砂藓(Racomitrium canescens)RcRab基因的克隆及生物信息学分析

本研究以砂藓(Racomitrium canescens)为材料,从砂藓干旱处理转录组数据库中筛选获得小G结合蛋白基因Rab的mRNA序列,通过RT-PCR法扩增,得到RcRab基因的CDS序列,并对其进行了生物信息学分析。结果表明,该基因c DNA全长为1171 bp,包含636 bp的开放阅读框,编码211个氨基酸。预测该基因有Rab家族的保守结构域-G结构域。RcRab蛋白分子质量为23.29 kD,理论等电点为5.76,具有亲水性,不属于跨膜蛋白且不存在信号肽。进化树分析表明,RcRab蛋白质与小立碗藓(Physcomitrella patens)Rab蛋白质亲缘关系最近。本研究可为进一步探索RcRab基因在苔藓植物中的抗旱机制提供数据基础。     

砂藓(Racomitrium canescens)抗旱相关基因RcAOS2的克隆及表达分析

丙二烯氧化物合酶(allene oxide synthase, AOS)是茉莉酸合成途径中关键酶,在茉莉酸合成中具有重要的作用。本研究在砂藓(Racomitrium canescens)干旱胁迫转录组数据中发现一个干旱胁迫下表达量上调的AOS基因,将其命名为RcAOS2,我们对RcAOS2的开放阅读框进行了克隆及相关的生物信息学预测分析,并对RcAOS2在砂藓快速脱水和复水过程中的表达量变化进行了检测。结果显示,该基因cDNA全长1 474 bp,开放阅读框长516 bp。RcAOS2编码蛋白质的相对分子质量为4.36 kD,等电点为5.11,不稳定系数为55.02,为不稳定蛋白质;脂肪系数为19.19;RcAOS2蛋白质疏水性较强,属于疏水性蛋白质,存在信号肽,不属于跨膜蛋白质。系统进化分析表明,RcAOS2蛋白质与其他物种AOS蛋白质亲缘关系较远,是具有AOS序列特征的新类型。实时荧光定量PCR分析结果表明RcAOS2基因在砂藓干旱和复水过程中呈现差异性表达,推测RcAOS2可能参与砂藓的干旱胁迫响应和复水回复过程。本研究成果为进一步研究砂藓抗旱基因功能提供理论基础和备选基因资源。     

4种植物生长调节剂对亚麻种子活力的影响

分别采用不同浓度的赤霉素（GA3）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2，4-D处理亚麻（Linum usitatissimam L．）种子。结果表明，GA3可以显著提高亚麻种子活力，使用时农度低于15mg／L为宜。IAA对亚麻种子活力无明显作用，使用时浓度不宜过高或过低。NAA可以提高亚麻种子活力。2,4-D可以显著降低亚麻种子活力，使用时浓度低于15mg／L为宜。     

薄皮甜瓜子叶组织培养的研究

以薄皮甜瓜品种“懒瓜王”子叶为材料,设置了15种激素组合的诱导芽分化培养基,进行了甜瓜子叶外植体诱导生芽试验和生根试验。结果表明,BA是甜瓜再生分化的关键物质,以BA浓度为4 .0mg/L(毫克/升)时,最有利于子叶外植体的分化生芽,在MS BA4 .0mg/L IAA0 .3mg/L(毫克/升)培养基中,甜瓜子叶的诱导生芽率高达93.75 %。不定芽经过伸长和生根获得了再生植株。同时又对子叶进行了横纵切的对照试验,以及芽的着生位置和形态的观察与研究。     

紫萼藓科植物DNA提取及遗传多样性的分析

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法对两种紫萼藓科植物的6个居群的60个个体进行遗传多样性分析。用11个随机引物扩增出清晰谱带52条。聚类结果表明:紫萼藓科两种植物的6个自然居群显然聚为两大支,一支为东亚砂藓,另一支为毛尖紫萼藓。介绍了紫萼藓科植物6个自然居群及东亚砂藓与毛尖紫萼藓的遗传变异情况。     

薄皮甜瓜试管苗生根技术研究

本试验以薄皮甜瓜品种"懒瓜王"试管苗为材料,研究了不同的生长素对其生根的影响,设计了5种不同的浓度对无根苗进行处理.通过对其生根的数量、长度的观察计算,结果表明:1/2MS 0.5 mg/L(毫克/升)IBA的生根培养基对促进生根影响最大,为"懒瓜王"最适合的生根浓度.     

10种金发藓科植物RAPD分子系统学研究

利用改良CTAB法提取10种金发藓科(Polytrichales)植物基因组DNA,利用RAPD和分子标记技术对其进行遗传多样性研究。结果表明,在供试材料中筛选到具有多态性的RAPD引物12个,这些RAPD引物共扩增出68条带,多态性带42条,多态性条带比率(PPB)为61.76%;采用UPGMA聚类分析,供试材料分为2大类群,细叶拟金发藓单独聚为1类,其余9种植物聚为1类。RAPD和分子标记技术可用于金发藓科植物系统学研究。     

山墙藓组织培养条件研究

以山墙藓幼嫩茎尖为外植体,采用L12(3×24)正交设计方法,对山墙藓配子体消毒方法及培养基类型进行了筛选;通过梯度设计研究不同浓度的蔗糖对配子体形态发生的影响,以建立有效的山墙藓(Tortula ruralis)组织培养快繁体系。结果表明:山墙藓配子体的最佳消毒方法为浓度3%的次氯酸钠溶液消毒5min后,浓度0.05%的升汞溶液二次消毒20s,Beneck培养基为最适消毒培养基;蔗糖对于山墙藓原丝体的形成和扩展生长均具促进作用,浓度为30g/L时原丝体形成时间最早,扩展直径最大,但抑制了芽体的分化,浓度为15g/L时对芽体分化具明显促进作用。