核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L Na Cl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2(pH8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L~200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-Pico Green方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。     

樱桃番茄在城市屋顶环境的高效管道栽培技术及生产模式研究

以城市闲置屋顶上架设的内部填充固体栽培基质的PVC管道为试材,以"金童"樱桃番茄为研究对象,研究了樱桃番茄城市屋顶环境的高效管道种植技术与最佳生产模式。结果表明:在填充有固体基质的纵长2m、直径200mm、植物生长口间距为300mm的PVC管道中一次性施放2×浓度的养分(含20g Ca(NO3)2、10g KNO3、14g KH2PO4、10g尿素与100mL微量元素浓缩液),可使所种植的樱桃番茄的长势、品质与肥水利用率达到最佳,每667m2产值约合23 211.6元。     

高校兽医实验室资质认定体系建设与运行分析

高校兽医实验室唯有通过实验室资质认定,才能开展动物检疫、兽医流行病学调查等社会的服务工作,提供具有法律效力与权威性的检测数据。浙江农林大学动物健康检测中心于2015年成为全国高校系统兽医领域首个通过资质认定的第三方检测实验室,其检测范围从最初19项动物疫病检测项目发展到现在145项,年检测量4万项次以上,出具检测报告200余份。依据最新要求及高校实际情况,本文从资质认定体系的建立、试运行、资质认定评审及体系的正式运行等方面,创新性阐述了高校兽医实验室资质认定体系建立与运行的全过程,为计划开展资质认定的高校兽医实验室提供参考。     

高等学校动物医学类计量认证实验室运行机制探析

为了提高高校计量认证实验室检测能力和人才培养质量,探索高校实验室管理和计量认证体系的质量管理结合机制,本文依托浙江农林大学动物健康检测中心的实践经验,围绕本科生毕业论文、本科生实验教学、实验室规范管理等方面形成了检测质量控制和人才培养的创新模式,供高校其他实验室借鉴,以期有利于提高高校实验室的管理水平,促进本科生人才培养质量的提升。     

单增李斯特菌谷氧还蛋白调控氧化应激相关基因转录的研究

本实验室前期对单增李斯特菌(LM)谷氧还蛋白(Grx)转录组数据进行了分析，在此基础上为了对Grx调控细胞色素氧化酶等应激相关基因(lmo0722、qox A、qox B、gr)的转录及其作用机制研究，本研究将Δgrx与野生株EGD-e经4 mmol/L肼应激后，分别提取总RNA并反转录为cDNA作为模板，利用RT-q PCR检测Grx调控细胞色素氧化酶等应激相关基因转录情况，结果显示，Δgrx与野生株EGD-e相比，grx基因缺失引起qox B、qox A、gr、lmo0722等基因的转录水平显著上调(分别上调30、29、17和5.6倍)。利用李斯特菌穿梭质粒构建携带调控基因启动子序列的gfp报告质粒，电转化至野生株EGD-e和缺失株Δgrx感受态细胞中，获得含GFP的重组报告菌株。将这两种含GFP的重组报告菌液分别加入4 mmol/L肼后检测荧光强度，结果显示，EGD-e携带的GFP荧光数值显著低于缺失株Δgrx (P<0.01)，进一步表明Grx参与调控上述应激相关基因的转录。将扩增的lmo0722、qox A、qox B和gr基因的启动子和Grx、Prf A和GAPDH重...