黄葵素对结核分枝杆菌的抑杀作用研究

Objective To evaluate the antituberculous activities of Huangkuisu (HISS). Meth-ods lOStandard human strains of mycobacterium tuberculosis (H37RV) and multi-drug resistant TBstrainswere inoculated in different concentrations of HISS, blank control and positive TB drug culture medium[()observe the growth of mycobacterium tuberculosis and evaluate the antibacterial activity in vitro.②Certain number of standard strains of Mycobacterium tuberculosis H37Rv and drug-resistant strains were injected into the tail vein[()establish a mouse model of mycobacterium tuberculosis infection. The mice were randomly divided into treatment group, rifampicin, HISS treatment group treated lasting for 6 weeks; the control group was given normal saline. The antibacterial activity in vivo were evaluated[()compare the treatment results according[()the pathological changes in lung and spleen tissues (HE staining and acid-fast staining) and charging amount of bacteria. Results lOthe bactreial colonies were grew normally in model group, but were not grew in     

牛非结核分枝杆菌分离与鉴定

本试验对从吉林省不同区域的7个城市采集的503份牛颌下淋巴结样品和497份牛肠系膜淋巴结样品进行非结核分枝杆菌的流行情况的调查,样品均采自结核(副结核)变态反应阴性牛只,调查中得到阳性样品25份,阳性率2.5%,其中颌下淋巴结阳性率1.59%,肠系膜淋巴结阳性率3.42%,成功分离扩增培养出14株非结核分枝杆菌,并进行了分类鉴别,得到母牛分枝杆菌1株,龟分枝杆菌脓肿亚种2株,苏加分枝杆菌2株,偶发分枝杆菌1株,蟾蜍分枝杆菌6株,胞内分枝杆菌2株.调查结果表明:非结核分枝杆菌单独感染的情况不容乐观,应加强对非结核分枝杆菌的检验检疫工作.     

分枝杆菌噬菌体CJAUS5株holin基因的克隆与序列分析

为了研究噬菌体裂解宿主菌的机制,开发噬菌体裂解相关蛋白的应用价值,试验参照Gen Bank中登录的holin基因序列设计特异性引物,以分枝杆菌噬菌体CJAUS5基因组为模板,经PCR扩增出411 bp的条带。构建重组质粒p MD19-T-holin,经双酶切鉴定呈阳性后进行测序分析。结果显示,克隆出的holin基因与已知分枝杆菌肌尾噬菌体holin序列同源性高达99.03%~99.51%;编码的氨基酸同源性高达99%~100%。对holin基因编码的蛋白进行分析表明,Holin蛋白具有亲水性C端和两个跨膜区域。研究成功克隆了分枝杆菌噬菌体CJAUS5的holin基因并进行了氨基酸序列分析,为进一步研究Holin蛋白的生物学特性及功能奠定了基础。     

microRNAs作为结核分枝杆菌感染标志物的研究进展

微小RNA(microRN.As)是一类长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它参与基因转录后的表达调控,在免疫系统的调控和运行中具有重要作用。结核分枝杆菌是典型的胞内寄生菌,其感染能够引起人畜共患结核病。从microRNAs与结核免疫机制的相关性以及在结核分枝杆菌感染过程中巨噬细胞、外周血单核细胞及血清中microRNAs表达谱变化等方面,进行综述microRNAs作为结核分枝杆菌感染标志物的研究现状,以期为动物结核病检测提供理论参考。     

分枝杆菌噬菌体CJAUS9 lysB基因的克隆与序列分析

参照GenBank中lysB基因序列设计特异引物,以耻垢分枝杆菌噬菌体CJAUS9的基因组为模板,PCR扩增出1029 bp的条带,经酶切、PCR鉴定含有目的基因的克隆载体pMD19-T正确后进行测序分析.结果显示,克隆出的lysB基因与已知分枝杆菌肌尾噬菌体lysB序列同源性为98.7％ ～99.1％;编码的氨基酸同源性为99％～100％,有酯酶保守的G-X-S-X-G基序,为研究LysB蛋白的生物学特性奠定了基础.     

应用双重PCR技术快速鉴定结核与非结核分枝杆菌

本研究建立1种双重PCR技术,用于区分鉴定结核与非结核分枝杆菌.在最佳扩增反应条件下.检测引物P1、P2和P3、P4扩增结核分枝杆菌的特异性及敏感性,并对19株结核分枝杆菌和9株非结核分枝杆菌临床分离株进行扩增鉴定.结果表明,引物P1、P2能扩增所试13株结核和非结核分枝杆菌,P3、P4仅扩增结核分枝杆菌复合群菌种,两对引物同时扩增3种非分枝杆菌均为阴性.两对引物双重PCR检测结核分枝杆菌DNA的敏感性分别为100pg/μl和10pg/μl.检测28株临床分离株,结核分枝杆菌可扩增出368bp和225bp 2条带,非结核分枝杆菌仅扩增出一条361bp～383bp带.因此,该双重PCR技术的建立为结核及非结核分枝杆菌的快速鉴定提供了1个可供选择的手段.     

塔里木马鹿结核病的诊治

2007年新疆某规模马鹿场部分马鹿发病,仔鹿多表现为消瘦、食欲下降,营养消耗性死亡;成年鹿多表现为咳嗽、喘气、体温升高、突然喘气死亡。通过病理解剖,细菌培养,接种动物等方法确诊该鹿场马鹿死亡原因是感染了牛型结核分枝杆菌,说明牛型结核分枝杆菌可以感染马鹿。     

鹿结核病的病原分离

作者从1986年7月到1988年5月在吉林省和北京市不同地区10个鹿场,用牛型OT点眼试验,选取阳性反应的鹿只48头,捕杀后,采取眼观有病变的肺和淋巴结为病料共96份,按照《分枝杆菌鉴定规程》对96份病料进行了细菌的分离。共分离出36株分枝杆菌,分离率为75.0％(36/48)。试验证明,对鹿体分枝杆菌的分离前处理采用4％H_2SO_4处理较好。选用丙酮酸钠和改良罗氏培养基适合于分枝杆菌的分离培养。涂片采用Ziehl—Neelsen染色法较好。菌体的形态、大小及培养特性与其他动物的分枝杆菌一致。     

副结核分枝杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和鉴定

本试验通过6次细胞融合,经过3次反复克隆化与长时间培养和两次液氮中冻存、复苏,获得了10株稳定、高效地分泌抗副结核分枝杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。这些杂交瘤细胞的染色体数量均较其两种母源细胞有明显地增加,但少于两者之和;经培养产生的含单克隆抗体的培养上清液效价在1/100～1/300之间,腹水效价达万倍以上。这10株单克隆抗体都是分枝杆菌特异性的,但在分枝杆菌之间却有广泛的交叉反应。