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非洲马瘟病毒VP7基因拼接、表达及重组ELISA方法的建立与初步应用 总被引:2,自引:0,他引:2
采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(AHSV)含有绝大多数线性抗原表位的VP7编码基因片段,克隆于pET-30a构建重组质粒pET-30a-VP7,将pET-30a—VP7转化BL21(DE3),经1.0mmol/LIPTG诱导,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过Dot-EuSA以及ELISA试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测AHSV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为0.25μg/mL,血清的最佳稀释度为1:40,待检血清阳性临界值初步定为0.25。用此方法和商品化ELISA试剂盒检测了184份血清样品,结果完全符合。 相似文献
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番茄果实采后贮藏过程中的颜色动力学模型及其应用 总被引:14,自引:2,他引:14
研究了番茄采后成熟过程中果皮颜色的变化规律,发现色泽角(H°)、色泽比(a/b)和明度等主要颜色参数的变化均符合一级动力学模型,并由实验确定了各颜色模型的动力学参数:参考变化速率常数(Kref)和反应活化能(Eα)。在此基础上,设计了一个色泽角-时温预测器,能够预测和监控果实采后贮藏的品质变化。 相似文献
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随着广州园林绿化事业的迅速发展及建设生态园林理念的提出,园林绿化愈加受到重视,但在实际发展中仍存在一些问题。文章阐述广州市园林绿化现状与存在的主要问题,并提出相应的对策与建议,以期为当地生态园林建设提供参考和借鉴。 相似文献
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试验旨在制备抗阪崎肠杆菌的单克隆抗体,初步建立其ELISA检测方法。以灭活的阪崎肠杆菌全菌体为抗原免疫BALB/c小鼠,筛选血清效价高的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,制备杂交瘤细胞,并用间接ELISA法选取阳性杂交瘤细胞,扩大培养后测定单克隆抗体的效价,进行特异性及抗体间的配对,使用mAb亚类检测试剂盒鉴定单克隆抗体的亚型,并利用得到的抗体建立双抗体夹心ELISA检测方法。本试验得到3株具有良好特异性能稳定分泌单克隆抗体的阳性细胞株5C10、2B6和Ab02,经两两配对,据阳性D450 nm值及P/N值选择1:20000稀释的5C10作为包被抗体,1:40000稀释的Ab02作为酶标二抗,建立ELISA检测法,应用建立的方法与荧光定量PCR方法检测动物实验室保存的20份进出口送检奶粉样品,结果显示试验结果一致。本试验成功制备阪崎肠杆菌的单克隆抗体并建立其ELISA检测法,为大批量快速检测阪崎杆菌奠定了基础。 相似文献
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为建立一种适用于现场快速检测的猪流行性腹泻病毒(PEDV)LAMP技术,基于羟基萘酚蓝(HNB)的可视化显色特点,根据PEDV M基因编码区序列,设计合成1套引物,通过反应物浓度和反应条件优化,建立了可闭管检测的PEDV RT-LAMP检测方法。特异性和灵敏度试验结果显示,建立的RT-LAMP检测技术快速、灵敏、特异,可于1 h内检出0.2 mL 0.1 TCID50/mL的病毒RNA,与实时荧光RT-PCR检测方法灵敏度一致,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型以及猪链球菌2型核酸不发生交叉反应。利用该方法对187份送检的粪拭子及病死猪组织样品进行应用检测,检出阳性样品9份,与荧光定量RT-PCR方法检测结果一致。试验结果表明,所建立的方法快速、特异,重复性满足要求,适用于送检样品的PEDV快速检测。 相似文献
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目前市场上肉类成分检测试剂盒种类繁多。为了评价不同厂家试剂盒的应用效果,选取当前市场上4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒,对其特异性、灵敏性及效率成本进行了分析比较。结果显示:4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒特异性均较好,不同肉类之间没有交叉反应;但检测同一种肉类的不同品牌试剂盒及同一品牌检测不同肉类的试剂盒灵敏性存在差异;不同品牌的试剂盒检测时间和成本也有区别,A品牌耗时最短,D品牌价格最高。结果表明,不同品牌试剂盒的灵敏性、检测耗时和检测成本各有特点,使用者可根据使用目的及经费预算选择合适的试剂盒。 相似文献
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汪琳 《农业科研经济管理》2023,(3):30-34
在农业科研院所日常管理工作中,印章代表着单位的意志和信誉,是对内对外行使权力、履行职责的象征,具有相应的权威性、公信力和法律效力。稍有差池,就可能对农业科研院所造成不可估量的法律风险、经济损失和信誉危机。为科学防范各类风险,文章积极探索强化农业科研院所印章管理工作的“软招”和“硬法”,充分发挥印章在农业科研主责主业中的关键性作用,着力为农业经济高质量发展、科研创新、服务“三农”、乡村振兴提供坚强保障。 相似文献