猪骨髓抗菌肽 PMAP-37 基因片段的克隆及不同体重的表达差异

从杜长大母猪的股骨骨髓中提取基因组RNA，用RT-PCR 扩增抗菌肽PMAP-37 基因，获得1 条约282 bp 的片段，以pGEM-T Easy vector 为载体，将该基因片断克隆到大肠杆菌(Escherichia coli )DH5α 中。从筛选的阳性克隆中分离出PMAP-37 基因，测定其序列。分析表明，该片段为PMAP-37 cDNA 的部分序列，编码167 个氨基酸组成的多肽。研究得到的基因片段与报道的猪骨髓抗菌肽PMAP-37 cDNA 部分序列同源性达到98%。以PMAP-37 基因片段的克隆为基础，构建了优化的半定量RT-PCR 法，以18S rRNA 为内标，研究不同体重猪骨髓抗菌肽PMAP-37 基因表达的差异。结果发现，从刚出生到20 kg，PMAP-37 基因表达呈上升趋势，在20～40 kg，PMAP-37 基因表达呈下降趋势，40～60 kg，PMAP-37 基因表达又呈上升趋势，在60～90 kg，PMAP-37 基因表达呈下降趋势。     

猪SOCS3基因克隆及其在不同生长阶段表达差异研究

从杜长大母猪的肠系膜脂肪中提取基因组RNA，用RT-PCR扩增SOCS3基因，获得1条约332 bp的片段，以pGEM-T Easy vector 为载体，将该基因片段克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α中。从筛选的阳性克隆中分离出SOCS3基因，测定其序列，分析表明，该片段为 SOCS3 cDNA的部分序列，与GenBank中登录的猪SOCS3 cDNA部分核苷酸序列同源性达到100%。以SOCS3基因片段的克隆为基础，构建了优化的半定量RT-PCR法，以18s rRNA为内标，研究不同生长阶段猪肠系膜脂肪中SOCS3基因表达的差异。结果发现，从初生到90 kg，SOCS3基因在肠系膜脂肪中表达量呈逐渐增加的趋势，其中90 kg较初生时增加了141％（p<0.05）。     

猪乳铁蛋白N-叶基因PLF-N在大肠杆菌中的克隆、表达及特性分析

从泌乳15d的约克夏母猪乳腺组织中提取总RNA，用RT-PCR技术扩增PLF-N基因，获得1条1038bp的目的片段。将目的基因克隆到质粒载体pET-28a（＋）中，并转化大肠杆菌（Eschetichia coli）感受态细胞BL21（DE3），经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明，PLF-N基因在大肠杆菌BL2l中表达，表达产物分子量约为42kD。     

N-甲基-D-天冬氨酸对猪生长激素和生长抑素动态分泌模式及特征的影响

本试验通过在日粮中添加一定水平的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)研究其对猪生长激素(GH)和生长抑素(SS)动态分泌模式及特征的影响.选取体重为(53.0±3.6)kg的杜长大三元杂交猪60头,随机分为2组,每组3个重复,每个重复10头猪(公母各1/2,公猪已阉割),分别饲喂添加0、100 mg/kg NMDA的日粮,猪体重接近90 kg时结束试验,分析猪的生长性能并测定GH和SS.结果显示,在日粮中添加100 mg/kg的NMDA,猪的日增重显著增加(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);GH分泌的总体水平、基线水平和峰强度显著提高(P<0.05).从性别角度而言,阉公猪GH分泌总体水平增加36.91%(P<0.05);基线水平提高了55.69%(P<0.05);母猪GH分泌总体水平提高了45.95%(P<0.05);基线水平提高了50.10%(P<0.05).100 mg/kg NMDA组阉公猪与母猪SS的分泌水平有所提高,但与对照组差异不显著(P>0.05).以上结果表明:日粮添加100 mg/kg的NMDA可以促进猪的生长、提高猪GH的分泌水平,使GH分泌表现出较强的脉冲分泌规律;而NMDA对SS的分泌模式和分泌水平未产生明显影响.     

利用分散液-液微萃取和反相高效液相色谱-荧光检测器测定硒蛋白多糖中硒含量

本试验介绍了一种利用分散液-液微萃取前处理并将一种新型反相色谱柱应用于高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FLD)测定硒蛋白多糖中硒含量的方法。该方法以2,3-二氨基萘(DAN)为螯合剂,400μL乙腈为分散剂,120μL氯苯为萃取剂,硒(Ⅳ)与2,3-二氨基萘的螯合物(Se-DAN螯合物)经乙腈稀释后进行高效液相色谱分析。采用PFP色谱柱分离,乙腈为流动相,用荧光检测器在激发波长为376 nm、发射波长为520 nm条件下测定荧光强度,外标法定量。结果显示:该方法成功地用于测定硒蛋白多糖中硒含量,硒的检出限为2.5μg/L,线性范围为5.0~250.0μg/L。采用该方法测定的硒蛋白多糖中硒含量为1337.0μg/g,与荧光分光光度法(国标法)测定结果高度一致;并且,该方法也适用于酵母硒中硒含量的测定。本试验成功建立了检测硒蛋白多糖中硒含量的方法,该方法具有操作简便、易普及、试剂消耗少、分离度好、回收率高和适用性强等特点。     

日粮蛋白水平对长金猪生长性能、胴体品质及血清生化指标的影响

试验选取平均体重34 kg左右的长金猪120头,随机分为5个处理,每个处理3个重复,公、母各半。5个处理分别饲喂粗蛋白水平为14%、15%、16%、17%、18%的能量相近日粮。试验至猪体重达85 kg左右结束,根据生长性能结果分别从14%、16%、18%蛋白组随机选取4头长金猪进行屠宰,测定其胴体品质及部分血清生化指标。结果表明:长金猪最佳生长性能所需的日粮适宜粗蛋白水平为15.71%;瘦肉率和眼肌面积以16%蛋白组最高,滴水损失则以16%蛋白组最低;16%蛋白组总蛋白含量显著高于其他组,而血清尿素氮含量显著低于18%蛋白组。以上结果表明,在本试验条件下,生长肥育阶段的长金猪日粮适宜粗蛋白水平以16%为宜。     

宁海土鸡适宜日粮能量和粗蛋白质水平的研究

本实验旨在研究浙江省地方优质品种宁海土鸡各阶段适宜的能量(ME)和粗蛋白质(CP)水平。选用1日龄宁海土鸡健雏900羽(公母各半),随机分为9个处理,每个处理2个重复,每个重复50羽,分三个阶段饲养(0～4周、5～8周、9周以上),公母鸡分别于第14、17周龄结束试验,测定不同性别、不同阶段的日粮、不同日粮营养水平对宁海土鸡日增重、饲料转化率等生长性能的影响。试验结果显示宁海土鸡各阶段最佳能量、蛋白质及蛋能比为:第一阶段(0～4周)分别为11.90MJ/kg、20.03%、16.83g/MJ;第二阶段(58周)分别为12.20MJ/kg、18.02%、14.78g/MJ;第三阶段(9周以上)分别为12.30MJ/kg、17.46%、14.20g/MJ。结果提示优质黄羽肉鸡的适宜能量和粗蛋白质水平需求受生长阶段的影响,各地区应根据本地方品种的生理特点设计日粮,并推荐浙江地区参考宁海土鸡日粮能量和粗蛋白质水平。     

猪营养与饲料技术策略及应用

主要有三方面，饲用抗生素残留问题；霉菌毒素污染的问题；重金属超标。这三方面不仅是生物安全问题还是影响猪的生长效率的问题。所以我们从不同角度加以分析。     

甜菜碱对生长猪增重和胴体组成影响的性别差异及机理

６０头约２０ｋｇ的杜长大三元杂交猪随机分成２个处理组，即对照组和试验组，每个处理有３个重馥组，每个重复１０头，对照组饲喂不含甜菜碱的饲粮，试验组饲喂含１５００ｍｇ／ｋｇ甜菜碱的饲粮，试验猪结束体重约６５ｋｇ从试验组和对照中挑无穷本重相近的阉公猪，母猪各６头进行屠宰试验，结果表明：饲喂甜菜碱使以猪、母猪的日增重分别达１０．３０％和１５．６３％、提高瘦肉率３．０１％和８．２０％，提高母猪的眼赂％；而阉