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以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
摘要:以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg/孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板,用10%免血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 相似文献
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犬贾第虫dsRNA病毒的鉴定及特性 总被引:12,自引:0,他引:12
对分离到的6株犬贾第虫(Giardia cnais)包囊进行核酸分析,在其中1株犬贾第虫核酸的琼脂糖凝胶电泳图谱上观察到1条长度约7.0kb的片段。经鉴定,该核酸不能被DNA酶(100mg/L)降解,对质量浓度低的RNA酶(0.1mg/L)不敏感,但可被质量浓度高的RNA酶(10mg/L)降解。纯化包囊经流氮冻融后,磷钨酸负染,电镜观察发现有球形、直径约为33nm的病毒样粒子存在,包囊超薄切片在胞质中也观察到该病毒样粒子存在。RNA依赖RNA聚合酶活性测定结果表明,该病毒具有RNA依赖RNA聚合酶的活性。犬贾第虫dsRNA病毒核经RT-PCR扩增后得到1条预计扩增大小的片段,将其回收后连接到pMD18-T载体上进行克隆并测序,所得序列仅与蓝氏贾第虫病毒具有较高同源性。 相似文献
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将编码CP15 / 6 0的基因插入真核表达载体pcDNA3(+)中构建重组质粒pcDNA3 15 / 6 0 ,然后经鼻粘膜免疫怀孕成年山羊 ,观察其免疫应答的产生情况及其对后代的保护力。结果为抗CP15 / 6 0抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中。pcDNA3 15 / 6 0经鼻粘膜免疫的怀孕山羊产生的免疫力能传给子代 ,使子代对微小隐孢子虫 (Cryp tosporidiumparvum)感染产生保护。CP15 / 6 0 DNA免疫母羊的后代比非免疫母羊的后代排出卵囊少且排卵时间短。这就表明重组质粒pcDNA3 15 / 6 0可作为隐孢子虫候选核酸疫苗 相似文献
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将编码CPl5/60的基因插入真核表达载体pcDNA3( )中构建重组质粒pcDNA3-15/60,然后经鼻粘膜免疫怀孕成年山羊,观察其免疫应答的产生情况及其对后代的保护力。结果为抗CPl5/60抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中。pcDNA3-15/60经鼻粘膜免疫的怀孕山羊产生的免疫力能传给子代,使子代对微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)感染产生保护。CPl5/60-DNA免疫母羊的后代比非免疫母羊的后代排出卵囊少且排卵时间短。这就表明重组质粒pcDNA3-15/60可作为隐孢子虫候选核酸疫苗。 相似文献