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口服急性毒性试验中Cry1C蛋白对鼠肠道菌群的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析不同ICR(institute of cancer researcch)小鼠在口服急性毒性试验中摄入Cry1C蛋白前后其肠道菌群的变化,进而对该抗虫蛋白的食用安全性进行较为深入的研究.DGGE图谱经UPGAMA聚类分析显示:小鼠间菌群结构存在较明显的个体差异;实验期间,对照组小鼠灌胃前后其菌群基本保持稳定;实验组小鼠试验前后肠道菌群变化差异较对照组明显.随着灌胃的停止其变化差异在经历过高峰后会随着停喂时间的延长而减小,且菌相有逐渐恢复灌胃前结构的趋势.从肠道菌相的角度分析可知:该抗虫Cry1C蛋白对小鼠是基本安全的. 相似文献
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动物实验评价转基因食品食用安全的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
转基因食品的食用安全评价是转基因产品开发中的重要环节,其中动物实验在转基因食品的安全性评价中占据了非常重要的位置,主要解决转基因食品在整体水平上对健康的影响。本研究将实验动物按照大型禽畜和小型啮齿类进行了初步分类,综述了用不同动物实验来评价第一代、第二代转基因食品安全的研究现状,并对今后的研究进展进行了展望。 相似文献
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转基因植物食用安全评价 总被引:1,自引:0,他引:1
2014年全球转基因植物种植面积达到1.815亿hm2,转基因植物商业化发展给全球农业和环境带来巨大收益,但是其安全性问题仍然受到广泛争议。目前,对转基因植物的安全评价在全球范围内已经建立起较为完善的体系,但是各国政府对评价程序的具体要求还存在差异。为了在法律法规层面规范转基因植物安全评价程序,中国农业部颁布了《转基因植物安全评价指南》,涵盖了详细的转基因植物及其产品的安全性评价内容。本文结合案例分析,对该指南中的食用安全评价部分详细解析和论述了包括营养学、毒理学、致敏性以及非期望效应等安全评价程序,旨在为我国转基因植物的食用安全评价提供有益的指导与借鉴。 相似文献
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实时荧光定量PCR方法检测大肠杆菌O157:H7 总被引:4,自引:0,他引:4
针对大肠杆菌(Escherichia coli )O157:H7的致病基因eae设计了特异性引物,并用荧光染料SYBR GreenⅠ 进行了实时定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)。熔解曲线显示产物特异性较强,无非目的条带和二聚体产生。并对反应程序进行了优化,确定了最佳的反应程序,最终在合适的模板浓度内得出了标准曲线。结果显示Real-time PCR 比普通PCR灵敏1 000倍。 相似文献
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以转反义ACS(ACC合成酶)和反义NR(乙烯受体蛋白)基因番茄和普通番茄(Lycopersicon escclentum Mill.)作为试材,通过ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)方法研究了抑制乙烯合成的外源基因转入番茄后,伤流中植物激素的变化。发现转基因番茄和普通番茄在盛花期和盛果期伤流中各种植物激素的含量变化不显著;而到了成熟期伤流中IAA、GA,和CTKs(细胞分裂素)仍然没有显著变化,但转基因番茄伤流中ABA含量与普通番茄相比却显著减少,说明ABA和乙烯对番茄成熟衰老的控制是共同起作用的,乙烯释放量的改变和信号转导途径的抑制都会影响ABA的伤流运输。 相似文献
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桑叶不仅是养蚕的饲料,也是传统的中药材之一。桑叶中含有丰富的蛋白质、多糖、黄酮类、生物碱类、游离氨基酸以及挥发性化合物等具有特殊生理活性的功效成分,是开发药物或功能食品的天然原料。我国的桑品种资源丰富,分布范围广泛,桑叶中的营养与功效成分及其含量同桑品种、植株部位、采收季节和产区都有关系,桑叶指纹图谱可以鉴别由上述因素造成的营养与活性成分差异,进而科学评价桑叶的药、食用品质。已有研究者采用色谱法对桑叶中的功效成分进行测定,并初步建立了桑叶相关功效成分指纹图谱。本文归纳气相色谱、高效液相色谱、超高效液相色谱3种常见的用于构建桑叶指纹图谱的方法,为今后建立更加丰富、完整的桑叶指纹图谱库提供技术参考。 相似文献
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本研究以一株产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌基因组DNA为模板,经PCR扩增得到的弹性蛋白基因,与GenBank中的序列对比发现同源性为99%。将弹性蛋白酶基因连入到表达载体pPIC3.5K中,经过酶切和测序鉴定证实弹性蛋白酶基因已插入到载体启动子下游,成功构建了质粒pPIC3.5K/PAE。将pPIC3.5K/PAE线性化,通过电转化将目的基因转入毕赤酵母KM71中,利用MD培养基筛选到近400个转化子,再经G418抗性的筛选,获得48株含高拷贝的重组毕赤酵母转化子并用PCR和弹性蛋白平板验证。经过甲醇诱导表达得到高表达的重组酵母菌株,酶活为1060U/mL是出发菌株的26倍。本研究成功克隆到铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因,为实现活性弹性蛋白酶的高效表达奠定了基础。 相似文献
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弹性蛋白酶基因(PAE)的克隆及在毕赤酵母中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
以1株产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)基因组DNA为模板,经PCR扩增得到的铜绿假单胞菌弹性蛋白酶(P.acruginosa elastase,PAE)基因,与GenBank中的序列对比发现同源性为99%.成功地构建了重组表达载体pPIC3.5K/PAE,莺组质粒Sac Ⅰ线性化后转化毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株KM71中,通过PCR和表型鉴定表明,PAE基因已经整合到毕赤酵母染色体上.经大量筛选获得48株含高拷贝的重组毕赤酵母转化子.在甲醇诱导下,经过毕赤酵母高密度发酵进行PAE的表达,经SDS-PAGE分析.结果表明,在培养基上清中含有一明显特异性蛋白条带,大小为34kD.活性检测结果,酶活为1 060 U/mL,是出发菌株的26倍. 相似文献
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玉米In5-2启动子功能区域在洋葱瞬时表达系统中的分析 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究旨在通过对根癌农杆菌侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰苯胺类化合物诱导元件的具体位置.在本研究中采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响.结果显示,在OD600值为0.8的农杆菌液中感染15 min,共培养3 d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统.同时,构建了含不同长度的玉米(Zea mays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰苯胺类化合物诱导元件位于ATG上游-220~-143 bp之间.结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析. 相似文献