致倦库蚊天蚕素CecB2基因的原核表达及蛋白纯化

构建致倦库蚊(贵阳株)天蚕素B2(CecB2)基因原核表达载体,并原核表达获得重组蛋白。定向克隆CecB2成熟肽序列至原核表达载体pET32a(+)上,将成功构建的pET32a-CecB2重组表达质粒转化大肠埃希菌Rosetta中经IPTG诱导表达,对IPTG诱导浓度和诱导时间优化后表达所得目的蛋白采用镍离子亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western blot检测鉴定表达蛋白。结果表明,成功构建原核表达载体pET32a-CecB2,IPTG浓度和时间优化结果为IPTG浓度为0.05mmol/L,诱导时间为3h。SDS-PAGE检测获得大小约25ku的可溶性纯化蛋白,Western blot鉴定纯化蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生抗原抗体结合反应。说明所构建原核表达载体pET32a-CecB2能在大肠埃希菌中可溶表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。     

有机肥替代部分化肥对‘桂甜糯525’产量品质和土壤环境的影响

本研究通过田间试验,以不施肥为对照（T1）,设置单施化肥（T2）和不同有机肥替代部分化肥（T3和T4）3个施肥处理,研究不同有机肥替代部分化肥对玉米产质量和土壤环境的影响。结果显示,施肥处理下玉米植株的农艺性状均优于不施肥处理,与单施化肥相比,施用有机肥能更好地促进玉米植株的生长,其中T3处理玉米植株的茎粗和叶片长较T2显著（P<0.05,下同）提高11.94%和4.53%;施肥能显著提高玉米产量,较不施肥可显著提高14.27%~17.17%;施用有机肥能提高玉米鲜果穗性状和品质,其中T3处理穗长较T2显著提高7.12%;与T2处理相比,T4处理的籽粒蛋白质含量较T3显著提高7.21%,T3处理籽粒的可溶性糖含量较T1和T4处理显著提高61.54%和77.97%;T3处理土壤中的有机质含量较单施化肥显著提高64.52%。各指标相关性分析中,籽粒蛋白质和脂肪含量与总氮含量呈显著正相关（r=0.868,P<0.01）,说明有机肥可通过提高玉米对氮的吸收从而促进籽粒中蛋白质和脂肪等营养成分的积累。综上,有机肥替代部分化肥相比于不施肥和单施化肥能更好的促进玉米植株的生长,且在保证产量的同时能提高果穗品质,增加土壤有机质含量,可作为区域化肥减施下春玉米提质保产的推荐施肥方案。     

东安县光皮树资源现状与发展对策

从资源总量、分布特点、优树资源与经济产量及其开发利用等方面综述了东安县光皮树资源现状,分析了其发展前蓄,并针对存在的问题提出了发展对策。     

玉米健壮素在地膜谷子上的应用研究

谷子在孕穗期喷施玉米健壮素可使基部节间缩短 0 3 ,直径增粗 0 13 ,穗柄缩短 0 6 ,旗叶缩短5 ,增宽 0 8 ,株高降低 2 9 ,穗粗增加 0 1 ,穗粒重增加 4 4 4g ,千粒重增加 0 6g,增产 2 9 4 % ,为实现谷子高产、密植、防倒、增收的栽培技术提供了可借鉴的措施     

复合肥配施水溶肥对茉莉花产量和品质的影响

应用田间小区试验方法设置4个施肥处理:复合肥+硼锌铁镁钙水溶肥(F1)、复合肥+氨基酸水溶肥(F2)、复合肥+生多素水溶肥(F3)、单施复合肥(F4),以单施复合肥(F4)为对照,研究在复合肥配施不同水溶肥处理的条件下,茉莉植株生长、茉莉花产量及品质的变化特征.结果表明:在复合肥配施不同水溶肥条件下,茉莉花植株生长比单...     

致倦库蚊防御素基因的克隆与原核表达及蛋白纯化

以冈比亚按蚊防御素(Defensin)氨基酸序列为种子序列,在致倦库蚊EST库中查找相似序列。通过RT-PCR技术,克隆获得致倦库蚊防御素编码序列。将致倦库蚊防御素成熟肽基因片段定向克隆至原核表达载体pET32a(+),构建致倦库蚊防御素重组表达质粒pET32a-DEF,导入大肠埃希菌Rosetta中表达,并比较不同IPTG浓度、不同诱导时间、不同诱导温度对重组基因表达的影响,以确定最佳诱导表达条件,重组蛋白经His-镍蛋白纯化柱纯化。结果表明,致倦库蚊防御素基因编码区全长300bp,编码99个氨基酸。pET32a-DEF最佳诱导表达条件为,IPTG浓度0.2mmol/L,诱导时间为4h,诱导温度为37℃,经纯化获得大小约29ku的重组蛋白,这为进一步研究该蛋白功能奠定了基础。     

正交试验法优化丹参灵芝丸的提取工艺

目的优化丹参灵芝丸的提取工艺。方法:采用L_9(3~4)正交试验法,以丹参酮ⅡA和氧化苦参碱的含量的综合评分为评价指标,考察乙醇浓度、加醇倍量、提取时间及提取次数对脂溶性成分提取工艺的影响;以丹酚酸B和总多糖含量的综合评分为评价指标,考察加水倍量、提取时间、提取次数对水溶性成分提取工艺的影响,优化丹参灵芝丸的提取工艺。结果脂溶性成分最佳提取工艺为8倍量75%乙醇回流提取三次,每次1.0h;水溶性成分最佳提取工艺为8倍量水煎煮三次,每次1.5h。结论验证试验表明,该提取工艺稳定可行、重复性良好。研究为丹参灵芝丸工业化生产提供了依据。