格种猪已安全放行。 相似文献
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量子点是一种特殊的纳米微粒,又称半导体量子点、半导体纳米粒子或半导体纳米微晶体,是近年来研究越来越多的一类纳米材料.随着纳米科技的飞速发展,量子点以其优良、独特的光谱特性和良好的光化学稳定性,成为了理想的荧光探针材料,并且成为科研工作者备受关注的一种新型纳米生物荧光探针.它在生命科学、分析科学、材料科学、免疫医学、检验检疫科学等传统的及新兴的领域中都得到了广泛的应用,并取得了一定的研究进展,尤其是在生命科学的各个领域中,它的作用更是日益凸显,并直接或间接地推动着生命科学研究的不断发展. 相似文献
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新城疫病毒通用型实时RT-PCR检测方法的建立与应用 总被引:3,自引:0,他引:3
采用TaqMan方法,经引物和探针的设计、筛选及反应条件优化,研究了检测活禽和禽产品中新城疫病毒的通用型实时RT-PCR(RRT-PCR)方法。结果显示,对12株分别为速发型、中发型、缓发型和疫苗株新城疫病毒的尿囊液倍比稀释液的检测极限在10-5~10-7之间;建立的方法与常见禽类病毒无交叉反应,特异性良好;在检测人工感染肉鸡的脏器组织、咽喉、泄殖腔拭子中病毒的灵敏度同鸡胚分离试验基本一致;弱毒疫苗免疫鸡群在免疫后14 d,应用本方法不能从咽喉、泄殖腔拭子中检测到病毒;临床样品检测表明,该方法不仅可以检出中强毒力新城疫毒株,也可检出缓发型野毒株和疫苗毒株。 相似文献
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鸡大肠杆菌病研究Ⅰ.鸡E.Coli人工感染模型的建立及致病力评价 总被引:3,自引:0,他引:3
本文对分离自典型大肠杆菌病变和粪便的45株E.Coli通过4日龄雏鸡人工感染试验建立了大肠杆菌病的人工感染模型,并对菌株的致病性进行评价。结果表明:4日龄雏鸡颈部皮下接种0.2ml菌液,接种后,前65h内雏鸡死亡率≥60%的菌株为强致病力菌株;死亡率<60%,或出现典型大肠杆菌病变为中等致病力菌株;试验期不引起雏鸡死亡也无病变者为无致病力大肠杆菌。试验的13株分离自粪便的苗株,2株为中等致病力,11株为无致病力;32株分离自典型病变的菌,9株为强致病力菌,15株为中等致病力,8株为无致病力。 相似文献
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从4个不同的发病鸡场分离出4株肾传支病毒,命名为X、B1、B2、B3株,并成功地感染鸡,复制出肾传支病例。选B2株与以前本室保存的肾传支病毒A株经鸡胚培养、浓缩、胰酶处理制成HA抗原,对该抗原的稳定性与肾传支阴性血清、新城疫(ND)阳性血清、肾传支高免血清进行HI试验。结果表明,由B2毒株制备的HA抗原稳定性很好,新城疫阳性血清和肾传支阴性血清均不能抑制其血凝活性,肾传支高免血清能充分地抑制其血凝活性。 相似文献
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非洲马瘟病毒VP7基因拼接、表达及重组ELISA方法的建立与初步应用 总被引:2,自引:0,他引:2
采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(AHSV)含有绝大多数线性抗原表位的VP7编码基因片段,克隆于pET-30a构建重组质粒pET-30a-VP7,将pET-30a—VP7转化BL21(DE3),经1.0mmol/LIPTG诱导,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过Dot-EuSA以及ELISA试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测AHSV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为0.25μg/mL,血清的最佳稀释度为1:40,待检血清阳性临界值初步定为0.25。用此方法和商品化ELISA试剂盒检测了184份血清样品,结果完全符合。 相似文献
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