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马铃薯损伤诱导型启动子Wun1基因的克隆及其GFP表达活性 总被引:1,自引:0,他引:1
通过聚合酶链式反应(PCR),以马铃薯基因组DNA为模板,根据已报道Wun1序列设计了一对特异引物,在优化的PCR反应条件下扩增出了Wun1基因片段,通过序列分析与文献报道的碱基序列有96.86%的同源性,该基因已登录到GenBank(No.AY803296)。以pBIPG(携带GFP基因)的质粒DNA为模板,通过PCR技术亚克隆到了源自水母(Aequorea)大小为756bp的绿色荧光蛋白(GFP)基因,与已知序列同源率为100%。利用GFP基因作为报告基因,构建了用于比较鉴定所克隆启动子活性的pBIG(35S-GFP)和pBIWG(Wun1-GFP)两个植物表达载体,采用基因枪法进行对洋葱表皮细胞的遗传转化,检测Wun1启动子在受体细胞中调控基因表达的活性,结果表明克隆到的Wun1启动子活性强于组成型表达的35S启动子,GFP瞬时表达的分析方法也让我们有效的筛选到用于进行马铃薯抗病育种的调控元件。 相似文献
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以甘肃主栽品种的茎段为外植体,研究了不同转化条件(菌液浓度、感染时间、预培养及共培养时间)对转化效率的影响,以及选择压和培养基对抗性出芽的影响,初步建立了马铃薯品种“陇薯3号”和“台湾红皮”的遗传转化体系并获得了转化植株。卡那霉素生根筛选和PCR鉴定结果表明,再生的转化植株假阳性率比较高,要获得预期的转基因植株群体需加大遗传转化工作中转基因植株的数量。 相似文献
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由于海南热带果蔬特色农产品品类繁多、生产过程模式多样性、流通环节长等因素,导致以往的靠单一方式串联各环节信息的农产品质量安全溯源系统在应用过程中存在管理模式固化,数据采集难、实际应用效果欠佳等问题。通过比较分析无公害、绿色和有机农产品等国家标准规范,提取影响热带果蔬农产品关键因素的特征,研发了热带果蔬农产品质量安全溯源的灵活机制及其方法,满足溯源内容、模板、机制的灵活管理与配置,实现农产品溯源平台推广的便利性,并根据海南农业高新区管理的需要,构建农产品质量安全溯源管理系统,实现企业入驻、产品检测、溯源信息采集等功能,为入驻农高区的企业提供农产品质量安全追溯系统的应用,提升了入驻管理水平,保障农产品安全可信赖与可追溯性。 相似文献
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以“保研-7号”红毛丹为试材,采用厚朴提取液、竹醋液、松针精油和胡椒碱复配制备生物保鲜剂,比较13℃下3种复配生物保鲜剂处理对红毛丹贮藏品质的影响。结果表明:3种复配生物保鲜剂处理均能有效抑制红毛丹果实的腐烂、变软及果皮褐变,保持较高的好果率,抑制呼吸作用,保持较高的可溶性固形物(TSS)含量、较低的可滴定酸(TA)含量及多酚氧化酶(PPO)活性,在调控苯丙氨酸解氨酶(PAL)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,维持贮藏期间红毛丹果实正常代谢,提升抗逆性,促使红毛丹果实保持细胞膜完整性,延长内稳态时间方面具有较好的作用。其中,厚朴提取液、竹醋液、松针精油及胡椒碱复配的生物保鲜剂处理配合真空包装对保持红毛丹果实品质,延长贮藏时间效果较好。 相似文献
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马铃薯S病毒的RT-PCR检测 总被引:3,自引:0,他引:3
根据马铃薯S病毒(PVS)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物。以感染PVS的马铃薯组织和健康的组织为材料,对提取植物总RNA的两种方法进行了比较,并对总RNA的提取方法进行改进,获得了纯度较高,完整性较好的总RNA。以此为模板,进行cDNA合成及PCR扩增,从感病组织扩增得到一段长度约642bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致,而健康组织无此扩增产物。从而建立了检测PVS快速灵敏简便的新方法,在基因水平上为PVS的检测提供了新手段。 相似文献