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1.
转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明:Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。  相似文献   
2.
为了建立青蒿的SRAP最佳扩增体系,并筛选出SRAP多态性引物,本研究以青蒿叶片DNA为模板,采用正交试验设计,以Mg^2+、dNTP Mix、Taq DNA聚合酶、引物和DNA模板5种因素5个水平,对青蒿SRAP反应体系进行研究。结果表明,青蒿SRAP-PCR最佳反应体系为:引物0.6μmol/L、Mg^2+2.0 mmol/L、模板DNA 5.1 ng、Taq DNA聚合酶2.0 U、dNTPs 0.25 mmol/L,总体积为25μL。各因素对扩增反应均有不同影响,其中引物浓度的影响最大,dNTPs的影响最小。运用该体系对不同种质资源的青蒿进行验证,证明该体系稳定可靠,并在30个引物组合中筛选出了25对扩增条带清晰,多态性丰富的引物组合。这一结论为今后利用SRAP标记技术进行青蒿分子遗传学研究提供了科学依据。  相似文献   
3.
比格犬人工感染埃立克体病的临床研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了表述比格犬感染埃立克体(Ehrlichia)后的临床表现,用已确证为E.platys和E.canis混合感染的犬血对5条比格犬进行了人工感染,并对临床和血液学变化进行了观察。埃立克体病的潜伏期为6-29天,其后的临床表现为急性发热、眼结膜苍白、厌食、精神沉郁、体重严重减轻、腹泻带血、多处有淤血斑点出现、6-45天内全部死亡。血液学变化显示血红蛋白和白细胞明显减少(P<0.01,P<0.05)。由此可见,比格犬对2种埃立克体(E.canis和E.platys)混合感染的性很高,严重的临床表现与美国学者普遍认为的亚临床状态相左,这可能是中国Gzh981株(E.platys)和Gzh982株(E.casnis)与国外株在毒力上的差异所致。  相似文献   
4.
安普霉素对仔猪内分泌的调控作用及血液生化指示的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
采用单因子试验设计 ,28日龄大长北三元杂交断奶仔猪72头随机分为3组 ,研究饲料中添加不同剂量的安普霉素 (0、20、90mg/kg)对仔猪内分泌的调控作用及血液生化指标的影响。试验期为4周。结果表明 :仔猪日粮中添加90mg/kg的安普霉素可促进机体与生长有关的内分泌活动 ,提高内源激素 (生长激素、胰岛素、甲状腺激素T3)水平 (P<0.05),从而促进肌肉蛋白沉积 ;并具有显著降低血液中氨、尿素氮含量和提高血糖水平的作用 (P<0.05) ,表明安普霉素对仔猪具有增加氮沉积 ,促进蛋白质合成、抑制蛋白质分解的作用  相似文献   
5.
采用试管二倍稀释法测得单诺沙星及其对照药物恩诺沙星、泰乐菌素对鸡败血支原体(MG)的最低抑菌浓度分别为0.0625、0.125、0.5mg/L。试验鸡每只左右气囊分别接种MG S6株菌液0.75ml、滴鼻约0.3ml,同时腹腔注射大肠杆菌菌液0.3ml,人工诱发鸡败血支原体与大肠杆菌合并感染的疾病模型。25、50、100mg/L的单诺沙星、500mg/L的恩诺沙星和500mg/L的泰乐菌素连续饮水5d给药,对人工合并感染鸡败血支原体与大肠杆菌病的治愈率分别为93.3%、96.6%、96.6%、93.3%、86.6%,而感染对照组的死亡率为23.3%。单诺沙星及其对照药物组的增重率显著高于感染对照组,并能极显著的降低感染鸡的死亡率、抗体反应阳性率、气囊损伤率及病原再分离率。  相似文献   
6.
犬埃立克体实验模型初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
将犬埃立克体标准毒株(Florida株)体外细胞纯培养物和我国犬埃立克体病病犬血白细胞分别接种于C3H小鼠,接毒后d,经PCR检测证实均感染成功。本试验为犬埃立克体病小动物模型的建立打下了基础。  相似文献   
7.
采用3×2×2因子饲养试验和2×2×2因子代谢试验,研究金霉素与赖氨酸和蛋氨酸的交互作用对肉仔鸡生产性能的影响,及金霉素对两种氨基酸代谢的影响。金霉素在饲料中添加150 mg/kg时,对0-3周肉仔鸡具有显著的促生长作用(P<0.01);并显著提高肉仔鸡的饲料采食量和饲料转化率(P<0.01),促进氮沉积(P<0.01)。对4-6周肉仔鸡的生产性能无显著影响(P>0.05);金霉素、赖氨酸和蛋氨酸存在显著的互作关系(P<0.05)。金霉素的促生长效果受饲料中赖氨酸和蛋氨酸含量的影响,当日粮中赖氨酸水平为1.3%,蛋氨酸水平为0.6%时,肉仔鸡的生长性能最高。金霉素对赖氨酸的利用率没有显著影响(P>0.05),对蛋氨酸和胱氨酸的表观利用率具有显著抑制作用(P<0.05)。研究结果表明持续低剂量金霉素与蛋氨酸和赖氨酸具有交互作用,这种互作关系影响彼此对肉仔鸡生产性能的作用效果,金霉素具有提高肉仔鸡赖氨酸需要量的作用。  相似文献   
8.
鸡新城疫病毒F基因和鸡IL—2重组DNA疫苗的构建   总被引:40,自引:0,他引:40  
利用已克隆到的新城疫D26株F基因和鸡IL-2基因,经过载体改建,将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上,经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2的重组质粒,为探讨禽类重组基因疫苗的构建及鸡IL-2在基因疫苗中的作用奠定了基础。  相似文献   
9.
对浙江等地鸭大肠杆菌病流行病学进行调查,并研究其发病特点,分离鉴定出致病性大肠杆菌26株;已对其中20株菌株进行血清型鉴定,主要为078,占70%(14/20),其次是O1,占15%(3/20);人工感染试验表明,80%(8/10)菌株毒力强,皮下、肌肉、足蹼3种途径均易复制该病;病理组织学检查肝、肺、脾等,表现急性炎症,出血等病变;药敏试验表明,不同菌株对药物敏感性差异较大,除对鸭菌消、卡那霉素等高敏外,对多数常用抗菌药已耐药,最后就该病的防治提出了对策。  相似文献   
10.
喹诺酮类药物研究进展及在兽医临床的应用问题   总被引:12,自引:0,他引:12  
喹诺酮类药物已成为合成抗菌芗中最具有开发前途的一类药物。兽医临床常用药物有不同的特点和应用。与此同时,此类药物的毒性反应、耐药性及药物残留等问题不断出现,针对各方面的问题,提出此类药物的发展前景。  相似文献   
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